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厚荚相思离体快繁技术的研究

马钟丽  
【摘要】:厚荚相思是近年来我国南方引进的主要营林树种之一,它具有适应性强、速生丰产、改良土壤、用途广泛等特点。目前,厚荚相思优良种苗供应不足,无法满足营林生产的需求,而利用离体快繁技术实现厚荚相思工厂化育苗是解决此问题的一条较佳途径。因此,本试验以厚荚相思半同胞良种66和29为试材,针对厚荚相思离体快繁体系,从良种无菌萌发、无菌苗继代培养、试管苗生根诱导、生根苗炼苗移栽直到移植成活的各个环节展开研究,探讨各个环节的较佳培养基及技术关键,分析在培养过程中玻璃化现象产生的影响因素,并从叶细胞超微结构入手分析玻璃化苗叶细胞超微结构与正常组培苗的差异,进而全面优化厚荚相思离体快速繁殖体系,为实现厚荚相思高效工厂化育苗提供必要的理论基础。 1.本试验筛选出了厚荚相思良种无菌萌发过程中的较佳实验处理,依次是预处理方式Y_5:用沸水浸泡种子20min后到去水,再重复两次用沸水浸泡20min→消毒方式X_2:先75%的酒精浸泡30s,再6%次氯酸钠溶液浸泡8-15min,再0.1%升汞浸泡3-6min,最后无菌水冲洗4遍→接种方式J_2:种子的胚芽端向下接种;采用培养基形式S_4:浅层液体培养基形式(下层为固体培养基MS+活性碳1.0g/L,上层为液体培养基MS)。 2.通过分析厚荚66无菌苗在第一次继代培养基C_1-C_9上的生长状况,筛选并预测出较佳培养基C_10:改良MS(NH_4NO_31000mg/L)+NAA0.4mg/L+IAA0.05mg/L。厚荚66和厚荚29两个家系无菌苗在培养基C_10的生长状况,证实培养基C_10是第一次继代培养的较佳培养基。通过比较无菌萌发不同时间的厚荚66无菌苗在培养基C_10中的生长情况,发现萌发30d的无菌苗是第一次继代的较佳材料。 3.将培养基C_10中的厚荚66一代试管苗转接到第二次继代培养基D_1-D_8中,筛选出较佳培养基D_8:改良MS(NH_4NO_31000mg/L)+BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.4mg/L+活性碳2.0g/L+蔗糖40g/L。试验发现采用培养基C_10和培养基D_8交替培养的继代方式继代效果较佳。 4.将厚荚66无根试管苗接种在诱导生根培养基G_1-G_8中进行生根诱导,筛选并预测出较佳培养基G_9:1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖10g/L。厚荚66和厚荚29在培养基G_9生根状况,证实培养基G_9是诱导生根的较佳培养基。不同继代次数的厚荚66在培养基G_9的生长状况说明,随着继代次数的增加,诱导生根的难度增大;从培养基C_10继代来的试管苗比来源为培养基D_8的试管苗更易诱导生根。 5.相对于田园土基质、木屑基质,成分为细沙:田园土:蛭石=1:1:1的基质是厚荚相思生根苗的最佳移栽基质,生根诱导培养21-28d的厚荚相思试管苗移栽后成活率较高,效果较好。 6.厚荚相思玻璃化现象中,BA对玻璃化率的影响最显著,BA浓度越高玻璃化率越高。KNO_3在0~2000mg/L范围内,浓度越高玻璃化率越高,为3000mg/L时,


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