安徽省部分医院金黄色葡萄球菌的耐药性检测及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测和基因分型

【摘要】： 目的 了解安徽省部分医院的金黄色葡萄球菌耐药性,以指导临床用药。分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检测方法,比较MRSA的检出率。了解安徽地区的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)基因分型及其与耐药性,为MRSA感染的防治及分子流行病学研究提供实验依据。 材料与方法 菌株来源收集安徽医科大学第一附属医院、安徽中医学院附属医院、铜陵市人民医院、淮北市人民医院及固镇县人民医院等三十四家医院2005年临床分离的金黄色葡萄球菌187株。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC43300、25923。 方法 采用头孢西丁、苯唑西林纸片法及mecA基因PCR检测出MRSA菌株,并比较三种检测方法有无统计学差异;以PCR方法检测出mecA基因作为检测MRSA菌株的金标准,比较头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法检测MRSA菌株的灵敏度及特异度。并且采用琼脂平皿稀释法对金黄色葡萄球菌进行最低抑菌浓度(MIC)测定。 根据mecA基因下游高变区的dru(direct repeat unit)序列,设计一对扩增引物,依据扩增片段大小差异进行基因分型,结合耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的MIC值,分析基因型与耐药性的关系。 结果 头孢西丁、苯唑西林纸片法及PCR法对MRSA检出率分别为51.34%(96/187),55.08%(103/187),45.45%(85/187),三种方法对MRSA检出率有统计学差异。以PCR法检出mec-A基因作为判断MRSA的金标准,头孢西丁纸片法灵敏度为87.06%、特异度为78.43%、符合率为82.35%、r(正确诊断指数)=0.6549。苯唑西林纸片法的灵敏度为84.71%、特异度为69.61%、符合率为76.47%、r=0.5432。MRSA菌株成多重耐药显著;除了青霉素-G、氨苄西林、替考拉宁、万古霉素、利福平、氯霉素以外,其余抗生素的耐药率,MRSA组均明显高于MSSA组(P0.05);本次实验未发现替考拉宁、万古霉素耐药菌株。85株MRSA被分为A、B、C 3种基因型及不能分型的共四组,分别占15.3%(13/85)、20%(17/85)、50.6%(43/85),未分型的14.12%(12/85),其中以C型(50.6%)多见。A、B、C 3种基因型别的菌株对抗菌药物的耐药性无明显差异,均对万古霉素敏感。 结论 头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSA菌株的一种可靠、简便的方法;MRSA为多重耐药菌株,临床应加强检测。 安徽地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌存在A、B、C三种基因型别及不能分型的共四组,其中以C型多见。