肺腺癌多药耐药细胞系A549/ADM的建立及阿奇霉素耐药逆转研究

【摘要】：目的：用阿霉素体外诱导的方法建立多药耐药细胞系A549／ADM。研究阿奇霉素对A549／ADM的耐药逆转作用。方法 采用阿霉素诱导A549使其耐药。首先在培养液中使用低浓度阿霉素持续诱导，再逐渐、间歇增加阿霉素浓度。用流式细胞仪(FCM)测定A549和A549／ADM的P-GP和MRP的表达。用MTT法分别检测四种药物对A549、A549／ADM、使用阿奇霉素(AZM)处理后的A549／ADM的半数抑制浓度(IC_(50))。MTT法检测不同浓度阿奇霉素对A549／ADM的抑制率。用FCM检测A549、A549／ADM及使用阿奇霉素处理的A549／ADM细胞内ADM荧光强度。结果A549的P-GP和MRP的表达分别为2.3％和2.5％，而A549／ADM的P-GP和MRP的表达分别为33％和46.3％。A549／ADM对阿霉素的耐药指数为A549的17.80倍，对VCR、DDP、MTX均有不同程度的耐药。使用5μg／ml阿奇霉素处理后，A549／ADM对ADM的敏感性为原来的2.81倍，对DDP、VCR、MIX的敏感度分别为原来的1.86、3.78、3.86倍。加入10μg／ml的阿奇霉素后，A549／ADM对上述药物的敏感程度提高更明显。同样浓度的阿霉素作用相同时间后，A549、A549／ADM和使用阿奇霉素处理后的A549／ADM的荧光强度分别为121.4、51.2、96。结论 利用阿霉素在体外采用低浓度梯度持续诱导，加以高浓度间歇诱导的方法，可以建立多药耐药细胞系。耐药细胞系A549／ADM表现对多种常用化疗药物不同程度的耐药。P-GP、MRP的高表达在MDR的发生中可能起着重要作用。阿奇霉素可能通过增加药物在细胞内的聚集而逆转A549／ADM的多药耐药。其逆转效果与剂量相关。