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染料二聚体作为荧光探针在生物大分子测定中的应用研究

高峰  
【摘要】: 蛋白质和DNA都是重要的生物大分子。对蛋白质和DNA进行定量测定是生物化学和生命科学中经常涉及的分析内容,建立高灵敏度、低检测限的荧光探针定量测定的方法仍具有重要意义。 本论文以阳离子染料灿烂甲酚蓝在阴离子表面活性剂十二烷基磺酸钠存在下形成的现场弱荧光二聚体为荧光探针,建立了测定牛血清白蛋白的新方法,该法线性范围为0~7mg/L,检测限为3.66×10~(-3)mg/L,对2.00 mg/L几的牛血清白蛋白平行测定8次,相对标准偏差为2.77%,说明本法准确可靠。以阳离子染料耐尔蓝在阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠存在下形成的现场弱荧光二聚体作为测定人血清总蛋白的荧光探针。该法用于实际样品的测定,与临床方法测定的结果相吻合。 染料二聚体也是能量转移的有效形式。本论文以吖啶橙—罗丹明B二聚体能量转移体系作为荧光探针,建立了测定DNA的新方法。用于鲱鱼精DNA和小牛胸腺DNA的测定,线性范围分别为0.33~1.33mg/L,0.33~3.33mg/L;检测限分别为1.63×10~(-3)mg/L,1.52×10~(-3)mg/L。对1.00mg/L鲱鱼精DNA和小牛胸腺DNA的测定,相对标准偏差分别为2.40%和2.00%。


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