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鲍曼不动杆菌的耐药性及B类和D类碳青霉烯酶的研究

魏艳艳  
【摘要】: 研究背景:碳青霉烯类抗生素(如:亚胺培南、美罗培南等)引入临床应用后不久,于1991年美国对碳青霉烯类耐药的不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter,CRA)首例报道以来,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药或敏感性降低在世界上的报道不断增多。 鲍曼不动杆菌是一种条件致病菌,大多数临床分离的菌株表现出对多种抗生素存在多重耐药性。产碳青霉烯酶菌株引起的感染发病率在逐年升高,在某些医院甚至出现爆发流行。因此,产碳青霉烯酶菌株耐药问题是当前全球最重要的医院内耐药问题之一。 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制主要包括通透性降低、流出泵过度表达、碳青霉烯酶的产生。碳青霉烯酶主要包括B类金属酶和D类OXA类酶。其中OXA型碳青霉烯酶是引起世界范围鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的最重要原因。OXA型碳青霉烯酶属于分子分类中的D类酶,该类酶可以水解碳青霉烯类、青霉素类、头孢菌素、氨曲南等抗菌药物,导致产酶菌对这些抗菌药物耐药。金属酶属于分子分类中的B类酶,该类酶能够有效水解亚胺培南和除氨曲南以外的所有β-内酰胺类抗菌药物,引起对碳青霉烯类和绝大多数β-内酰胺类耐药。 鉴于安徽省尚缺乏关于临床分离鲍曼不动杆菌耐药性检测方面的资料,我们对2005年安徽省部分医院(18家)临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性进行了研究。 目的了解临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药性,为临床合理用药提供依据。 方法琼脂稀释法测定鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南、哌拉西林、哌拉西林/三唑巴坦等15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。 结果鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率最低(6.4%)、其次为美罗培南(20.5%)和头孢哌酮/舒巴坦(29.7%) ,对四环素的耐药率最高(81.5%);其余抗菌药物耐药率均在50%左右或以上。 结论鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦较为敏感,对其他抗菌药物耐药情况严重;对耐碳青霉烯类药物的菌株多重耐药性尤其显著,临床应加强检测和监测。 研究背景全球不断有新的碳青霉烯酶基因型别被发现。至目前为止,已经发现的碳青霉烯酶包括OXA、IMP、VIM型、SIM等。1993年在爱丁堡皇家医院从一个病人中检出鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药,该细菌产生的碳青霉烯酶起初命名为ARI-1,后来重新命名为OXA-23。从此,携带有苯唑西林酶的鲍曼不动杆菌菌株对碳青霉烯类耐药在世界上广泛报道。常见的8种水解碳青霉烯类抗生素的OXA型酶簇被发现主要包括OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58型,还有他们的衍生物。 IMP型金属酶最先于日本在铜绿假单孢菌中发现;虽然MBLs在产碳青霉烯酶中不占主导地位,但是目前已发现了几种基因型:IMP-1、IMP-2、IMP-4、IMP-5、IMP-6和IMP-11等。意大利于1991年首先发现了铜绿假单胞菌产金属酶VIM-1,VIM和IMP型金属酶只有30%-40%的氨基酸具有同源性,鲍曼不动杆菌产VIM-2型金属酶仅韩国有报道。 碳青霉烯酶已经在世界各地被发现,且全世界许多地方不断有新的碳青霉烯酶型别检出,各国各地区流行的型别亦各不相同,在英国[1]、西班牙[2,3]、比利时[4]、新加坡[5]分别有报道。由于个国家和地区的用药习惯不一样,导致各地区流行的基因型也不一致,因此,了解产碳青霉烯酶菌株的耐药性特点及其基因型分布特征,有利于防止产碳青霉烯酶菌株的区域性流行,并指导临床合理用药,以免延误病情和造成不必要的浪费。 鉴于国内目前使用碳青霉烯类抗生素较为广泛,导致产碳青霉烯酶菌株较为流行的现状,我们对临床分离出的耐亚胺培南和/或美罗培南的鲍曼不动杆菌进行了碳青霉烯酶基因型和同源性检测。 目的了解耐亚胺培南和/或耐美罗培南鲍曼不动杆菌中产碳青霉烯酶的基因型别;了解产酶菌株的流行情况。 方法采用聚合酶链反应扩增IMP、VIM、OXA型碳青霉烯酶基因并测序;ERIC-PCR方法进行产酶菌株的同源性检测。 结果29株对碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌中,以产OXA-24型和IMP型酶菌株最多(包括同时产其他型别酶的菌株) ,两者均占51.7%(15/29)。产OXA-24+IMP型5株、OXA-24+OXA-51+IMP型4株、VIM型4株、OXA-24+OXA-58+IMP型、OXA-23+OXA-24+IMP型各2株,OXA-23+IMP型、OXA-51+OXA-24型、OXA-24型、IMP型各1株,8株细菌PCR检测为阴性。5株产OXA-24+IMP型中有2株产OXA-24+IMP型菌株ERIC-PCR谱型相同, 4株产OXA-24+OXA-51+IMP型中有2株ERIC-PCR谱型相同, 2株产OXA-23+OXA-24+IMP型菌株ERIC-PCR谱型相同。 结论安徽省18家医院分离出的耐亚胺培南和/或美罗培南鲍曼不动杆菌主要产OXA- 24型和IMP型碳青酶烯酶,部分菌株同时产2种或以上碳青霉烯酶,且少数产酶菌株间存在克隆传播现象。


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