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饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹消化酶、非特异性免疫和肠道内容物细菌的影响

唐媛媛  
【摘要】:以初始体重为(518.81土15.99)g的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus, Linn)为实验对象,鱼粉、豆粕为主要蛋白源,鱼油为脂肪源,配制蛋白质水平分别为38%,41%和44%,脂肪水平均为8%的3种等脂等能的饲料投喂卵形鲳鲹,处理组依次记为A组(38%)、B组(41%)、C组(44%),进行为期30d的饲养试验,探讨饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹肌肉营养成分、消化酶活性、非特异性免疫指标以及肠道内容物细菌的影响。主要研究结果如下: 1.饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹肌肉营养成分的影响 饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹肌肉中蛋白质、氨基酸、脂肪和脂肪酸含量总体上影响不大。随着饲料蛋白质水平的升高,卵形鲳鲹肌肉中蛋白质、氨基酸含量表现出升高趋势,但升幅不大,各处理组卵形鲳鲹肌肉蛋白质含量在19.6-20.0%之间波动,总氨基酸含量在187-204g/kg之间;脂肪和脂肪酸含量随饲料蛋白质水平升高变化不明显,各处理组卵形鲳鲹肌肉脂肪含量在11.0-12.2%间波动,饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量分别为4.1-4.5%,6.9-7.7%。 2.饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹消化酶活性的影响 饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹肝脏、肠道中胰蛋白酶(TRY)和胃蛋白酶(Pepsin)活性影响显著(P0.05),各组织器官中胰蛋白酶和胃蛋白酶活性变化范围分别为584.90-9185.84U/mg prot、4.79-42.34U/mg prot;对脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMS)及纤维素酶(Cellulose)活性影响不显著(P0.05),脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶活性分别在37.97-312.35U/mg prot、0.15-0.51U/mg prot和0.25-9.13U/mg prot之间变化。卵形鲳鲹消化酶活性具有显著的组织差异性(P0.05),除纤维素酶外,其他消化酶活性均表现为前肠中肠后肠肝脏。说明前肠是卵形鲳鲹消化蛋白质营养的主要部位,提高饲料蛋白质水平有利于卵形鲳鲹对蛋白质的消化利用。 3.饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹非特异性免疫的影响 随着饲料蛋白质水平升高,各处理组卵形鲳鲹血清溶菌酶(LYZ)活性先显著升高后显著降低(P0.05),LYZ活性最高出现在B组,为17.65U/mg prot;各组织器官中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性先显著升高后显著降低(P0.05),B组肠道中AKP和ACP活性最高,分别为10056.14U/mg prot、6633.06U/mg prot,GPx活性最高出现在B组肝脏,为593.87U/mg prot; SOD和CAT活性显著升高(P0.05),最高值均出现在C组肝脏,分别为332.16U/mg prot和42.18U/mg prot;总抗氧化能力(T-AOC)显著增强(P0.05),肝脏T-AOC最强,最高值为78.40单位/mg prot;丙二醛(MDA)含量显著下降(P0.05),C组肌肉MDA含量最低,为0.48nmol/mg proto综合各非特异性免疫指标的变化结果发现,B组卵形鲳鲹免疫能力较强,即当饲料蛋白质水平为41%时,对卵形鲳鲹生长健康较为有利。 4.饲料蛋白质水平对卵形鲳鲹肠道内容物细菌的影响 PCR-DGGE指纹图谱分析表明,B组卵形鲳鲹后肠内容物细菌种类最多,多样性最高,其肠道内容物细菌16S rDNA V3区基因通过DGGE分离后得到24条位置各异的条带,多样性指数为3.156。B组卵形鲳鲹前肠内容物细菌种类最少,多样性最低,其肠道内容物细菌16S rDNA V3区基因通过DGGE分离后得到19条位置各异的条带,多样性指数为2.732。各样品肠道内容细菌群落的相似性分析表明,C组卵形鲳鲹中肠和后肠肠道内容物细菌群落相似性最高,相似性系数为50.00%,B组中肠和C组中肠肠道内容物细菌群落相似性最低,相似性系数为37.14%。各样品聚类分析表明,C组前、中和后肠的聚类位置最分散,即C组卵形鲳鲹前、中和后肠道内容物细菌群落组成差异最大,说明饲料蛋白质水平为44%时,对卵形鲳鲹肠道内容物细菌群落结构的影响较大。综合以上结果表明,饲料蛋白质水平会对卵形鲳鲹肠道内容物细菌群落组成造成影响。优势条带回收测序结果表明,卵形鲳鲹肠道内容物内的优势菌群主要属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和绿弯菌门(Chloroflexi)。


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