收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

降香黄檀与多裂黄檀木材DNA提取及其rDNA-ITS序列分析

余敏  
【摘要】:木材是一种在人类生存和发展过程中不可或缺的可再生资源。在人们的生产、生活中,木材的保护和合理利用成为人们所关注的焦点。随着时代的发展和人们生活水平的不断提高,木制材料在生活中的应用越来越受到人们的青睐,特别是一些高档名贵木材制品也跻身于奢饰品行列,成为人们追求生活品质的象征。正是由于这些珍稀名贵木材与普通木材在价格上差距不断增大,导致一些不法分子利益熏心,将一些容易混淆和不易区分的树种以及木材制品当做名贵珍稀树种和木材制品进行销售,极大地扰乱了红木市场、仿古木市场、古典家具市场和名贵乐器市场的正常秩序,在经济上和精神上给消费者带来了巨大的损失和打击。因此,在木材加工、利用、使用和贸易活动中,对木材进行科学、快速、准确的识别和鉴定显得尤为重要和迫切。相比较传统的木材识别方法而言,DNA分析是一种有效地鉴别木材的方法。 本论文以不同产地人工林中采取的降香黄檀(Dalbergia odorifera T. Chen)木材和多裂黄檀(Dalbergia rimosa Roxb)木材为研究对象,采用改良的CTAB法,PTB法(N-phenacylthiazolium bromide)和DNA抽提试剂盒(QIAGEN)三种方法分别对不同产地、不同部位、不同干燥处理方式的降香黄檀以及多裂黄檀木材的DNA进行提取、纯化、5.8S rDNA和ITS序列测序,分析不同部位和不同干燥方式对降香黄檀木材DNA提取及DNA序列扩增的影响,揭示不同产地降香黄檀DNA序列之间的差异以及降香黄檀和多裂黄檀DNA序列之间的差异,为利用rDNA-ITS序列鉴定降香黄檀木材及其常见混伪品提供理论依据。研究结果如下: 1.三种方法(改良的CTAB法,PTB法和DNA抽提试剂盒)从边材和心材部位提取DNA浓度范围分别为:75.95-937.38ng/μL,4.46-806.56ng/μL,其中PTB法从边材和心材部位提取的DNA浓度都是最高的,采用试剂盒法提取得到的DNA浓度都是最低的。三种方法提取的边材部位DNA经纯化处理后能够满足PCR扩增目的片段的要求;只有PTB法提取的心材部位的DNA经纯化处理后能够满足PCR扩增目的片段的要求。三种方法都能够从边材组织中提取出DNA,PTB法更适合从心材组织中提取DNA。 2.不同干燥温度处理对降香黄檀心、边材DNA及PCR扩增ITS序列影响。结果表明:经25℃和65℃温度处理后的心、边材基因组,凝胶电泳检测呈现不同程度的弥散分布,DNA降解片段范围分布15000bp以下,105℃干燥处理后的心、边材基因组均降解成250bp以下的小片段。心材部分经不同温度(25℃,65℃,105℃)干燥处理后,PCR扩增均是失败的,只有25℃处理后的边材ITS序列能够被扩增出来。根据本试验结果可推断,PCR扩增ITS序列失败,是由于随着干燥温度的升高导致木材基因组DNA降解程度加剧,且都呈现小片段化,无法满足PCR扩增模板的要求。干燥温度越高,对PCR扩增ITS序列影响越大。 3.通过使用根据GenBank数据库中已登录的豆科黄檀属18S、26S基因保守序列设计的特异性引物(JT1-JT2),能够有效地避免内生菌的干扰,成功地扩增出ITS序列。通过对PCR反应体系的调整及优化,最终确定了扩增ITS序列最优的反应体系及参数,其中关键的参数和条件确定为:引物浓度为1.5μM,Mg2+浓度为2.0mM,退火温度为56.4℃。 4.通过对不同产地的降香黄檀ITS序列和降香黄檀与多裂黄檀ITS序列比较,结果显示,不同产地的降香黄檀和多裂黄檀ITS(包括5.8S)序列的长度均为603bp,降香黄檀和多裂黄檀的5.8S长度均为164bp,且编码区5.8S相当保守并未发现变异位点,不同产地降香黄檀ITS序列差异很小。降香黄檀和多裂黄檀ITS2区变异分布明显大于ITS1区,二者的ITS区域共有6个变异位点,这6个位点可以作为鉴别降香黄檀和其近缘种的ITS特异性位点。系统发育树研究表明,降香黄檀与多裂黄檀有着稳定的遗传差异性,这种差异性主要体现在二者ITS碱基序列的变异性上,同时也说明降香黄檀与多裂黄檀在黄檀属中有着较近的亲缘关系,但是二者又不属于同一植物类群。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张欣;李熠;魏宇昆;王银华;林枫;任安芝;高玉葆;;内蒙古中东部草原羽茅Epichloё属内生真菌的分布及rDNA-ITS序列系统发育[J];生态学报;2007年07期
2 刘春来;杨明秀;文景芝;;大豆疫霉菌ITS分子检测程序的建立及其应用[J];微生物学通报;2007年06期
3 郑俊娟;林琦;何培新;贺新生;;中国垂幕菇属新记录种——瘤核垂幕菇的形态学鉴定及ITS系统发育分析[J];菌物研究;2011年01期
4 王旭丽;康振生;黄丽丽;杨鹏;;ITS序列结合培养特征鉴定梨树腐烂病菌[J];菌物学报;2007年04期
5 谭海燕,郝秉中,吴继林;热带落叶树降香黄檀次生韧皮部薄壁组织细胞超微结构的季节变化[J];云南植物研究;2000年04期
6 马腾飞;许振;冯琳燕;李小方;孙越;许玲;;崇明水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)盆栽褐枯病病原的鉴定[J];华东师范大学学报(自然科学版);2010年06期
7 吴继林,郝秉中,谭海燕;降香黄檀次生韧皮部薄壁组织细胞液泡蛋白质的形成和积累的超微结构研究[J];云南植物研究;1997年04期
8 陈碧华;姚庆端;李乾振;范辉华;吴培衍;;降香黄檀组织培养技术研究[J];武夷科学;2010年00期
9 林丽玉;;福建省仙游县降香黄檀造林现状与展望[J];科技信息(科学教研);2008年08期
10 郝秉中;吴继林;;降香黄檀着叶期和无叶期次生韧皮部筛分子的超微结构[J];Journal of Integrative Plant Biology;1992年05期
11 杨云;孟慧;魏建和;甘炳春;;降香黄檀基因组DNA的提取方法研究[J];生物技术通讯;2009年03期
12 陆俊锟;徐大平;杨曾奖;张宁南;;慢生根瘤菌DG的分离、鉴定及其与降香黄檀的共生关系[J];应用与环境生物学报;2011年03期
13 杨曾奖;徐大平;曾杰;郭俊誉;林清锦;姚庆端;;南方大果紫檀等珍贵树种寒害调查[J];林业科学;2008年11期
14 徐大平;杨曾奖;梁坤南;张宁南;曾杰;;华南5个珍贵树种的低温寒害调查[J];林业科学;2008年05期
15 钱义咏;云南黄檀属一新种[J];热带亚热带植物学报;1999年02期
16 钱义咏;云南黄檀属一新种[J];热带亚热带植物学报;2002年01期
17 刘寿养;广西黄檀属(蝶形花科)一新种—靖西黄檀[J];热带亚热带植物学报;2004年06期
18 李世晋;吴鸿;;中国黄檀属植物(豆科)一新记录[J];热带亚热带植物学报;2007年02期
19 宋柱秋;许东先;李世晋;;红果黄檀一新异名[J];热带亚热带植物学报;2011年04期
20 李世晋;吴鸿;张奠湘;;黄檀属模式指定及新异名(英文)[J];植物分类学报;2007年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 何凯;杨水英;李晓蕊;薛少兰;青玲;孙现超;;重庆市柑橘炭疽病菌的生物学特性研究和rDNA-ITS区序列分析[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
2 郑金龙;高建明;张世清;陈河龙;刘巧莲;易克贤;;剑麻茎腐病菌rDNA-ITS序列分析[A];第三届全国生物入侵大会论文摘要集——“全球变化与生物入侵”[C];2010年
3 杨晓野;王瑞;石品超;罗晓平;;骆驼福斯盘尾丝虫rDNA-ITS序列分析研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
4 孟慧;杨云;陈波;陈伟平;冯锦东;魏建和;;外界刺激降香黄檀心材类物质形成[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
5 王萍;王学征;马鸿艳;栾非时;窦宝旗;;黑龙江省甜瓜白粉病病原菌鉴定及rDNA-ITS序列分析[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
6 许东先;;黄檀属的系统学研究[A];2011年全国系统与进化植物学暨第十届青年学术研讨会论文集[C];2011年
7 ;前言[A];海南生物技术研究与发展研讨会论文集[C];2006年
8 李世晋;张奠湘;吴鸿;;中国黄檀属植物(豆科)分类学修订[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
9 魏建和;张争;杨云;高志晖;张兴丽;陈怀琼;孟慧;陈伟平;;诱导型药用次生代谢产物合成机制及应用研究[A];第九届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2010年
10 李世晋;张奠湘;吴鸿;;中国黄檀属植物(豆科)分类学修订[A];广东省植物学会第十七期学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 欧师琪;禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae sensu lato)分子特征分析[D];吉林农业大学;2008年
2 王旭丽;中国苹果树腐烂病菌的种类:rDNA-ITS序列和表型比较研究[D];西北农林科技大学;2007年
3 赵嘉平;树木溃疡病菌—葡萄座腔菌属及相关真菌系统分类研究[D];中国林业科学研究院;2007年
4 陆俊锟;印度檀香与寄主植物间寄生关系的研究[D];中国林业科学研究院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余敏;降香黄檀与多裂黄檀木材DNA提取及其rDNA-ITS序列分析[D];安徽农业大学;2012年
2 汪德州;基于matK及rDNA-ITS对川西荞麦的分子系统关系研究[D];四川农业大学;2011年
3 李婷婷;江蓠科5种海藻cox1、5.8S rDNA-ITS、rbcL和rbc spacer序列分析及分子系统学研究[D];中国海洋大学;2012年
4 勾利美;冠环属线虫rDNA-ITS序列分析及系统发育研究[D];河南师范大学;2012年
5 黄星;降香黄檀籽黄酮的提取分离及生理活性研究[D];江南大学;2012年
6 闵晓芳;柑橘采后致病青霉的分离鉴定及其生物学特性研究[D];华中农业大学;2007年
7 季健清;海南省根结线虫鉴定与北方根结线虫的分子鉴定方法[D];南京农业大学;2005年
8 李敏;龙须菜半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因的克隆和分析及其表达与琼胶合成的相关性研究[D];中国海洋大学;2008年
9 郜瑞敏;河南省小麦黑胚病优势病原菌链格孢(Alternaria spp.)遗传多样性及rDNA ITS序列分析[D];河南农业大学;2009年
10 吴朝辉;不同光照强度和施肥水平对降香黄檀容器苗质量的影响[D];南京农业大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 许海生;海南黄檀如何枝茂莆仙[N];福建日报;2007年
2 ;“精、巧、雅”的明式黄花黎家具[N];经济日报;2006年
3 本报记者 袁琳 本报通讯员 屈艳 吴坚宝;房前屋后种下家财万贯[N];广西日报;2011年
4 ;户种百株黄檀 留下百万家产[N];福建日报;2007年
5 陈金荣 薛支祥;长泰 万株名贵苗木赠灾民[N];闽南日报;2007年
6 记者 赵锦飞 通讯员 陈秀珍;他把荒山变宝藏[N];福州日报;2009年
7 邓建华;白沙将建设国家珍稀树种基地[N];海南日报;2004年
8 石读钟;平和:打造绿化名品村[N];闽南日报;2011年
9 本报记者  郑美清 吴思辉 陈建平 通讯员  郑志忠;仙游:为了“绿色银行”的增值[N];福建日报;2006年
10 胡立丽;舒适的沙发没有硬木座椅益健康[N];卫生与生活报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978