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一氧化氮对小鼠胚胎体外发育的影响

檀利长  
【摘要】: 胚胎培养技术是动物体外胚胎生产的关键环节之一,是生物技术的一个核心部分。近年来,胚胎培养技术虽然已得到很大程度的提高,但是还存在在生产效率低下、培养体系不稳定、胚胎质量不高等问题。NO作为一种自由基性质的生物信使,在动物体内发挥多种效应,在早期胚胎发育过程中具有调节作用,但目前关于NO影响早期胚胎发育的研究报道较少。本试验利用昆明小鼠作为试验材料,在小鼠体外受精液和胚胎培养液分别添加不同浓度的SNP,添加SNP的浓度分别为0mmol/L、1mmol/L、0.1mmol/L、0.01mmol/L和0.001mmol/L。探讨不同浓度SNP对小鼠体外受精、受精后胚胎及体内胚体外发育卵裂率、囊胚率、4-细胞率、囊胚总细胞数等指标的影响。 结果表明:①体内胚体外培养时,0.01mmol/L SNP组、0.001mmol/L SNP组和0mmol/L SNP组对小鼠胚胎卵裂率没有差异(P>0.05);但是4-细胞率0.01mmol/L SNP组显著高于0.001mmol/L SNP组和0mmol/L SNP组(P<0.05),0.001mmol/L SNP组与0mmol/L SNP组之间没有差异(P>0.05);囊胚率0.01mmol/LSNP组、0.001mmol/L SNP组和0mmol/L SNP组之间没有差异(P>0.05):就囊胚总细胞数而言,0.001mmol/L SNP组显著高于0.01mmol/L SNP组和0 mmol/LSNP组(P<0.05);就是在卵裂率、4-细胞率、囊胚率和囊胚总细胞数等方面,0.01mmol/L SNP组、0.001mmol/L SNP组和0mmol/L SNP组均极显著高于0.1mmol/L SNP组和1.0mmol/L SNP组(P<0.01),0.1mmol/L SNP组与1.0mmol/LSNP组之间也存在显著差异(P<0.05)。②小鼠体内胚体外培养4-细胞前添加SNP时,0.001mmol/L SNP组与0mmol/L SNP组和0.01mmol/L SNP组之间囊胚率没有显著差异(P>0.05),但0.01mmol/L SNP组囊胚率显著高于0mmol/L SNP组(P<0.05),0.01mmol/L SNP组、0.001mmol/L SNP组和0mmol/L SNP组囊胚率均极显著高于0.1mmol/L SNP组和1.0mmol/L SNP组(P<0.01)。③体外受精时,0.001mmol/L SNP组卵裂率显著高于0mmol/L SNP组和0.01mmol/L SNP组(P<0.05),0.01mmol/L SNP组与0mmol/L SNP组之间卵裂率没有显著差异(P>0.05):0mmol/L SNP组、0.01mmol/L SNP组、0.001mmol/L SNP组之间囊胚率没有显著差异(P>0.05);对胚胎进行囊胚总细胞计数时发现,在小鼠受精液中添加0.001mmol/L SNP的胚胎总细胞数显著高于0mmol/L SNP组和0.01mmol/L SNP组(P<0.05),但0.01mmol/L SNP组与0mmol/L SNP组之间没有显著差异(P>0.05);0.01mmol/L SNP组、0.001mmol/L SNP组和0mmol/L SNP组卵裂率和囊胚率均极显著高于0mmol/L SNP组和1.0mmol/L SNP组(P<0.01),0.1mmol/L SNP组极显著高于1.0mmol/L SNP组(P<0.01)。④体外受精胚培养时,0.01mmol/L SNP组的4-细胞率显著高于0mmol/L SNP组和0.001mmol/L SNP组(P<0.05),0mmol/L SNP组与0.001mmol/L SNP组之间没有差异(P>0.05)。三组均极显著高于0.1mmol/L SNP组和1.0mmol/L SNP组(P<0.01)。0.1mmol/L SNT组极显著高于1.0mmol/L SNP组(P<0.01);囊胚率0mmol/L SNP组、0.01mmol/L SNP组和0.001mmol/L SNP组之间没有差异(P>0.05),三组均极显著高于0.1 mmol/L SNP组和1.0 mmol/L SNP组(P<0.01),0.1mmol/L SNP组与1.0mmol/L SNP组相比,囊胚率极显著高于1.0mmol/L SNP组(P0.01)。⑤不同浓度SNP影响小鼠胚胎发育质量,0.1mmol/L SNP组和1.0mmol/L SNP组胚胎碎裂及发育阻滞现象均高于其他三组。 以上结果表明,在小鼠体外受精液和胚胎培养液中添加0.001mmol/LSNP~0.01mmol/L SNP能够促进小鼠早期胚胎发育,但是添加过高浓度的SNP能对小鼠早期胚胎发育起到明显的抑制作用。


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