收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

睡眠剥夺大鼠腹外侧视前区腺苷水平的变化

江传玮  
【摘要】:目的 腹外侧视前区(ventrolateral preopic,VLPO)是下丘脑视前区重要的睡眠调节脑区,腺苷(adenosine,AD)是目前已知的睡眠-觉醒周期调节的神经体液因子。本研究采用脑立体定位、核团插管、微透析、多导睡眠描计和高效液相色谱法观察两组大鼠的睡眠剥夺前、睡眠剥夺期以及睡眠剥夺后恢复期VLPO内腺苷含量变化。 方法 1.模型建立雄性成年SD大鼠,清洁级,体重280-320g。戊巴比妥钠(40mg/kg)经腹腔注射麻醉后,安装脑电和肌电电极用于多导睡眠描计,将微透析或微量注射用引导管插入大鼠VLPO区(AP:–0.36mm;L/R:1.30mm;H:7mm)供微透析使用。插管与记录电极均以牙科水泥固定于颅骨上,并将引导脑电和肌电的电极通过导线连接到微型插座上。大鼠术后置于隔音室中恢复一周,记录前一天连接EEG/EMG导线,以予适应记录状态。 2.动物分组动物随机分为两组:对照组和睡眠剥夺组。 3.微透析实时采集脑脊液术后1周,将微透析探针置入引导管内固定。放置探针1d后开始灌注人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)。采集前2h预灌注ACSF,灌注采集时间为9:00~19:00,对照组和睡眠剥夺组均灌注ACSF,灌流速度为2μl/min,每30min采集一次样品,样品采集后立即放入–80℃冰箱保存。 4.大鼠睡眠剥夺方法将大鼠置于有机玻璃桶(22cm,高38cm),从10:00~16:00对睡眠剥夺大鼠每隔15s用毛刷轻轻触碰大鼠臀部,大鼠被强迫保持清醒状态,以此达到睡眠剥夺的目的;对照组不做任何处理。大鼠VLPO区脑脊液微透析实时采集从9:00开始,睡眠剥夺大鼠9:00~10:00为睡眠剥夺前(before sleep deprived,B-SD)期,10:00~16:00为睡眠剥夺(sleep deprived,SD)期,16:00~19:00为睡眠剥夺后恢复(recovery,REC)期。 5.腺苷的测定采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)测定腺苷,进样量10μl,柱温23℃。流动相A为磷酸氢铵(10mmol/L,pH6),流动相B为14%甲醇,流速为1ml/min,用254nm紫外检测。样品浓度计算方法:以腺苷标准品峰面积对腺苷标准品浓度做标准曲线方程,把待测样品峰面积代入方程即可算得待测样品浓度。 6.多导睡眠描计及数据分析每次描记均从9∶00开始,连续记录10h。以10s为一分段时间,将睡眠—觉醒周期分为3期:(1)觉醒期(wake, W):以低幅快波脑电和明显的肌电活动为特征;(2)非快速眼动睡眠期(non-rapid eye movement,NREM):以睡眠梭形波和高幅δ波为特征,肌电活动明显减少;(3)快速眼动睡眠期(rapid eye movement,REM):以低幅快波为特征,除偶尔有肌肉抽动外,无明显肌电活动。 7.组织学鉴定实验结束后,通过引导管向VLPO区插入单极不锈钢电极。通过电极向微透析或微量注射位点通以2.5mA直流电10s,行阳极毁损,判断探针轨迹底部是否位于VLPO区,仅对定位准确的大鼠实验数据进行统计。 8.统计学分析采用SPSS12.0软件进行统计分析,数据以x±S表示,两组均数比较采用t检验,多组均数比较用方差分析,P 0.05为差异有统计学意义。 结果 1.正常组的W、 NREM、 REM占总时间的百分比分别是37.3±2.4%,59.1±1.8%,3.6±0.7%;对照组的W、NREM、REM占总时间的百分比:B-SD期分别是35.6±3.6%,61.0±2.9%,3.2±0.8%; SD期分别是95.8±1.2%,3.4±0.8%,0.8±0.4%;REC期分别是18.9±4.4%,76.5±5.6%,4.8±1.7%。 2.与对照组比较,SD组睡眠剥夺前的W、REM和NREM占总时间百分比无明显变化(n=6,P>0.05);而在SD期W占总时间百分比增加58.5%(n=6,P<0.01),NREM占总时间百分比减少55.7%(n=6,P<0.01),REM占总时间百分比统计学无显著性差异(n=6,P>0.05);在睡眠剥夺后REC期W占总时间百分比减少18.4%(n=6,P<0.05),NREM占总时间百分比增加17.4%(n=6,P<0.05),REM占总时间百分比统计学无显著性差异(n=6,P>0.05)。 3. SD组的B-SD期VLPO区腺苷含量为42.90±11.50nmol/L,与正常组的B-SD期36.40±9.98nmol/L相比统计学无显著性差异(n=6,P>0.05)。SD组SD期VLPO区腺苷的相对含量是199.8±23.5%,与正常组的SD期(142.0±7.0%)相比较有统计学显著性差异(n=6,P<0.05)。其中,SD组在睡眠剥夺2h内和同时段正常组相比较,VLPO内腺苷相对含量无显著变化;而随后的4h VLPO内腺苷相对含量明显升高。正常组和SD组REC期VLPO区腺苷的相对含量分别为251.7±31.9%,138.3±11.7%,它们之间统计学有显著性差异(n=6,P<0.01)。其中SD组REC期的1h内VLPO区腺苷相对含量显著性减少。 结论 腺苷在VLPO内参与睡眠-觉醒周期的调节,可能起促睡眠作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 欧阳儒颖,季红光,蔡懿灵,阮芳铭,王海明;补充支链氨基酸对睡眠剥夺大鼠行为和血清游离脂肪酸水平的影响[J];氨基酸和生物资源;2003年04期
2 李德明;;睡眠剥夺的心理生理影响[J];心理科学进展;1983年02期
3 王晓东,宿长军,李柱一,王者晋,饶志仁;不同时间点睡眠剥夺与星形胶质细胞的关系[J];中国临床康复;2004年07期
4 章茜,阎艳琴,乔鹏,袁义强,王书春,张朝,王雨若;部分睡眠剥夺对大鼠免疫功能的影响[J];河南医科大学学报;2001年05期
5 吴兴曲,杨来启,王晓峰,杨喜民,张宏斌,马文涛,刘光雄,张彦,王蓉蓉;睡眠剥夺对大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶的影响[J];中国临床心理学杂志;2002年02期
6 黄裕新,王景杰,秦明,杨琦,王旭霞,刘震雄;睡眠剥夺对大鼠胃运动及其神经中枢的影响[J];胃肠病学和肝病学杂志;2005年02期
7 刘长云,许恒,周建光,钱萍萍,季红光,沈慧,王海明;睡眠剥夺对大鼠脑神经元型一氧化氮合酶mRNA表达的影响[J];中国公共卫生;2003年05期
8 李求实,王升旭;刺五加总甙穴位贴敷抗睡眠剥夺作用的实验研究[J];华南国防医学杂志;2002年02期
9 吴兴曲,杨来启,王晓峰,李拴德,马文涛,杨喜民,刘光雄;睡眠剥夺后大鼠大脑5-HT1A和5-HT2A受体的表达[J];中国行为医学科学;2002年04期
10 李求实,王升旭;REM睡眠剥夺后大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的变化[J];华南国防医学杂志;2002年03期
11 章茜,程江涛,杨春,王书春,王一菱,吴景兰,王雨若;睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡及相关基因表达的变化(英文)[J];中国临床康复;2004年25期
12 孙福立;李德明;;试用睡眠剥夺方法建立心虚证的动物模型[J];中国中西医结合杂志;1987年01期
13 Manganotti P;Bongiovanni L.G;Fuggetta G. ;王鹏;;睡眠剥夺对青少年肌阵挛性癫痫患者皮质兴奋性的影响:经颅磁刺激和EEG的联合研究[J];世界核心医学期刊文摘(神经病学分册);2006年05期
14 左科;童玲;杨颖;钱伟;侯晓华;;中枢5-羟色胺系统在快速动眼期睡眠剥夺导致大鼠内脏感觉降低中的作用[J];中华消化杂志;2007年08期
15 石圆圆,刘芳娥,每晓鹏;部分睡眠剥夺对大鼠糖代谢的影响[J];第四军医大学学报;2005年07期
16 张舒,吴兴裕;睡眠剥夺对工作能力影响的防护研究进展[J];解放军预防医学杂志;1998年01期
17 张舒,吴兴裕,韩厉萍,李学义,姚永杰;睡眠剥夺48h对追踪作业工效、视反应能力的影响[J];第四军医大学学报;1998年05期
18 江帆,吴胜虎,颜崇淮,赵鹏军,余晓刚,沈晓明;慢性不完全性睡眠剥夺对幼鼠学习记忆的影响[J];中国心理卫生杂志;2003年09期
19 宋国萍,张侃,苗丹民,皇甫恩;睡眠剥夺后清醒程度和困倦程度变化[J];中国临床心理学杂志;2004年03期
20 许崇涛,李慧,林凌云;快眼动睡眠剥夺对抑郁模型大鼠自主活动及海马5-羟色胺含量的影响[J];中国行为医学科学;2004年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 宋国萍;苗丹民;皇甫恩;陈足怀;冯学文;;睡眠剥夺对大鼠学习和行为的影响[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
2 赵正卿;黄流清;吴惠涓;李雁鹏;向正华;赵忠新;;神经肽S可改善REM睡眠剥夺导致的大鼠认知功能损害[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
3 彭华;贺斌;李雁鹏;赵忠新;黄流清;张琳;林巧;李振;;大鼠REM期睡眠剥夺及恢复后MMP-9对学习记忆的影响[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
4 张红菊;赵忠新;;REM睡眠剥夺后GRP78、GRP94在大鼠皮质、海马及延髓表达的研究[A];2006年中国睡眠研究会第四届学术年会论文摘要汇编[C];2006年
5 唐庆娟;陶凯忠;徐建平;蒋春雷;;48h和72h全睡眠剥夺对大鼠氧化应激水平的影响[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年
6 张红菊;索爱琴;赵忠新;;REM睡眠剥夺诱导大鼠皮质、海马及延髓的内质网凋亡基因的表达[A];2006年中国睡眠研究会第四届学术年会论文摘要汇编[C];2006年
7 林巧;赵忠新;李雁鹏;彭华;李振;;REM期睡眠剥夺对大鼠大脑皮质CHOP蛋白表达的影响及药物干预[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
8 王贵平;赵忠新;庄建华;黄流清;吴惠涓;张琳;彭华;由振东;;REM睡眠剥夺与恢复对大鼠空间记忆及海马CaN的影响[A];第三届中国睡眠医学论坛论文汇编[C];2009年
9 赵忠新;;睡眠剥夺对认知功能影响及其机制的研究[A];2006年中国睡眠研究会第四届学术年会知识更新讲座[C];2006年
10 朱红莲;赵忠新;;REM睡眠剥夺及恢复睡眠对大鼠海马和皮质nNOS mRNA表达的影响[A];第三届全国睡眠学术会议论文汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 窦伟;睡眠剥夺对大鼠不同脑区PrP~C表达的影响及PrP~C在睡眠剥夺诱导的认知损害中可能的作用[D];第二军医大学;2012年
2 樊双义;连续作业与睡眠剥夺对认知功能的影响及机制研究[D];第三军医大学;2010年
3 王贵平;REM睡眠剥夺对大鼠空间记忆、海马CaN的影响及FK506的干预作用研究[D];第二军医大学;2009年
4 王春燕;睡眠剥夺大鼠脑内IL-1β和NGF表达及药物干预的影响[D];第二军医大学;2004年
5 黄坚;食欲素与睡眠的实验研究[D];第二军医大学;2003年
6 彭华;REM睡眠剥夺对大鼠空间记忆的影响机制及莫达非尼的干预[D];第二军医大学;2008年
7 张茹;刺五加改善睡眠剥夺大鼠学习记忆能力的机制研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
8 李宁;睡眠剥夺对大脑认知能力及脑电特征的影响研究[D];天津大学;2009年
9 李雁鹏;片段睡眠现象对觉醒功能的影响及机制研究[D];第二军医大学;2012年
10 宋国萍;睡眠剥夺对记忆及额叶执行功能影响的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 江传玮;睡眠剥夺大鼠腹外侧视前区腺苷水平的变化[D];安徽医科大学;2012年
2 方舟;睡眠剥夺对心脏部分功能的影响和机制研究及其药物干预[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
3 钟静瑜;睡眠剥夺对大鼠血浆去甲肾上腺素、多巴胺、五羟色胺及认知功能的影响[D];福建医科大学;2010年
4 朱海浩;睡眠剥夺引起成年大鼠海马神经细胞增殖及SCFmRNA表达的研究[D];郑州大学;2002年
5 白凌;睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡与MAPKs表达的相关性研究[D];郑州大学;2002年
6 刘观良;睡眠剥夺问题的基因共表达网络分析方法研究[D];国防科学技术大学;2010年
7 王晓东;睡眠剥夺后大鼠中缝核群星形胶质细胞的反应及其与神经元的关系[D];第四军医大学;2004年
8 窦伟;睡眠剥夺对大鼠认知和脑线粒体呼吸功能的影响[D];第二军医大学;2005年
9 杨国愉;睡眠剥夺下人参皂甙对大鼠行为及中枢五羟色胺的影响[D];第四军医大学;2001年
10 李求实;穴位贴敷疗法抗睡眠剥夺作用的实验研究[D];第一军医大学;2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘长云;睡眠剥夺影响人体免疫功能[N];中国中医药报;2003年
2 宋国萍 苗丹民;关注医生睡眠[N];中国中医药报;2004年
3 金振蓉;睡得少睡得晚的危害不容忽视[N];光明日报;2007年
4 宋国萍 苗丹民;睡眠缺失对医生的影响及其解决方法[N];中国中医药报;2004年
5 姜长青;怎样睡个安稳觉[N];健康报;2005年
6 刘天明光;睡眠障碍应引起广泛关注[N];中国消费者报;2007年
7 上海交通大学医学院附属新华医院 颜崇淮 吴美琴;你的孩子睡好了吗[N];健康报;2010年
8 ;关木通对大鼠致癌性的实验研究[N];中国医药报;2003年
9 刘霞;诱导多功能干细胞让小鼠长出大鼠胰腺[N];科技日报;2011年
10 郑健刚;杜元灏;石学敏;针刺能增加脑缺血大鼠脑血流量[N];中国医药报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978