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多参数流式细胞术检测急性髓系白血病免疫表型及临床应用

王伟伟  
【摘要】:背景急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是急性白血病(acute leukemia,AL)的一种常见类型,属于造血系统恶性肿瘤,成人多见。AML发病迅速,临床出现不同程度的发热,出血,贫血,骨痛及淋巴结、肝、脾肿大,可危及患者生命。该类疾病患者机体髓系白血病细胞异常克隆增殖,分化成熟障碍,并伴有凋亡减少,髓系白血病细胞在细胞形态,治疗反应及预后均具有较强的异质性~([1]),法美英(FAB)协作组诊断标准-形态学检查是AML诊断的基础,但人为主观性较大,已不能满足临床诊疗的需要。目前AML诊断分型现多采用MICM有机结合来诊断AML。随着流式细胞术(flow cytometry,FCM)的快速发展,FCM以其高通量、客观且对样本要求低等优势已成为AML诊断不可缺少的方法,该项技术能快速准确检测出AML细胞的系列,抗原分布情况及分化阶段,对指导临床诊断,分层治疗及预后判断具有重要意义~([2])。目前关于AML细胞分化抗原表达分析研究较多,而对预后疗效相关的白血病细胞分化抗原尤其是非髓系分化抗原表达与预后疗效完全缓解(complete remission,CR)率之间关系的文献报道较少且缺乏系统性研究。目的研究分析AML免疫表型和非髓系分化抗原表达特征,探讨AML细胞分化抗原表达与预后疗效的关系。方法根据诊断需求,设计抗体组合方案,采用BD FACSCalibur流式细胞仪,通过Cellquest软件分析,以CD45联合侧向散射光SSC设门,对109例AML进行免疫表型检测。采用SPSS18.0统计学分析软件χ~2检验,分析比较AML相关抗原表达呈阳性和阴性者的CR率;比较伴AML1-ETO阳性表达的15例AML-M2b中CD56阳性和CD56阴性两组患者1疗程缓解率及1年内复发率。结果1.免疫表型显示AML细胞髓系分化抗原阳性率由高到低依次为CD13,CD117,CD33,MPO,CD15,其中CD117,CD13,CD33,MPO阳性率差异无统计学意义(P0.05),并且均高于CD15阳性率(均P0.05)。2.AML细胞非系列特异性抗原CD34,CD38,HLA-DR,CD123阳性率差异亦无统计学意义(P0.05)。3.AML细胞非髓系分化抗原CD9,CD200,CD56,CD7阳性率依次降低,均高于CD25,CD19,CD2,CD10,CD4,Cy CD79a,Cy CD3阳性率(均P0.05),Cy CD3未见表达;AML亚型中M_5非髓系分化抗原的种类和阳性率频度较多,M_3型CD9阳性高频高强度率表达。4.109例AML患者接受化疗后,预后达到CR者为71例,CR率为65.1%。109例AML中CD7,CD34,CD56,CD25呈阳性的患者CR率依次为44.1%(15/34),45.8%(44/96),43.8%(21/48),37.5%(6/16),并且均低于表达阴性患者的CR率70.7%(53/75),76.9%(10/13),75.4%(46/61),62.4%(60/93),并且差异均具有统计学意义(χ~2=7.027,P=0.008;χ~2=4.427,P=0.035;χ~2=11.368,P=0.001;χ~2=4.171,P=0.041);MPO,CD19表达呈阳性AML患者的CR率分别为70.9%(66/93),61.5%(8/13),均高于阴性者的31.3%(5/16),31.3%(30/96),并且差异均具有统计学意义(χ~2=9.483,P=0.002;χ~2=4.625,P=0.032)。5.伴AML1-ETO阳性表达的15例AML-M2b患者中CD56阳性组1疗程CR率低于CD56阴性组,CD56阳性组1年内复发率高于CD56阴性组,差异均具有统计学意义(χ~2=5.000,P=0.025;χ~2=5.000,P=0.025)。结论免疫学分型及非髓系分化抗原表达分析对AML的诊断及预后判定有重要临床意义,是AML诊疗的主要依据之一。


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