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rhUTI对急性胰腺炎小鼠和Beagle犬的治疗作用及其机理研究

汪洋  
【摘要】: 研究背景 急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)是临床上常见疾病,研究AP的发病机制和防治AP损伤的方法已成为医学界研究的热点和难点。最近有研究发现,早期使用乌司他丁(UTI)治疗AP,病人的症状及体征均有明显改善,治愈率高,并发症少,UTI能够广泛抑制与胰腺炎发展有关的各种酶的释放,控制胰腺炎病情发展,阻止轻症胰腺炎向重症转化的作用,从而起到较好的临床治疗效果。 目的 研究rhUTI对小鼠AP模型和Beagle犬AP模型的保护作用,探讨rhUTI用于对AP模型动物是否具有治疗作用及其可能的机制,为其申报新药与临床应用提供理论依据。 方法 1.小鼠实验 实验小鼠随机分为六组:对照组、AP模型组、UTI组(4.5万U/kg)、rhUTI低剂量组(2.25万U/kg)、rhUTI中剂量组(4.5U万/kg)和rhUTI高剂量组(9万U/kg),采用分两次间隔1h大剂量腹腔注射L-精氨酸(2×200mg×100g-1体重)复制小鼠AP模型。实验结束时,采用化学比色法分别检测血清淀粉酶活性、胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量变化;取胰腺组织固定,HE染色,观察胰腺病理变化。 2. Beagle犬实验 实验Beagle犬随机分为六组:对照组、AP模型组、UTI组(1.5万U/kg)、rhUTI低剂量组(0.75万U/kg)、rhUTI中剂量组(1.5万U/kg)和rhUTI高剂量组(3万U/kg),采用逆行牛磺胆酸钠(2.5%)胰胆管内注射的方法,制造Beagle犬AP模型,实验结束时,采用化学比色法检测动物血清淀粉酶和尿液淀粉酶的变化;应用MODULAR-DPP型全自动生化分析仪检测血清Ca~(2+)、BUN、Cr的变化;取胰腺组织固定,HE染色,观察胰腺病理变化。 结果 1.rhUTI对小鼠急性胰腺炎的保护作用 大剂量腹腔注射L-精氨酸(2×200mg×100g-1体重)可引起血清淀粉酶升高;胰腺充血水肿,可见大量炎性细胞浸润,并见小灶性坏死,复制小鼠急性胰腺炎模型成功;与对照组相比,AP小鼠血清淀粉酶含量明显升高(P0.05),胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性下降(P0.05);胰腺组织中丙二醛(MDA)含量增加(P0.05);与模型组比较,UTI和rhUTI各剂量组充血水肿减轻、坏死灶减小,炎性细胞浸润减轻,血清淀粉酶12h、24h明显较模型组降低(P0.05);SOD活性升高和MDA含量下降明显(P0.05)。 2.rhUTI对Beagle犬急性胰腺炎的保护作用 逆行牛磺胆酸钠(2.5%)胰胆管内注射可引起Beagle犬血清淀粉酶、尿液淀粉酶升高、胰腺组织充血水肿、坏死,诱导Beagle犬急性胰腺炎成功;与对照组相比,AP Beagle犬血清淀粉酶和尿液淀粉酶含量明显升高(P0.05),血清Ca~(2+)浓度、血清肌酐浓度于造模后8h降低;与AP模型组比较,阳性药UTI和rhUTI血清淀粉酶8h、24h明显较模型组降低(P0.05),尿液淀粉酶含量明显降低(P0.05),并有剂量依赖关系,rhUTI(0.75、3万U/kg)对急性胰腺炎犬造模后4h、8h血清尿素氮有一定的升高,rhUTI(1.5、3万U/kg)组于造模后28h,血清Ca~(2+)浓度降低;与模型组比较,UTI和rhUTI各剂量组充血水肿减轻、坏死灶减小,炎性细胞浸润减轻。 结论rhUTI对牛磺胆酸钠诱导的急性胰腺炎Beagle犬和L-精氨酸引起的急性胰腺炎小鼠的胰腺损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与rhUTI升高SOD活性、降低MDA含量、清除氧自由基等作用有关。


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