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棉花红腐病菌生理生化及有效复配剂筛选研究

潘月敏  
【摘要】:本论文研究了温度、pH 和营养条件对棉花红腐病菌生长和产孢量的影响,分析了 4 个棉铃红腐病菌菌株和 6 个其他镰孢菌菌株酯酶同工酶和可溶性蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱;并在人工接种的条件下,对接种棉花红腐病菌的棉花植株体内超氧化物歧化酶、多酚氧化酶、过氧化物酶三种抗病酶系活性进行了动态分析;测定了施保克等 7 种杀菌剂对棉花红腐病菌的室内毒力,在此基础上进行了复配剂的筛选。主要研究结果如下: 1.对棉花红腐病原菌的生物学特性研究结果表明,该菌在 10~35℃条件下均能生长,最适生长温度为 25~30℃,温度低于 5℃或高于 40℃菌丝不能生长,分生孢子致死温度为 52℃。病原菌在 pH 值在 2.5~12.5 的范围内均能生长,呈现双峰曲线,即 pH 值在 4.1~11.5 生长较快,尤以 pH5.5 和 pH10.3 的条件下菌丝生长更快。分生孢子在 pH 值为 2.47~10.54 之间均可以萌发,pH 值在 3.99~7.0 时,分生孢子的萌发率最高。该菌对多种单糖、双糖和多糖等碳源及有机氮和无机氮均能够利用。就碳源而言,菌丝线性生长以在葡萄糖为碳源的培养基上最快,麦芽糖、甘露醇次之;产孢量以在蔗糖为碳源的培养基上最高,麦芽糖和甘油次之;液体培养时,以果糖为碳源时菌丝干重值最大,麦芽糖次之。就氮源而言,磷酸氢二铵最适合菌丝线性生长,硝酸钾、硝酸铵次之;硝酸铵最适合产孢,硝酸钾次之;液体培养时以 NaNO3 为氮源的培养基最适合病菌生长(菌丝干重值最大)。在 11 种供试培养基中,马铃薯Ⅰ(马铃薯 125g 煮汁+水 1000ml+琼脂 20g)和马铃薯Ⅱ(马铃薯 125g 煮汁+葡萄糖 2.5g+水 1000ml+琼脂 20g)较适合于菌丝生长;不同培养基上病菌产孢量存在显著差异,其中以淀粉培养基的产孢量最高,其次为 PSA,马铃薯Ⅱ与 PDA 产孢量一般,其他培养基产孢量均较低。 2.分析了 4 个棉铃红腐病原菌菌株和 6 个其他镰孢菌菌株酯酶同工酶和可溶性蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱,结果表明,PDA 培养的菌株酶带较丰富,并发现供试菌株的种间同工酶酶谱差异明显,10 株镰孢菌被明显分成 3 组。可溶性蛋白电泳图谱分析表明,菌株间酶带数量和强弱有一定差异。本实验结果还表明,同工酶电泳方法简单易行,能反映镰孢菌种间及种内不同菌株之间工酶酶谱的差异,可作为镰孢菌的种及种下分类的一个辅助手段。 3.在温室条件下,对棉花植株接种棉花红腐病菌后 10d 内,分别系统测定 SOD、POD、PPO 等 3 种酶的活性。结果表明,棉株接种后,各品种(系)叶片 POD、SOD酶活性均升高,它们是与体内抗病性有关的酶系。中棉 29 接种病菌后 PPO 活性明


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