收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

蜂王浆蛋白质、多肽生物活性及储藏过程中品质变化研究

齐旦旦  
【摘要】:蜂王浆作为一种珍贵的保健食品已经有千百年的历史了,其对人体的各种生物活性与含有的功能性成分是近年来的研究热点。本研究检测了蜂王浆的物理、化学特性、储藏稳定性和抗氧化活性,初步研究了它对脂肪酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性,优化了蜂王浆蛋白质酶解法制备活性多肽的条件并对活性组分进行纯化以提高活性。 本论文采用杭州保灵养泰禾提供的蜂王浆,在4℃、25℃、37℃下各保存30天,发现样品的水溶性蛋白质含量、氨基酸含量、多肽含量、水分含量等逐渐下降,而水解度、脂肪氧化程度、酸度逐渐提高,酸败程度逐渐增加,颜色变暗;通过对脂类物质的GC-MC分析,检测出24种脂类成分;通过SDS-PAGE电泳分析,发现储藏温度越高,蜂王浆水溶性蛋白质降解就越明显。这些理化指标随温度和时间的变化较敏感,可作为品质评价的参考,也说明了蜂王浆储藏稳定性较差,可能是引起活性变化的原因。 通过对蜂王浆生物活性的分析,发现蜂王浆蛋白质提取液有较高的抗氧化活性,并首次发现蜂王浆具有较高的脂肪酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。蜂王浆蛋白质对DPPH自由基的清除率最高能达到60%以上;对邻苯三酚自氧化的抑制率最高能达到91.89%;对脂质体过氧化的抑制率最高能达到60.10%;其抗氧化活性随着储藏时间逐渐下降,储藏温度越高,活性下降越快。蜂王浆蛋白质对脂肪酶的抑制率最高能达到76.59%,对脂肪酶的抑制常数ki为5.53×10-2mg/mL,抑制类型为竞争性抑制,抑制活性随着储藏温度和储藏时间的增加而下降;对α-葡萄糖苷酶的抑制活性最高达到66.23%,抑制常数ki为11.74mg/mL,抑制类型为混合竞争性抑制。 本实验用单因素试验和Box-Bohnken中心组合设计试验,优化了蜂王浆蛋白质酶解制备活性多肽的工艺参数,选择胃蛋白酶为作用酶,蛋白质提取料液比1:50,酶解时间5.7h,初始pH2.3,酶用量21mg/mL,酶解温度35℃,在此条件下,多肽浓度达到1.65mg/mL,且抗氧化活性、对脂肪酶的抑制活性和对α-葡萄糖苷酶的抑制活性都明显提高,说明酶解处理提高了蜂王浆的利用价值。 蜂王浆蛋白质在三种酶解方式作用下的产物:PPs(胃蛋白酶酶解)、TPs(胰蛋白酶酶解)、PTPs(胃蛋白酶和胰蛋白酶复合酶解)。其中对DPPH自由基的清除活性最强的是PTPs,样品的水解度最高,氨基酸产率也最高;而对于超氧阴离子的清除活性及对脂肪酶、α-葡萄糖苷酶的抑制活性来说最强的是PPs,样品的多肽含量最高;从各分子量范围的酶解产物来看,PPs中小于650D的肽段对超氧阴离子的清除活性及对脂肪酶、α-葡萄糖苷酶的抑制活性最强。 将酶解产物中含量百分比和对α-葡萄糖苷酶抑制活性都较高的3kD-5kD的肽段通过sephadex-LH-20凝胶层析分离和DEAE CelluloseDE-52离子交换层析分离得到在1mg/mL浓度下对α-葡萄糖苷酶的抑制率达到73.79%,IC50为0.64mg/mL的纯化产物,其活性明显高于分离前,并通过体外模拟消化分析了产物的稳定性。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 胡元强;;学习贯彻GB9697-2008《蜂王浆》国家标准的体会[J];蜜蜂杂志;2008年10期
2 邵瑞宜;;工蜂上颚腺的分泌物——蜂王浆(下)[J];蜜蜂杂志;1986年02期
3 倪亚;蜂王浆治疗外伤15例[J];蜜蜂杂志;1998年01期
4 王娟丽;蜂王浆与医疗保健[J];山西食品工业;1998年03期
5 郭芳彬;论蜂王浆抗衰老作用机理[J];养蜂科技;1998年04期
6 黄坚;蜂王浆尤如美容霜[J];养蜂科技;2000年02期
7 刘克武,杨守忠,葛绍荣,刘晓雯,闵丽娥,张斌,喻东,刘鑫;蜂王浆的抗菌活性研究[J];蜜蜂杂志;2001年02期
8 郭芳彬;运动员的理想食品蜂王浆——从高桥尚子获奥运会女子马拉松冠军说起[J];蜜蜂杂志;2001年06期
9 刘光楚;蜂王浆外用美容法[J];中国养蜂;2001年06期
10 郭芳彬;蜂王浆与肝脏病[J];养蜂科技;2002年01期
11 汪红;;《蜂王浆》新国标[J];农产品市场周刊;2008年37期
12 李畔久;;用蜂王浆强身祛病延缓衰老[J];中国蜂业;2009年06期
13 薛国华;;对蜂王浆供需关系周期性规律一文的补充[J];蜜蜂杂志;1993年04期
14 方文富,侯光珊,李传东,彭文君;FWF型电动蜂王浆分离机的研制[J];蜜蜂杂志;1996年12期
15 金圣惜;蜂王浆治病举例[J];蜜蜂杂志;1998年10期
16 郭芳彬;蜂王浆防癌抗癌探秘[J];养蜂科技;1998年06期
17 柴振国 ,杜文义;蜂王浆助我活到耄耋之年[J];中国养蜂;2002年06期
18 倪辉,吉挺,杨远帆;蜂王浆抗菌作用的初步研究[J];蜜蜂杂志;2003年02期
19 尹志国;;小儿盗汗服蜂王浆好[J];蜜蜂杂志;2007年03期
20 黄坚;;浅谈蜂王浆营养与保鲜[J];科学种养;2007年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李忠谱;;蜂花粉、蜂王浆、蜂蜜等系列产品加工技术转让简介[A];中国自然资源学会全国第二届天然药物资源学术研讨会论文集[C];1997年
2 茹清静;施维群;李天一;章亮;徐珊;;癸烯酸及蜂王浆防治大鼠肝纤维化的实验研究[A];全国第3届中西医结合传染病学术会议暨中国中西医结合学会传染病专业委员会第2届委员会议论文汇编[C];2010年
3 王胜国;;保健药品的食用禁忌[A];浙江省第十四届农村医学暨乡镇卫生院管理学术会议论文汇编[C];2006年
4 李盛东;姜元姣;;蜜蜂育种提高蜂王浆的产量与品质[A];中国养蜂学会蜜蜂育种专业委员会第四次学术研讨会论文集[C];2007年
5 时晓晶;杨炜;赵可怡;杨胜祖;;气相色谱法测定蜂王浆及其制剂中的10-羟基-2-癸烯酸[A];天津市第五次色谱学术交流会论文集[C];1987年
6 李敏;邱璐;黄雪强;凌昌全;潘品荣;;中药黄芪对蜂王浆矿物质和维生素C含量的影响[A];中国营养学会第八次全国营养学术会议论文摘要汇编[C];2000年
7 苏松坤;沈飞英;戎映君;陈盛禄;李言清;包文涛;;蜂王浆中活性组分的研究[A];2005年中国养蜂学会蜜蜂产品专业委员会、蜜蜂保护专业委员会、蜜蜂授粉专业委员会联合工作会议和学术研讨会论文集[C];2005年
8 黄小凤;李中林;;蜂王浆及其主要成份E-10-羟基2-烯癸酸的分离提取鉴定、分析、合成及其抗辐射作用[A];第七届全国精细化学品化学学术会议论文集[C];2004年
9 苏松坤;湛毅;陶挺;刘新军;杨红杰;陈盛禄;;蜂王浆中促进小鼠生长活性组分的研究[A];中国养蜂学会蜜蜂饲养管理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2007年
10 苏松坤;刘芳;陶挺;刘新军;杨红杰;陈盛禄;;蜂王浆中提高小白鼠肝脏谷胱甘肽(GSH)含量活性组分的研究[A];中国养蜂学会蜜蜂饲养管理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吴黎明;蜂王浆新鲜度指标和评价方法研究[D];浙江大学;2008年
2 许宝华;蜂王浆对日本大耳兔生长及繁殖性能的影响[D];江西农业大学;2011年
3 李建科;意大利蜜蜂产浆量性状的微卫星DNA和数量遗传研究[D];浙江大学;2003年
4 张海生;蜂蛹黄酮的提取、分离和蜂蛹产品的生物学功能评价[D];陕西师范大学;2005年
5 蒋原;HPLC/MS/MS测定兽药残留及其在螯虾中消除规律的研究[D];南京农业大学;2005年
6 贺春玲;长木蜂蜂粮防腐机理研究[D];南京林业大学;2009年
7 陈德宇;前列腺素D合成酶在男性生殖中的基础及应用研究[D];南京师范大学;2005年
8 王凤忠;蜂胶王浆软胶囊制备、功能评价及全程质量控制体系研究[D];中国农业科学院;2011年
9 朱建军;铜在含有蛋白质的模拟宫腔中的腐蚀行为研究[D];中国科学院上海冶金研究所;2000年
10 张伟;铬对肉仔鸡能量、蛋白质与脂肪代谢的影响及作用机制的研究[D];东北农业大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 齐旦旦;蜂王浆蛋白质、多肽生物活性及储藏过程中品质变化研究[D];浙江工商大学;2012年
2 常丹;蜂王浆蛋白抑菌、抗氧化活性及其在肉品保鲜中的应用[D];西北大学;2011年
3 周明;蜂王浆对雄性大、小鼠的生理生化指标及基因组甲基化的影响[D];江西农业大学;2011年
4 叶南慧;蜂王浆的部分药理活性的研究[D];福建农林大学;2003年
5 陈静;蜂王浆的酶法修饰及其ACE抑制活性和抗氧化活性研究[D];华中农业大学;2012年
6 郭正松;蜂王浆中活性小分子物质的研究[D];福建农林大学;2004年
7 周骁;蜂王浆品质评价研究[D];中国农业科学院;2008年
8 侯春生;蜂王浆中活性小分子物质2,6-二叔丁基苯酚的抗衰老作用研究[D];福建农林大学;2007年
9 薛晓锋;蜂王浆中四环素族药物残留测定方法研究[D];中国农业科学院;2008年
10 刘合生;蜂王浆活性蛋白的分离、纯化、生物活性及结构初步表征[D];华中农业大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 成春到;怎样提高蜂王浆的产量[N];中国畜牧报;2003年
2 实习记者  肖玮;我国出口蜂王浆遭日本退货[N];北京现代商报;2006年
3 郭艾琳;中国蜂王浆出口遇“寒冬”[N];第一财经日报;2006年
4 本报记者  张悦;输日蜂王浆受挫“药残”关[N];国际商报;2006年
5 健康时报实习记者 李梅浠特约记者 尹琳;热天怎么吃蜂王浆?[N];健康时报;2008年
6 广蜂;低价蜂王浆“三无产品”多[N];中华合作时报;2000年
7 健康时报实习记者  刘奇民;蜂王浆最好舌下含服[N];健康时报;2005年
8 中国农科院蜜蜂研究所;蜂王浆知识知多少[N];科技日报;2003年
9 郭艾琳;蜂王浆出口遭遇日本“肯定列表”寒冬[N];经理日报;2006年
10 邓丽丽;补益良品蜂王浆[N];人民政协报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978