三氧化二砷联合全反式维甲酸诱导NB4细胞核因子-kb、ROS表达的研究

【摘要】：目的： 研究全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(As_2O_3)对NB4细胞的生长、分化、凋亡以及核因子-κB(NF-κB)、活性氧(ROS)表达的影响，并分析不同药物浓度的三氧化二砷和全反式维甲酸之间的相互作用关系。 方法： 选择对数生长期的NB4细胞，分为3组，1组分别加入1μmol／LATRA、1μmol／LATRA+0.5μmol／LAs_2O_3、1μmol／LATRA+2.0μmol／LAs_2O_3。2组分别加入0.5μmol／L As_2O_3、2.0μmol／LAs_2O_3、0.5μmol／L As_2O_3+1μmol／LATRA、2.0μmol／LAs_2O_3+1μmol／LATRA。3组为对照组，不加入任何药物。 1)在0、24、48、72小时四个时间点计数细胞，观察NB4细胞生长情况，绘制生长曲线。 2)分别在4、12、24、48、72小时五个时间点取出细胞，流式细胞仪检测CD11b的表达阳性率，了解细胞分化成熟情况。 3)分别收获培养24、48、72小时的NB4细胞，进行DNA片段梯度电泳观察细胞凋亡的发生。 4)收获生长48小时后NB4细胞，加入P65 NF-κB单抗及二抗，应用流式细胞仪分别检测NF-κB的变化。 5)收获生长48小时后NB4细胞，加入DCFH-DA探针，应用流式细胞仪分别检测ROS变化。 结果： 三氧化二砷联合全反式维甲酸对细胞的分化、凋亡产生了不同的效应。 1)与单用1μmol／LATRA相比，联用0.5μmol／LAs_2O_3作用后CD11b的表