溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜中MMP-3和NF-κBp65表达及其意义

【摘要】： 目的:检测基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)、核因子-κBp65(Nuclear Factor-κBp65,NF-κBp65)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型结肠粘膜中的表达情况,探讨二者在UC发病机制中的作用及其相关性,从而为溃疡性结肠炎的诊断、治疗提供新的思路和手段。 方法:选用清洁级成年Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,雌雄各半,随机抽取20只作为模型组,应用复合法(2,4-二硝基氯苯+乙酸)制备细胞免疫反应性UC大鼠模型,另外20只正常SD大鼠作为对照组。造模成功后一周和二周,分别剖腹切取模型组大鼠及正常大鼠结肠粘膜各10份,进行常规病理切片,观察和评估结肠黏膜的大体形态和组织学变化;应用免疫组化Elivision法检测模型组和正常对照组大鼠结肠粘膜中MMP-3和NF-κBp65表达;并分析其与疾病严重程度关系。实验数据应用SPSS14.0软件进行统计学处理,计数资料采用卡方检验和Spearman等级相关分析,计量资料采用单因素方差分析中的SNK-q检验、t检验,以P＜0.05为检验显著性标准。 结果:1、模型组20只大鼠于造模完成后5～10天,均开始出现腹泻、粪便恶臭、稀溏,肛周污秽,血便或粘液脓血便等UC常见症状;标本大体观可见肠粘膜充血、水肿、糜烂、坏死、肠壁增厚、溃疡形成;组织学检查证实均符合UC诊断标准,造模成功率为100%。2、模型组和正常对照组大鼠结肠粘膜中MMP-3阳性表达率分别为90%(18/20)和30%(6/20),模型组大鼠结肠粘膜MMP-3表达明显高于正常对照组,两者差异有显著的统计学意义(P＜0.01)。3、MMP-3的表达在UC大鼠轻度、中度、重度三组分别为18.75±14.57、51.83±20.37、83.0±29.56;轻度与中度UC大鼠相比P＜0.05,且轻度、中度与重度UC大鼠相比P＜0.05。4、NF-κBp65在模型组大鼠结肠粘膜中阳性表达率为80%(16/20),在正常对照组大鼠结肠粘膜中阳性表达率为25%(5/20),两者差异有显著的统计学意义(P＜0.01)。5、UC大鼠轻度、中度、重度三组NF-κBp65的表达分别为8.5±6.86、40.17±13.15、67.60±27.06;轻度与中度UC大鼠相比P＜0.05,UC大鼠轻度、中度、重度三组两两之间相比均有P＜0.05。6、UC大鼠结肠粘膜中MMP-3表达与NF-κBp65表达呈显著正相关(r_s=0.917,P＜0.01)。 结论:1、UC大鼠结肠粘膜中MMP-3、NF-κBp65表达明显升高,且与疾病的严重程度呈正相关,提示其可能与UC发生、发展有关。2、MMP-3和NF-κBp65在UC结肠粘膜中的表达密切相关,呈显著正相关,NF-κBp65可能促进MMP-3的表达。