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太子参中有效成分的分离纯化、结构鉴定、及其指纹图谱研究

韩超  
【摘要】: 本论文以中药太子参为研究对象,对太子参有效成分的提取分离、结构表征以及太子参指纹图谱进行了系统研究,取得了令人满意的结果。该研究对中药材太子参GAP的研究和质量控制具有指导意义和应用价值。本文主要研究结果简述如下: 1.建立了苯酚-硫酸比色方法,对福建柘荣太子参GAP基地不同时间采收的柘荣太子参样品的多糖含量进行了动态分析,探讨了其动态积累规律,初步确定了该基地太子参的最佳采收时间,为太子参的合理采收提供了科学依据。 2.建立了太子参中氨基酸的高效液相色谱检测方法。用邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOC)联合柱前衍生反相高效液相色谱测定太子参中的17种氨基酸。详细考察了样品的水解、样品的衍生、柱温对测定的影响,确定了高效液相色谱测定太子参中氨基酸的最佳色谱条件。结果表明该方法快速,高效,灵敏度高,适宜于药材中氨基酸含量的测定。 3.建立了高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化太子参指标成分太子参环肽Pseudostellarin B的简便有效的新方法。通过试验优化了HSCCC的分离参数。结果表明:可用溶剂系统的上相作溶样溶剂,一次进样量以不超过60mg为宜。在优化的条件下,一次分离,可得4个峰,经HPLC检测,太子参环肽Pseudostellarin B为最主要峰,纯度达96%以上,可作为药物标准品用于分析测试或药理与毒理研究。经TOF-MS, 1H-NMR, 13C-NMR , 1H-13C-COSY对该化合物结构的表征,确认为太子参环肽Pseudostellarin B。该制备方法与HPLC制备方法相比,具有溶剂系统既是固定相又是流动相,廉价易得,可随时更换调整,不需要特殊的要求,样品制备量大,且不存在色谱柱污染的优点。 4.本研究工作首次建立了太子参中太子参环肽Pseudostellarin B的高效液相色谱测定方法及高效液相色谱/质谱联用技术分析太子参中的环肽类化合物的分析方法。详细考察了太子参环肽Pseudostellarin B及太子参中的环肽类化合物的提取方法、温度和时间对Pseudostellarin B提取率的影响,采用对照品和飞行时间质谱(TOF-MS)方法对其进行了定性分析。在优化的色谱条件下,太子参环肽Pseudostellarin B的色谱峰与其它干扰组份可快速、有效分离,且测定方法的精密度、重现性及线性关系良好,回收


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