收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主动外排耐药机制的研究

高晓览  
【摘要】: 金黄色葡萄球(Staphylococcus aureus,SA)是临床常见的致病细菌,自20世纪40年代青霉素问世以来,该菌感染性疾病曾受到较大控制,随着青霉素的广泛应用,某些菌株产生青霉素酶,表现为对青霉索耐药,于是人类又研制出耐青霉素酶的二甲氧苯基青霉素,即甲氧西林,自1959年应用临床后曾有效控制SA产酶株的感染。但是1961年首例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)在英国发现后,至80年代其感染几乎遍及全球,最高可达SA感染总数的58%[1]。MRSA是重症监护病房(ICU)发生医院感染的重要病原菌,其致病力强,可引起脓毒血症及休克等严重并发症,死亡率高达63.1%[2]。MRSA传播速度快,常出现多重耐药性,可引起感染的流行及暴发流行,近年还出现了耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA) [3],使治疗MRSA感染非常困难。由于其具有传播途径广,致病性强,多重耐药性等特点,已成为临床治疗的难点。因此对MRSA的耐药机制进行研究具有重要意义。 现已明确MRSA耐甲氧西林的机制主要是产生一种新型的青霉素结合蛋白(PBP2a),由MRSA特有的mecA基因编码合成,与β-内酰胺类抗生素亲和力极低,当其它青霉素结合蛋白与β-内酰胺类抗生素结合的活性受到抑制,PBP2a可替代起到合成细胞壁的作用,从而产生耐药性。但仍不足以解释不同的MRSA菌株为何耐药水平不同?而且MRSA产生PBP2a的多少与其耐药水平的高低无关,更不能解释MRSA多重耐药(包括对β-内酰胺类以外的多类抗菌药物也耐药)的复杂机制! 近年来,细菌对药物的主动外排所致的耐药性引起了学者们的注意,随着研究的逐步深入,发现越来越多的临床常见致病菌存在与抗菌药物耐药有关的主动外排系统。且SA的主动外排可被利血平及碳酰氰间氯苯腙(CCCP)抑制[4]。研究发现,多重耐药菌株中的主动外排系统能够显著降低细胞内抗菌药物的浓度,同时由于主动外排系统转运底物的广泛性,使细菌呈现对多种化学结构完全不同的抗菌药物高度耐药。研究认为MRSA的耐药可能跟细菌获得主动外排基因有关,现已发现MRSA中存在多种主动外排系统。Markham和Neyfakh [5]早在1996年就推测外排系统在MRSA多重耐药机制中发挥重要作用。2004年许飞等[6]的研究表明,主动外排是MRSA耐喹诺酮类抗菌药物的重要机制之一。存在nora、qac、smr等多种外排系统。在qac家族中,除对消毒剂耐药外,对多种抗菌药物存在高耐药率。喹诺酮类药物原为MRSA感染的有效治疗药物,但对喹诺酮类耐药菌株迅速增多,且溴乙啶、喹诺酮是多种主动外排泵的底物,此种耐药性可被能量抑制剂CCCP、利血平及质子泵抑制剂拮抗。本文就ICU病房中MRSA的感染状况、耐药性分布及耐喹诺酮类药物的主动外排机制做进一步研究。 目的: 了解本院重症监护病房(ICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染状况,探讨MRSA的主动外排机制。 方法: 收集2005年至2008年三年期间本院ICU病房感染的金黄色葡萄球菌(SA),通过苯唑西林-琼脂稀释法和mecA基因检测法,从102株SA中筛选鉴定出80株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),琼脂稀释法测定21种抗菌药物MRSA菌株的最低抑菌浓度(MIC),观察药敏结果;通过计算机Primer Premier 5.0软件设计norA、qacA、qacB、qacJ 4种主动外排基因的引物,进行聚合酶链反应(PCR)扩增,将产物琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像分析系统摄像保存,并分析结果;将质子泵抑制剂奥美拉唑按一定比例加入到喹诺酮类药物左氧氟沙星中,进行协同抑制试验,测定药物主动外排基因阳性的MRSA的MIC值,分析试验前后药敏结果的变化。 结果: 1.收集本院ICU病房中住院患者感染的102株金黄色葡萄球菌(SA)中,源自住院患者有96例,源自医护人员双手携带有6例;苯唑西林-琼脂稀释法检出MRSA78株,检出率为76.5%,mecA基因检测法检出MRSA80株,检出率为78.4%;且从MRSA感染患者年龄构成比可以看出,以年龄≥60岁、合并有多种疾病的患者多发。 2.所检出的MRSA对万古霉素和替考拉宁的敏感性均为100.0%,而对其他19种抗生素(苯唑西林、青霉素、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、亚胺培南、哌拉西林三唑巴坦、阿奇霉素、红霉素、氯霉素、克林霉素、阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星、加替沙星、环丙沙星)均耐药。 3. PCR扩增法检出80株MRSA中的4种主动外排基因norA、qacA、qacB、qacJ分别为54株、12株、17株、9株,检出率分别为67.5%、15.0%、21.2%、11.2% 4.当加入奥美拉唑浓度达到20mg/L时,测出主动外排基因阳性的MRSA的MIC值较单用左氧氟沙星时出现变化;所选取的31株实验组菌株中,有4株MIC值变化较为明显,其余27株的MIC值均降低一个浓度梯度;另有11株为无主动外排基因菌株,其MIC值基本上无明显变化。 结论: 1 ICU患者感染MRSA严重,加强医护人员手的卫生对于预防MRSA的医院内感染较为重要。 2 MRSA呈现多重耐药性,仅对糖肽类抗生素表现敏感,对其他常见类抗菌药物菌耐药,并出现2株对万古霉素敏感性处于中介值的菌株。2 MRSA中存在norA、qacA、qacB、qacJ主动外排基因,以norA基因居多,其次为qacB,而qacJ检出率相对较低。 3泵抑制剂奥美拉唑可抑制MRSA对于喹诺酮类抗生素的主动外排作用,为临床治疗MRSA感染提供一种新的思路。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李洁;耐药肺炎链球菌的研究进展(综述)[J];临床儿科杂志;1998年04期
2 周继平;李恒;;空气中耐药菌株分布情况调查[J];新乡医学院学报;2007年02期
3 雷连成;细菌的耐药性(Ⅰ)[J];中国兽药杂志;2002年11期
4 杨高;;耐药菌:难以对付的敌人[J];环境;2001年02期
5 王克畏;细菌的“自白”[J];家庭科技;2003年07期
6 梁键;孙艳莉;;对β-内酰胺类抗生素的耐药机理与特性的分析[J];黑龙江科技信息;2008年03期
7 刘宏博;李钰;张智洁;李胜岐;;连续5a临床常见非发酵菌分离率变化及耐药性分析[J];微生物学杂志;2009年05期
8 徐艳;郭丽双;付英梅;张文莉;张凤民;;细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药机制[J];中国微生态学杂志;2008年02期
9 李君;孟新友;霍海峰;;具有双时滞的耐药菌形成模型的全局稳定性[J];西北师范大学学报(自然科学版);2011年02期
10 石桂英;孙宗科;陈西平;;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测细菌耐药性的初步研究[J];卫生研究;2008年01期
11 王学英,崔灵芝,朱健莹;谈抗生素的合理应用对医院感染的控制[J];太原科技;1997年06期
12 孙瑞民,李彤;细菌获得性耐药性与人类大肠菌群[J];中国微生态学杂志;1997年04期
13 朱南文,闵航,陈美慈;施用甲胺磷的土壤细菌变化效应和耐受菌的分离与鉴定[J];土壤通报;1999年01期
14 王重振,钱利生;细菌对喹诺酮类抗菌药的分子耐药机制[J];中国生物工程杂志;2003年12期
15 ;来自青蛙的抗生素挑战多种耐药菌[J];中国动物保健;2010年10期
16 姚美玲;张彬;柴同杰;;鸡兔舍耐药大肠杆菌气溶胶向环境扩散的研究[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年08期
17 魏丽莉;;细菌对抗生素耐药性的研究进展[J];生物学教学;2007年09期
18 王丽平;陆承平;;临床分离的动物源链球菌对红霉素的蓄积动力学研究[J];畜牧兽医学报;2007年02期
19 ;人类即将重返“黑暗时代”?[J];科学生活;2006年09期
20 樊晓明;梁绪中;李文霞;;细菌的耐药机制及对策[J];中国社区医师(医学专业);2011年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 高迎春;魏秀丽;张传津;苏梅;杨修镇;肖永霞;都业良;;地锦草等中药提取物对大肠杆菌耐药消除作用的初步研究[A];中国畜牧兽医学会动物药品学分会第四届全国会员代表大会暨2011学术年会论文集[C];2011年
2 林素珍;张满娥;毛平;赖善城;;我院2009年临床分离主要病原菌耐药预警通报[A];第二届全国药物性损害与安全用药学术会议——抗感染药物不良反应与临床安全应用专题研讨会论文汇编[C];2010年
3 李耘;王珊;薛峰;郑波;刘健;吕媛;;大环内酯耐药肺炎链球菌分子特性研究[A];第8届全国抗菌药物临床药理学术会议暨北京大学临床药理研究所成立三十周年论文集[C];2010年
4 杨杰;磨国鑫;王韧韬;蔡芸;梁蓓蓓;白楠;王睿;;MDR-AB耐药分型的相关性及治疗探讨[A];中华医学会第七届全国呼吸道感染学术大会暨第一届多学科抗感染治疗学术研讨会论文汇编[C];2011年
5 白大鹏;李志媛;孔伟利;孟令俊;李丽;;天津市结核分枝杆菌对氧氟沙星、左氧氟沙星耐药性动态研究[A];中华医学会结核病学分会2010年学术年会论文汇编[C];2010年
6 赵旺胜;翁幸鐾;糜祖煌;;基于管家基因和水平转移基因的菌株亲缘性分析:60株耐药大肠埃希菌研究[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
7 刘同华;邢茂;宋光伟;王涵;;细菌耐药突变选择窗理论研究进展[A];2008年成渝药学学术年会论文集[C];2008年
8 陈桂先;谢麟;;抗菌药物引起的“耐药菌疾病”及其控制[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集[C];2009年
9 梁蓓蓓;白楠;宋秀杰;王睿;;PK/PD参数预测左氧氟沙星抑制金黄色葡萄球菌耐药突变的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
10 卞雪莲;;抗击耐药菌,消毒新思考[A];中国医院协会第十八届全国医院感染管理学术年会论文资料汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 斯庆图娜拉;不同慢性胃病来源HP的耐药特征及抗HP嗜酸乳杆菌的抑制效应分析[D];吉林大学;2011年
2 李力韬;耐药脊柱结核个体治疗的疗效评价及基因芯片检测结核耐药的应用研究[D];第三军医大学;2012年
3 陈军;武汉地区结核分枝杆菌药物敏感性及氟喹诺酮耐药分子机制的研究[D];华中科技大学;2011年
4 陈军;武汉地区结核分枝杆菌药物敏感性及氟喹诺酮耐药分子机制研究[D];华中科技大学;2011年
5 宋秀杰;左氧沙星与磷霉素联合对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度及用PK/PD参数预测体内细菌耐药变异的动物实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
6 许宏涛;万古霉素耐药肠球菌分子特征及遗传背景研究[D];北京协和医学院;2011年
7 胡付品;碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药机制及其所致医院感染控制研究[D];复旦大学;2010年
8 王杰;中国部分地区碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌耐药机制及分子流行病学研究[D];浙江大学;2011年
9 许攀峰;多重耐药鲍曼不动杆菌基因组与“耐药岛”的比较基因组学研究[D];浙江大学;2012年
10 邵宜波;枸橼酸杆菌中质粒介导喹诺酮耐药基因的分子生物学特征及qnrB24基因分析[D];安徽医科大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高晓览;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌主动外排耐药机制的研究[D];安徽医科大学;2010年
2 李茹;耐万古霉素肠球菌分子特性研究[D];复旦大学;2010年
3 李强;化学疗法与结核分枝杆菌细菌学关联性的初步研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2010年
4 钱朝东;抗生素产生菌19-1的分离鉴定及发酵产物的研究[D];浙江大学;2001年
5 彭哲;重庆地区儿童结核分枝杆菌临床分离株基因分型的初步研究及耐药相关性分析[D];重庆医科大学;2010年
6 蒋颜;碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌对多粘菌素B耐药机制研究[D];浙江大学;2010年
7 刘灿;嗜麦芽窄食单胞菌对氟喹诺酮类和磺胺类抗菌药物耐药机制的研究[D];安徽医科大学;2011年
8 陆素颖;城市河流沉积物中超广谱-β-内酰胺酶耐药多样性研究[D];南方医科大学;2010年
9 肖方;鸡源大肠杆菌16S rRNA甲基化酶基因的检测及扩散机制[D];河南农业大学;2010年
10 程序;万古霉素耐药靶酶VanX抑制剂及金属-β-内酰胺酶检测试剂Nitrocefin的合成与表征[D];西北大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 刘正午 胡永忠;盯着耐药菌起跑[N];医药经济报;2003年
2 傅德明;为耐药菌度身定做[N];医药经济报;2001年
3 庄愉;不让BlaR1得逞[N];医药经济报;2002年
4 ;抗耐药菌药物研究的三大策略[N];中国医药报;2004年
5 易运文;深圳医生全球首次发现耐药基因[N];光明日报;2007年
6 刘伯宁;揭开“末日病菌”的面纱[N];南方周末;2010年
7 周婷玉孙闻;耐药菌导致85%的感染死亡病例专家呼吁慎用抗生素[N];医药经济报;2007年
8 ;防耐药:初治是关键[N];医药经济报;2011年
9 任吉民 陈蕾 李雅琳;耐药菌让“万古”重焕青春[N];医药经济报;2003年
10 本报记者 尹训银 王照重;“滥用抗生素”催生致命耐药菌[N];中国消费者报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978