大豆蛋白抗原对断奶仔猪的免疫原性及作用机理研究

【摘要】： 本实验将大豆球蛋白(11S)和β-伴大豆球蛋白(7S)作为抗原免疫仔猪,然后再对仔猪大剂量注射大豆蛋白抗原进行致敏,研究大豆蛋白抗原对断奶仔猪木糖吸收能力、生长性能、体液免疫、小肠消化酶活性、黏膜形态以及小肠中组胺含量的影响,探讨大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白对断奶仔猪的免疫原性、作用机理及免疫效果。 首先选取56头7日龄“杜×长×大”三元杂交仔猪,按体重和性别随机分成7组,每组8头。仔猪经皮下注射进行免疫,其中对照组注射生理盐水0.5 mg,实验组分别注射3个剂量(100、500和1000μg/kg·w)的大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,21日龄时进行二免。所有仔猪均于22日龄断奶,在7、21、35日龄经前腔静脉采血,用于免疫指标的测定,同时进行仔猪的皮肤红斑直径试验,探索大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白对断奶仔猪的免疫原性和最佳免疫剂量。在大豆蛋白抗原对断奶仔猪的免疫原性试验的基础上,再选取88头7日龄“杜×长×大”三元杂交仔猪,按体重和性别随机分成11个组,每组8头。A组注射生理盐水0.5 mg, 11S B、C、D组免疫500μg/kg·W的大豆球蛋白,21日龄进行二免,23日龄C、D组分别肌肉注射11S 2500、5000μg /kg·W,E、F组不免疫,在23日龄分别肌肉注射11S 2500、5000μg/kg·W;7S分组同11S。所有仔猪于23日龄断奶,在7、21、35日龄时空腹称重,计算平均日增重,同时于7、21、35日龄进行前腔静脉采血,用于测定血清中免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、总IgE。试验结束时,每组选择5头仔猪进行屠宰,取十二指肠近端、空肠中段、回肠近段,测量仔猪肠黏膜绒毛高度、隐窝深度,测定消化酶活性和组胺含量。 结果表明: 1、11S和7S组仔猪皮肤红斑直径均在10~20 mm之间,致敏性为++。与对照组仔猪比较,11S和7S组的致敏性极显著升高(P0.01),且7S的致敏性显著高于11S的致敏性。 2、对仔猪免疫500、1000μg/kg·w的11S,仔猪的红斑直径明显降低,但木糖的吸收能力没有明显提高。免疫500、1000μg/kg·w的7S,仔猪的红斑直径明显降低,木糖吸收能力明显提高,但两组仔猪红斑直径、木糖吸收能力差异不显著。 3、对仔猪免疫11S,血清中的特异性抗体IgG不能达到有效的抗体滴度;免疫500、1000μg/kg·w的7S,血清中特异性抗体IgG能达到有效的抗体滴度,且两剂量之间差异不显著。 4、注射2500、5000μg/Kg·W的大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白可显著降低断奶仔猪的平均体重和平均日增重,且β-伴大豆球蛋白致敏组明显低于大豆球蛋白致敏组。对仔猪提前免疫大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白,能显著提高断奶仔猪的生长性能,免疫β-伴大豆球蛋白组仔猪生长性能明显高于大豆球蛋白组。 5、注射2500、5000μg/Kg·W的大豆球蛋白可显著降低断奶仔猪十二指肠、回肠中胰淀粉酶、蛋白酶和十二指肠脂肪酶活性,注射β-伴大豆球蛋白可明显降低断奶仔猪十二指肠、空肠中段胰淀粉酶、蛋白酶和十二指肠中脂肪酶活性,注射剂量越大,酶活性越低;对仔猪提前免疫大豆蛋白抗原能显著提高小肠中淀粉酶和蛋白酶活性。 6、注射2500、5000μg/Kg·W的大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白后,仔猪血清中IgG、总IgE抗体水平明显升高,注射β-伴大豆球蛋白组仔猪血清中IgG、总IgE抗体水平显著高于大豆球蛋白组,注射剂量越大,IgG、总IgE抗体水平越高;IgA和IgM抗体水平变化不显著。提前免疫大豆蛋白抗原后,仔猪血清中IgG抗体水平明显升高,总IgE抗体水平明显降低,免疫β-伴大豆球蛋白组仔猪血清中的IgG抗体水平明显高于大豆球蛋白组,总IgE抗体水平明显低于大豆球蛋白组,IgA和IgM抗体水平变化不显著。 7、注射2500、5000μg/Kg·W的大豆球蛋白能使十二指肠、回肠中组胺含量明显降低,β-伴大豆球蛋白能使十二指肠、空肠中组胺含量明显降低,注射剂量越大,组胺含量越低;免疫大豆蛋白抗原能显著提高小肠中的组胺含量。 8、大豆球蛋白能使十二指肠、回肠黏膜结构受损,β-伴大豆球蛋白能使十二指肠、空肠黏膜结构受损,表现为小肠绒毛高度下降、隐窝变深,且注射剂量越大,损伤越严重;提前免疫大豆蛋白抗原,能显著提高小肠绒毛高度,降低隐窝深度。 总之,大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白引起断奶仔猪的过敏反应为Ⅰ、Ⅲ复合型超敏反应,超敏反应的程度与大豆蛋白抗原的浓度有关,浓度越高产生的超敏素就越多,并且β-伴大豆球蛋白免疫原性明显强于大豆球蛋白。仔猪免疫大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白的最适免疫剂量为500μg/Kg·W,β-伴大豆球蛋白的的免疫效果明显优于大豆球蛋白。