大苞鞘石斛的化学成分研究及12种石斛的毛兰素含量测定

【摘要】：目的:阐明兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)大苞鞘石斛(Dendrobium wardianum Warner)的化学物质基础;通过常见石斛的毛兰素含量分析探讨毛兰素用于中药石斛质量评价可行性。方法:1.应用多种色谱分离方法(正相硅胶、反相硅胶、凝胶、MCI等分离材料并结合中压制备色谱、高效液相半制备色谱等),对大苞鞘石斛进行分离纯化,得到的单体化合物通过核磁共振(包括1H和13C-NMR,HMBC,HSQC,1H-1H COSY和ROESY)、质谱、红外、紫外等波谱学方法进行结构鉴定。2.采用LC-MS/MS联用方法对鼓槌石斛(D.chrysotoxum Lindl.)、晶帽石斛(D.crystallinum Rchb.f.)、肿节石斛(D.pendulum Roxb.)、兜唇石斛(D.aphyllum(Roxb.)C.E.Fischer)、流苏石斛(D.fimbriatum Hook.)、铁皮石斛(D.officinale Kimura et Migo)、束花石斛(D.chrysanthum Lindl.)、金钗石斛(D.nobile Lindl.)、美花石斛(D.loddigesii Rolfe)、齿瓣石斛(D.devonianum Paxt.)、球花石斛(D.thyrsiflorum Rchb.f.)、大苞鞘石斛(D.wardianum Warner)12种石斛中的毛兰素进行定性和定量检测。结果:1.本课题从大苞鞘石斛茎的乙醇提取物中分离并鉴定23个化合物,分别是aduncin(1),wardianumine A(2),dihydroshihunine(3),denbinobin(4),9,10-dihy dro-5-hydroxy-3,7-dimethoxy-1,4-phenanthrenequinone(5),mostatin(6),loddigesiin ols A(7),moscatilin(8),5-hydroxy-3,4′-dimethoxybibenzyl(9),3,4-dihydroxy-5,4'-dimethoxy bibenzyl(10),dendrocandin A(11),gigantol(12),dihydroconiferyl dihydro-p-coumarate(13),9-[7-[(7′S,8′S)-7′-(2′-hydroxy-1′-dimethoxyphenyl)-8′-hy droxymethyl-1-methoxy-7′,8-dihydrobenzo[2a,3a]dioxin-5-yl]ethyl]-12-methoxylbenze ne(14),dendrocandin U(15),ethyl 3-(4-hydroxyphenyl)acrylate(16),pinoresinol(17),(+)-medioresinol(18),episyringaresinol(19),(+)-syringaresinol(20),3′,4′,5′-trimethoxyflavanone(21),homoeriodictyol(22),protocatechuic acid methyl ester(23)。化合物结构涉及倍半萜、联苄、生物碱、菲类、黄酮、木脂素等;并对化合物1,2,3,8进行了一氧化氮生成抑制剂筛选实验,结果显示这四个化合物几乎没有活性,同时对化合物4、5、6、14进行了细胞毒活性实验,结果显示化合物5对乳腺癌及结肠癌细胞株的细胞毒活性较好,强于顺铂,化合物14对乳腺癌有较好的选择性。2.12种石斛中只有鼓槌石斛、金钗石斛和流苏石斛中检测到了毛兰素,对这三种石斛的定量检测表明,毛兰素在给定的浓度范围内,线性关系良好(r=0.9994),且三种石斛的含量分别为0.159%、0.0564%、0.0392%。结论:1.本课题从大苞鞘石斛中共分离鉴定出23个单体化合物,其中化合物2和14为新化合物。2.本方法能灵敏、准确、快速的测定出石斛属植物中毛兰素含量,为石斛属进一步研究开发及质控标准的建立提供科学依据。最后,对石斛属植物中倍半萜类化合物进行了综述,通过这些化合物的结构特点对它们进行归纳整理,为石斛的进一步研究和开发提供理论依据。