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毛细管电泳—安培检测仪器的研制及应用研究

王伟  
【摘要】:色氨酸(Trp)及其重要代谢产物(3-羟犬尿氨酸、5-羟色氨酸、犬尿氨酸、5-羟吲哚乙酸、黄尿酸、吲哚丙酮酸、5-羟色胺、色胺)(Trps)在人体内具有十分重要的生理作用。对它们的研究可以为多种疾病的诊断和治疗以及精神疾病的机理研究提供依据。传统上对Trp的代谢过程和代谢物的研究多采用高效液相色谱法(HPLC)。毛细管电泳(CE)是一种新兴的分离分析技术,有高效、快速、微量等特点,是分析此类化合物的较佳手段。但是目前CE在药物代谢中的研究依然极少。针对Trps所具备的电活性,我们采用灵敏度较高的毛细管电泳安培检测法对Trps进行分离分析并研究了Trp的代谢过程,为CE在药代研究方面的应用作了一次有益的探索。 本论文共分四个部分,第一部分对CE的原理和发展等进行评述,对其中的毛细管电泳安培检测法(CE-AD)进行了较为详细的介绍。同时,对Trp的代谢过程及其重要代谢物的分析方法也进行了比较详细的描述。 第二部分对CE-AD仪器中的自对准电解池系统、水冷系统、高压系统、切换进样系统提出新的设计方案。对新组装的仪器的性能测试表明,该仪器具有良好的稳定性和较高的灵敏度,可以进行多组分的分离分析。 第三部分在自组装的CE-AD仪器上,采用毛细管胶束电动色谱法,对Trps进行分离检测,九种Trps化合物在23min内得到完全分离。将所建立的方法应用于家兔尿样中Trp的代谢研究,结果表明,在给药20h后,从尿中排出的Trp原形药累积量相当于给药量的22.4 %。分析过程中还成功地检测到代谢物之一犬尿氨酸的生成。 第四部分对黄尿酸(XA)在活化玻碳电极上的微分脉冲伏安法行为进行了研究。结果表明,活化电极极大提高了对XA的检测灵敏度,所建立的方法已经成功地用于模拟样品中XA的测定


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