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福建赤壁金线莲高效繁殖与栽培技术研究

朱萍  
【摘要】:金线莲(Anoectochilus roburghii (Wall.)Lindl.)为多年生药用植物,具有很高的药用价值,同时还具有较高的观赏价值,深受人们的喜爱。近年来随着野生资源不断被挖掘,野生金线莲濒临灭绝。本试验以福建永泰赤壁野生金线莲为研究材料,提供了一套可供企业产业化生产的金线莲试管苗繁育及瓶苗栽培技术,建立了金线莲快速繁殖体系的完整生产技术过程。研究结果如下: 1福建永泰赤壁金线莲一次性成苗培养技术研究 ①建立金线莲无菌体系,茎段消毒最佳方法为:75%酒精消毒30s+0.1%升汞消10min,其污染率和存活率分别为16.06%、70.77%。 ②不定芽诱导最佳培养基为MS+3.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA+0.02mg· L-1TDZ+30g·L-1蔗糖+6.5g·L-1琼脂+2.0g·L-1活性炭,平均每个茎段增殖8.77个芽。 ③一次性成苗培养的最优培养基为MS+l.Omg·L-16-BA+1.5mg·L-1NAA+150g·L-1土豆+30g·L-1蔗糖+6.5g·L-‘琼脂+2.0g·L-1活性炭,平均每个茎段增殖2.55个芽,培养4M后平均株高7.08cm,平均茎周长1.19cm,平均生根2.64条。 2福建永泰赤壁金线莲多倍体诱导试验 采用秋水仙素溶液浸泡法、涂抹法、加入培养基法诱导金线莲多倍体。结果表明3种方法的诱导效果:加入培养基法浸泡法涂抹法。加入培养基试验中以700mg·L-1秋水仙素溶液处理15d的诱导率最高,达53.33%。浸泡法以500mg·L-1秋水仙素溶液处理24h,诱变效果最佳,诱变率为51.67%。涂抹法中以700mg·L-1秋水仙素溶液涂抹在茎节处的诱导效果较好,变异率为35.00%。 3福建永泰赤壁金线莲瓶苗移栽试验 对金线莲瓶苗进行一系列的移栽试验,研究结果表明: ①株高5-8cm,茎径0.20-0.25cm左右,根数2-3条,室内培养4-5个月左右的瓶苗即可进行移栽,移栽成活率高于84%; ②移栽环境的光照强度控制在30001x有利于金线莲的生长,在该光照强度下金线莲生长品质好,种植4个月后平均株高11.48cm,单棵鲜重达1.57g,折干率为12.93%; ③大棚种植金线莲时,较佳的栽培基质可选择泥炭土和松树皮粉碎按1:1的比例混合,移栽成活率高达92%,或者选择泥炭土、珍珠岩、蛭石按4:1:1的比例混合,移栽成活率为90%; ④林下种植的金线莲形态和生物产量都显著好于大棚种植,种植4个月后,平均株高13.91cm,单棵鲜重达2.25g,折干率为13.38%,这三个指标分别比大棚种植的苗增加29.52%、16.58%和9.49%; ⑤营养液培养植株生长较快,茎细长,生物产量累积少,折干率低,但成活率高,且采收时根部容易清洗,本研究中较佳的营养液配方为MS大量元素稀释100倍,培养4个月后,平均株高11.91cm,每棵鲜重为1.38g,折干率为8.53%。4福建永泰赤壁金线莲多糖和黄酮含量的测定 (1)金线莲多糖含量测定试验结果表明: ①室内培养阶段二倍体苗和多倍体苗多糖含量随着培养时间的延长而增加,并高于野生苗多糖含量(88.3mg·g-1),且多倍体苗多糖含量高于二倍体苗,室内培养5个月多倍体苗多糖含量为189.1mg·g-1,而二倍体苗多糖含量仅为159.1mg·g-1。 ②组培瓶苗种植9个月的时间中,多糖含量在种植前3个月中迅速减少(大棚种植1个月后为92.2mg·g种植3个月后为41.1mg·g-1)后缓慢增加(大棚种植6个月后为87.7mg·g-1,种植9个月后为93.7mg·g-1),栽培时间越久含量越多,种植6个月以上,多糖含量(不少于87.7mg·g-1)高于野生苗多糖含量(88.3mg·g-1)。 ③林下栽培苗多糖含量(种植6个月为90.6mg·g-1)略高于大棚栽培苗(种植6个月为87.7mg·g-1)。 ④大棚种植6个月金线莲鲜品多糖的含量比干品增加1.72%。 (2)金线莲总黄酮含量测定试验结果表明: ①瓶苗黄酮含量随着培养时间的延长而增多,室内培养3-5个月的时间,黄酮含量从11.73mg·g-1)增加到12.69mg·g-1. ②移栽后总黄酮含量进一步增加,大棚种植1-9个月的时间中,黄酮含量从13.08mg·g-1增加至15.45mg·g-1,但均低于野生苗含量(19.77mg·g1). ③多倍体瓶苗黄酮含量(室内培养5个月为13.82mg·g-1)高于二倍体瓶苗(室内培养5个月为12.69mg·g-1). ④林下栽培苗黄酮含量(种植6个月为15.06mg·g-1)与大棚栽培苗黄酮含量(种植6个月为14.73mg·g-1)差异不显著。 ⑤金线莲干品与鲜品黄酮含量的差异与苗质量有关,而苗质量与培养瓶苗过程中培养基成分有关,折干率低于10.10%时,1g干品换算成鲜品的黄酮含量比实测的干品黄酮含量高,前者比后者增加0.08-14.25%;而折干率高于10.10%时,1g干品换算成鲜品的黄酮含量比实测的干品黄酮含量低,前者比后者减少1.38-14.00%。


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