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稻瘟病菌交配型鉴定及其有性后代的遗传分析

王宝华  
【摘要】: 用5组标准菌株与38个稻瘟病菌菌株进行交配,结果表明不同标准菌 株测得同一组稻瘟病菌菌株的育性和交配型差异很大;进一步研究表明这 是由于标准菌株之间存在有性态形成能的差异和性反应的差异造成的。比 较认为GUY11和KA3最适合用作标准菌株,并用其测定了227个来自福 建水稻上分离的稻瘟病菌菌株的育性和交配型,结果表明福建稻瘟病菌菌 株的可育率为80.2%,81.9%的可育菌株交配型为MAT1-2,18.1%则为 MAT1-1。 根据MAT1-1、MAT1-2全序列,设计了二对引物,并摸索了最适PCR 反应条件,对207个福建稻瘟病菌菌株的交配型进行检测,结果表明PCR 测定与GUY11/KA3测定结果基本一致,说明了PCR方法可较准确、快速、 简便地检测稻瘟病菌的交配型,特别是可以测知不育菌株的交配型。 毒性测定和rep-PCR DNA指纹分析结果表明,81278ZB15和GUY11 二个菌株的毒性谱和遗传多态性差异很大。用其作亲本杂交,建立一个随 机的有性后代群体,并对其进行了交配型、无毒基因的遗传分析。 分别用GUY11/KA3和PCR方法测定随机分离的90个单子囊孢子后 代的交配型,结果表明MAT1-1:MAT1-2分别是62:21(GUY11/KA3)和 62:28(PCR),均不符合1:1的期望分离比例。 用已知含单一抗性基因的C101LAC Pi-1、C101A51 Pi-2、C104PKT Pi-3、C101PKT Pi-4a、C105TTP-4L-23 Pi-4b和Co39 6个近等基因系品种 对亲本菌株进行毒性分析的结果表明,81278ZB15含Avr-Pi1、Avr-Pi2、 Avr-Pi4a和Avr-Pi4b无毒基因,而GUY11只含Avr-Pi4b。进一步对其72 个有性后代进行毒性分析的结果表明,后代在C101LAC Pi-1、C101A51 Pi-2 和C101PKT Pi-4a上的无毒、有毒分离比例符合1:1,有8个后代个体发生 了这三个无毒位点的重组。因此,推断81278ZB15对这三个品种的无毒性 是由三个不同的单一位点控制的,且三个位点紧密连锁。 采用rep-PCR法比较了亲本及有性后代的DNA指纹,获得了1个与 三个无毒位点紧密连锁的、大小约为1.8kb的标记基因(RPF1.8),Mapmaker (version 3.0)分析结果表明RPF1.8与Avr-Pi1、Avr-Pi2、Avr-Pi4a的遗传 福建农林大学硕士学位论文2 距离分别为 5.gCM、2.ZCM、2.ZCM。 研究结果中还出现两亲本对C104PKT Pil、CO39有毒,后代中却出 现对其无毒的个体。两亲本对山 05TTP-4L《3 Pi-4b无毒,后代中却出现 对其有毒的个体,本文对其中可能的原因进行了初步探讨。


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