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活动性肺结核患者外周血中分泌IL-22的淋巴细胞亚群的探讨

梁华  
【摘要】:研究背景:IL-22是在2000年报道发现的一种炎性细胞因子,可由多种免疫细胞和组织分泌,对于炎症性疾病和自身免疫性疾病的发生具有重要的调节作用。虽然近年发现的Th17细胞以分泌IL-17和IL-22等细胞因子为特征,参与了多种炎症性疾病和自身免疫病的发生发展,但新近又有报道,以分泌IL-22为主要特征的Th22细胞在机体感染病毒或细菌等病原体后,可以激活其他免疫细胞,并且帮助机体控制炎症对抗感染。本室近期研究工作发现,在结核病(TB)患者外周血中分泌IL-17的γδT细胞亚群的比例升高,但在抗TB感染免疫中的作用并不十分清楚;另外,在TB患者外周血中是否也存在分泌IL-22的γδ T细胞,是否也在抗TB感染免疫中发挥作用以及与γδT17细胞的关系等均有待探讨。 目的:检测不同淋巴细胞亚群中IL-22产生细胞的分布,探讨TB患者和健康人(HD)外周血中分泌IL-22和IL-17的αβ T细胞、γδ T细胞、B细胞及NK细胞等淋巴细胞亚群比例的变化,以及结核杆菌(M.tb)耐热抗原(Mtb-HAg)体外活化扩增的γδT(Mtb-AT)分泌IL-22的情况,以探讨不同淋巴细胞亚群在抗M.tb感染免疫应答和TB发病机制中的作用。 方法:1.采集22例活动性肺结核病人和18例HD外周血,加入佛波醇酯(PMA)和钙离子霉素(Ionomycin)刺激培养2小时后,再加入莫能霉素(Monensin)继续培养4小时,收集细胞,加入荧光标记单抗体进行表面分子和胞内染色,流式细胞仪检测分泌IL-22和分泌IL-17的淋巴细胞亚群的比例。2.采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),加入Mtb-HAg和rIL-2刺激培养7-10天后,使其成为富含效应性γδ T细胞的Mtb-Hag激活的T细胞(MTb-AT),收集细胞用PMA/Ionomycin和Monensin以及Mtb-HAg和Monensin刺激培养6小时,用流式细胞仪检测分泌IL-22的γδT细胞亚群的比例。3.采用同一个体的全血和PBMC同时用流式细胞术检测细胞因子法检测两种标本中分泌IL-22的细胞比例。4.采用同一个体的全血和PBMC同时用PMA/Ionomycin刺激培养6小时,收集细胞培养上清用ELISA检测IL-22和IL17的含量;采用ELISA检测TB和HD外周血浆中IL-22和IL-17的含量。5.从HD和TB外周血分离获取PBMC后,用RT-PCR的方法检测IL-22mRNA的表达。 结果:1. IL-22分泌细胞仅占人外周血淋巴细胞的一小部分,TB病人和HD分别为3.16%和2.69%;且主要由CD3+T细胞产生,在TB (n=22)病人和HD (n=18)分别为54.56%和64.10%。 2.分泌IL-22的淋巴细胞中,γδ T细胞所占的比例在TB病人(6.45%,n=22)明显的高于HD(2.73%,n=18,P﹤0.05);其它各淋巴细胞亚群所占比例在TB病人和HD之间未见差别。 3.在CD3T细胞、CD4T细胞、CD8T细胞、γδ T细胞、NK细胞、B细胞中分泌IL-22的细胞比例,在TB患者(n=22)分别为1.24%、1.58%、0.66%、7.37%、4.13%和0.54%;在HD(n=18)分别为1.83%、2.12%、0.67%、1.81%、1.96%和1.09%,分泌IL-22的γδT细胞在TB患者明显高于HD(P﹤0.05)。 4.在各T细胞亚群中,均可以检测到共表达IL-22和IL-17的阳性细胞;在TB患者中,IL-22+IL-17-细胞百分比为1.87%,Th17细胞为3.78%;在HD中,IL-22+IL-17-细胞的百分比为2.10%,Th17细胞为3.65%;Th22细胞和Th17细胞在HD (n=8)和TB (n=15)两者之间没有差别。 5.分泌IL-22的γδT细胞在Mtb-HAg活化扩增的γδT细胞(Mtb-AT)中的比例在TB患者(0.75%,n=3)与HD(1.41%,n=5)之间比较没有差别。 6.无论TB患者还是HD,用Mtb-HAg再刺激的Mtb-AT中分泌IL-22的γδT细胞的比例与单加Monensin未刺激组相比均没有差别(对TB,0.19%VS0.40%,n=3;对HD,1.16%VS0.62%,n=5,p0.05)。 7.在全血标本中检测到的分泌IL-22的各T细胞亚群的比例均明显高于在PBMC中的检出比例;全血中分泌IL-22的NK细胞和B细胞比例则明显低于在PBMC中的检出比例。 8. ELISA法检测的IL-22和IL-17在全血培养上清中的浓度均明显高于在PBMC培养上清中的浓度;TB患者外周血浆IL-22和IL-17的浓度均明显高于HD。 9. TB患者外周血IL-22的mRNA表达明显高于HD。 结论: 1.人类外周血淋巴细胞中T细胞是分泌IL-22的最主要来源,其中CD4+T细胞又是分泌IL-22的主要来源之一。 2. TB患者外周血中分泌IL-22的γδ T细胞增多,并且分泌IL-22的γδT细胞比例增高并非与分泌IL-17的γδ T细胞比例增高引起有关。 3. TB患者外周血中Th17和Th22细胞比例与HD相比没有显著性差异。 4. Mtb-HAg可特异性诱导γδT细胞分泌IFN-γ,而不能诱导分泌IL-22。 5.在全血标本中检测到的分泌IL-22的T细胞亚群的比例均明显的高于其在PBMC中的检出比例,在全血标本中检测到的分泌IL-22的NK细胞和B细胞比例则明显低于在PBMC中的检出比例。 6. TB患者外周血浆IL-22和IL-17的浓度均明显高于HD。


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1 池一凡;孙龙;侯文明;孙忠东;牛兆倬;孙勇;;大鼠外周血内皮祖细胞体外向内皮细胞诱导分化时的表型变化特征[J];青岛大学医学院学报;2008年04期
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7 安焕宇;HBsAg疫苗免疫对人体外周血B细胞的活化作用[J];国际生物制品学杂志;1986年01期
8 陈碧艳;外周血中检出海蓝细胞一例报告[J];右江医学;1998年01期
9 龙和平;用外周血测定血清尿素氮[J];临床检验杂志;1985年03期
10 ;广州市散在居民肺结核患病情况调查报告[J];广州医药;1983年05期
11 奴力曼,纪光辉;活动性肺结核并发结核性全葡萄膜炎一例报告[J];中国斜视与小儿眼科杂志;1999年03期
12 孟守印;郝铁荣;柴小明;;2002~2005年阳高县归口管理肺结核流行趋势分析[J];中国健康教育;2007年04期
13 陶红兵;叶建君;苗卫军;侯双翼;熊光练;余瑶;郭石林;陈璞;;农村活动性肺结核患者密切接触者发病因素分析[J];中国公共卫生;2010年02期
14 吕祝庆,李国雄,胡锦镳,陈海泉;ELISA检测结核IgG抗体对肺结核的诊断价值[J];实用医学杂志;1993年04期
15 黄贵良;早期活动性肺结核和抗结核治疗后连续性改变的CT所见[J];国外医学.临床放射学分册;1994年03期
16 周义乾,禹广辉,刘清珍;黄芪注射液佐治活动性肺结核近期疗效观察[J];中国医刊;1999年09期
17 焦东江;开放性肺结核与活动性肺结核的区别[J];中国检验检疫;2005年02期
18 任涛,蔡映云,金美玲,袁正宏;活动性肺结核患者外周血单个核细胞表达T_H1/T_H2类细胞因子的特点[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年06期
19 马国强;周丽萍;;太仓市饮食服务从业人员活动性肺结核患病率调查[J];上海预防医学杂志;2006年10期
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1 尚鹏;朱平;樊春梅;王彦宏;郑朝晖;李晓燕;;RANK RANKL和骨保素在强直性脊柱炎外周血和滑液中表达的研究[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年
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