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狼疮性肾炎患者HMGB1和RAGE的表达及糖皮质激素的作用

叶莉莉  
【摘要】:背景与目的系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种累及多系统、多器官的自身免疫病,其发病机制复杂多样,狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)是SLE患者的主要死因。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box protein B1,HMGB1)是一种染色质蛋白,胞外HMGB1作为一种晚期促炎细胞因子,刺激细胞因子的释放。晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)是HMGB1的主要受体,两者结合后通过核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活化介导一系列炎症反应。本研究通过检测LN患者体内HMGB1和RAGE的表达,探讨其在疾病发病机制中的作用,同时观察了糖皮质激素(glucocorticoid,GC)对LN患者体内HMGB1表达的影响,为其治疗LN提供新的视角。方法收集2013年4月~2014年6月安徽医科大学第一附属医院肾脏内科、风湿科、皮肤科共64例SLE住院患者血清(其中47例患者同时留取尿液)。所选患者均符合1997年美国风湿病协会(American rheumatism association,ARA)修订的SLE诊断标准。收集10例门诊健康体检者的血清和尿液作为SLE患者血清和尿液的正常对照。ELISA法检测实验对象血清及尿液HMGB1的水平。64例患者中有25例行肾组织活检(II型6例,III型4例,IV型10例,IV+V型5例),选取10例我院泌尿外科肾肿瘤切除患者远离肿瘤部位至少2 cm的肾组织作为SLE患者肾组织的正常对照。免疫组化法检测实验对象肾组织的HMGB1和RAGE的表达水平。(1)采用2000年SLE疾病活动性指数(SLE disease activity index,SLEDAI-2000)进行评分。≥10分为活动期,10分为稳定期,将SLE组按疾病活动性分为活动期SLE组(血标本n=47,尿标本n=33)和稳定期SLE组(血标本n=17,尿标本n=14);比较活动组与稳定组患者体内HMGB1的表达水平。(2)SLE组以尿常规出现血尿(尿红细胞数5个/HP)、管型尿或蛋白尿(24 h尿蛋白定量0.3 g或+++)为狼疮肾损害,以无血尿、管型尿、蛋白尿(24 h尿蛋白定量0.3 g)为狼疮无明显肾脏损害,故SLE组按尿常规结果分为狼疮肾损害组(血标本n=37,尿标本n=28)和狼疮无明显肾损害组(血标本n=27,尿标本n=19),比较两组间HMGB1的表达差异。(3)LN组按GC给药时间分为GC未治疗组(初诊初治未曾使用过激素及免疫抑制剂者;n=11)和GC治疗组(激素治疗时间2周,GC使用剂量为1mg/kg/d,但未曾使用其他免疫抑制剂者;n=13),分析GC对患者体内HMGB1表达水平的影响。结果1.SLE患者血清HMGB1的水平显著高于正常对照者(P0.01)。活动期SLE患者显著高于稳定期SLE患者(P0.05)。狼疮肾损害者显著高于狼疮无明显肾损害者(P0.05)。在SLE患者中,血清HMGB1水平与SLEDAI评分、24 h尿蛋白定量呈正相关性(r=0.26,P0.05;r=0.55,P0.05)。2.SLE患者尿液HMGB1的水平显著高于正常对照者(P0.01)。活动期SLE患者显著高于稳定期患者(P0.05)。狼疮肾损害者较狼疮无明显肾损害者差异无统计学意义(P0.05)。在SLE患者中,尿液HMGB1水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.35,P0.05)。3.正常对照者肾组织肾小管上皮细胞可中等强度表达HMGB1和RAGE,肾小球未见表达,而在SLE患者可见小管中表达有所增强,小球中也明显表达,其肾内的HMGB1和RAGE的表达水平较正常对照者明显增加(P0.05),且IV型、IV+V型SLE患者肾内HMGB1的表达量均明显高于II型(P0.05),IV型SLE患者肾内RAGE的表达量高于II型(P0.05)。4.GC治疗组的LN患者血清HMGB1水平、SLEDAI评分及肾活检标本活动指数较未治疗组显著减少(P0.05)。结论1.SLE患者体内HMGB1和RAGE水平显著升高,且与24小时尿蛋白定量、SLEDAI评分相关;2.肾内HMGB1和RAGE的变化与肾脏病理类型有关;3.糖皮质激素治疗LN的作用可能与降低患者体内HMGB1水平有关。


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