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秋茄和桐花树酚酸类成分及其生物活性研究

翁梦婷  
【摘要】:秋茄和桐花树是福建省内中分布最广的两种红树植物,富含丰富的生物活性物质:酚类、萜类、多糖、生物碱、脂肪酸、甾醇等,民间将其作为药物使用。酚酸为酚类物质中重要的一类,主要通过莽草酸途径生成,在谷物、蔬菜、水果、茶中一般以游离或与其它物质形成酯键、糖苷键等形式存在,具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗炎等特性。近年来,对酚酸物质的存在形式的研究逐渐成为新的热点,研究表明红树植物中物质的存在形式与极端条件下的抗压有很大的关系,因此,研究秋茄、桐花树中不同形式的酚酸及其生物活性对于更好的了解及开发红树植物有重要的意义。本论文以秋茄和桐花树为研究对象,从其不同部位(茎、树叶、果实)中提取出了游离、可溶酯化、可溶糖苷和不溶束缚四种存在形式的酚酸类物质,测定其总酚含量,并对四种形式酚酸物质中酚酸的组成和分布进行了研究。结果表明:秋茄和桐花树的游离、可溶酯化、可溶糖苷和不溶束缚四种存在形式的酚酸的总酚含量在 2.51~7.21,2.72~10.54,2.10~12.05 和 1.43~11.10 mg GAE/g DW范围内波动;不同存在形式的酚酸的单酚酸组成和含量在秋茄和桐花树不同部位均存在差异,其中秋茄茎、树叶和果实中游离形式的绿原酸含量突出,而桐花树茎和树叶中酯化形式的没食子酸含量最高。从肿瘤化学预防角度,本论文采用DPPH分析、ABTS分析、FRAP分析、DNA氧化损伤保护不同的抗氧化活性评价体系评价了不同存在形式的酚酸抗氧化活性,并分析了总酚与抗氧化能力的相关性,研究了不同存在形式的酚酸对亚硝酸盐、肝癌细胞SMMC-7721和小鼠黑色素瘤细胞B16影响。结果表明,秋茄树叶中四种存在形式的酚酸的抗氧化能力以可溶糖苷可溶酯化游离不溶束缚的顺序递减,而茎中则表现出完全相反的趋势,即不溶束缚游离可溶酯化可溶糖苷,秋茄果实中抗氧化活性最强的酚酸为可溶糖苷化酚酸,桐花树茎和树叶均为可溶酯化酚酸,与其对应的总酚含量最高一致;不管是秋茄还是桐花树,各部分酚酸抗氧化活性均与其总酚含量均呈显著正相关;秋茄树叶、茎和果实的不同存在形式的酚酸(1 mg/mL)对DNA氧化损伤的保护率在36.36±3.85%~56.44±1.54%范围内变动,而桐花树树叶和茎的四种酚酸(1 mg/mL)的保护率在45.05±4.26%~71.06±3.40%范围内变动;与VE比较,在模拟的胃液A、B中,不同形式的酚酸能有效清除亚硝酸盐,在胃液A中清除效果普遍优于胃液B;对肝癌细胞SMMC-7721抑制作用较强的酚酸为秋茄茎游离、酯化、糖苷化酚酸和秋茄树叶酯化、糖苷化酚酸,IC50分别为234.88±18.17、176.69±12.75、215.12±23.16、145.12±13.45 和 125.25±20.27μg/mL,桐花树茎和树叶的酯化、糖苷化酚酸均对小鼠黑色素瘤细胞B16有较强的抑制作用,IC50分别为 208.32±23.26、105.26±5.33 和 252.33±7.26 和 299.13±10.96 μg/mL。本论文进一步研究了不同存在形式的酚酸对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的影响。首先,对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活性测定,结果表明秋茄树叶的糖苷化酚酸、果实的酯化酚酸对蘑菇酪氨酸酶单酚酶有抑制作用,秋茄树叶和茎的其它不同存在形式的酚酸和果实的游离酚酸均为激活作用。桐花树树叶和茎四种存在形式酚酸都造成了酶活不同程度的下降,树叶游离酚酸的IC50值为39.24 μg/mL,茎不溶束缚、游离、酯化和糖苷化酚酸IC50值分别为72.25、93.31、99.72和117.05μg/mL。其次,对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活性测定,结果表明有抑制作用且能达到IC50值的为秋茄树叶、茎和桐花树茎的游离酚酸,IC50值分别为95.34±4.21、96.26±5.07μg/mL、71.68±1.09μg/mL。综上,通过本论文的研究,对红树植物秋茄、桐花树酚酸类物质在极端条件下存在形式,含量及其肿瘤化学预防作用和对酪氨酸酶的影响有了更深层次的了解,为进一步开发利用红树植物提供理论依据。


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