石仙桃多糖及乙酸乙酯提取物化学成分的研究

【摘要】： 药用植物石仙桃为兰科石仙桃属植物,其药用部位假鳞茎或全草具有多种药用价值,然而目前有关其有效成分的研究甚少。国内外尚未出现有关石仙桃多糖的研究报道。本文主要对石仙桃多糖的提取、结构、性质及抗氧化活性进行探讨,并对石仙桃乙酸乙酯提取物进行初步分离和分析。结果如下: 1、在研究不同提取条件对多糖提取率的影响的基础上,采用正交试验优化石仙桃多糖的提取条件。得到石仙桃多糖的最佳提取条件为:浸提温度为80℃,浸提时间为5h,料液比(V∶V)为1∶40,最佳提取率为2.25%。比较了盐析法和Sevag法两种除蛋白方法。结果表明,盐析法较Sevag效果好,且更经济。 2、测定了石仙桃的总糖含量,得知石仙桃总糖含量为3.352%。采用高效凝胶渗透色谱法测定了石仙桃多糖的分子量,其平均分子量为45200 D。用乌氏黏度计测定了石仙桃多糖的特性黏度,为1.55 mL/g。 采用超滤技术分离不同分子量大小的石仙桃多糖,并分别测定了它们的特性黏度,结果表明,多糖的特性黏度随着分子量的减小而减小。 3、采用2 mol/L三氟乙酸封管水解石仙桃多糖,TLC及HPLC分析反应了不同时间(1h,2h,3h,4h,5h,6h,7h,8h)后的降解物,分析了降解时间对降解物的影响。由结果可知,降解时间对降解物有一定影响,体现在:降解物在硅胶板上的斑点逐渐上行至R_f为0.6处,且最终呈现一个斑点;在高效凝胶色谱图中的出峰时间逐渐推迟,6h后基本不再发生变化。经HPLC、IR及NMR分析,结果表明,石仙桃多糖主要由甘露糖通过α-1,4-糖苷键聚合而成。 4、分别利用Fenton体系、邻苯三酚自氧化法产生·OH及·O_2~-,研究了石仙桃多糖的抗氧化活性。结果显示石仙桃多糖具有较好的抗氧化活性,抗氧化能力随浓度增大而增强;粗多糖的清除自由基能力大于脱蛋白多糖;二者的清除自由基能力均大于或与Vc相当。 5、石仙桃化学成分预试验结果表明,石仙桃水溶液含有糖、氨基酸、蛋白质、酚类、鞣质、强心苷、甾体、萜类、有机酸、皂苷。 TLC分析乙酸乙酯提取物,结果显示,展开剂为环己烷:四氯化碳:乙酸乙酯=1∶1∶1时,展开显色后得到6个点,而且分离效果最好。 乙酸乙酯提取物经过硅胶柱层析分析后,得到一个白色结晶,IR图谱分析表明,其结构中可能含有-OH和-COOH。此外,经薄层层析鉴定合并的28-63部分分离得到三个组分,64-68合并部分分离得到两个较纯的物质。 乙酸乙酯提取物经过薄层层析展开、HPLC分析后,A斑点分离得到四个组分,B斑点分离得到六个组分。