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铝对原代培养神经细胞的毒性研究

胡琼  
【摘要】:目的 研究Al~(3+)对体外培养的大鼠神经干细胞分裂和分化的影响,初步探讨Al~(3+)影响神经干细胞发育过程的可能作用机制。 方法 取孕12~12.5天SD大鼠胚胎的大脑皮层细胞体外培养,建立神经干细胞模型。用Nestin免疫细胞化学法鉴定神经干细胞。在细胞增长期用400、200、100μM的Al~(3+)染毒24h。利用live/dead viability/cytotoxicity kit试剂盒检测Al~(3+)对神经干细胞的细胞毒性。用BrdU标记新生细胞,检测Al~(3+)对神经干细胞增殖能力的影响。不同浓度Al~(3+)染毒24h后,用DMEM(含1%B_(27))培养基继续培养7天,用MAP2免疫细胞化学法检测Al~(3+)对神经干细胞向神经元分化的影响。用生物图像处理系统(NiKon E800u,Spot2冷彩色数码摄像系统,MetaMorph图像分析软件)定量分析神经干细胞BrdU、MAP2阳性细胞光密度(OD)值以及神经元树突分枝的数量。 结果 随着Al~(3+)剂量的增加,其对神经干细胞的细胞毒性逐渐增强(台盼蓝:r=-0.974,P0.05;live/dead viability/cytotoxicity kit:r=-0.958,P0.05),神经干细胞的增殖分裂能力逐渐下降(r=-0.798,P0.05),向神经元分化能力逐渐下降(r=-0.904,P0.05),神经元树突分枝和MAP2阳性细胞光密度值逐渐减少(r=-0.904,P0.05;r=-0.858,P0.05)。 结论 在本实验剂量范围内,铝对神经干细胞有细胞毒性作用,可抑制神经干细胞的增殖和分化,降低神经元连通和成熟。这可能在铝导致的神经发育毒性作用中


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