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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的差异蛋白组学研究

王娜  
【摘要】: 2006年5月,在我国的江西省首先发生了猪“高热病”,随后蔓延至全国。该传染病具有发病地区多、流行范围广、死亡率极高等特点,致使200多万头猪受到感染,40多万头猪死亡,给我国养猪业造成了巨大的损失。该病于7月份在福建省出现,并迅速传播。我们实验室收集了来自疑似发生了“高热病”的不同猪场病料,进行了病毒分离和鉴定,运用RT-PCR技术检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)。 利用双向电泳技术对体外培养的猪繁殖与呼吸综合征病毒071030株和福州株进行接种正常Marc-145细胞产生的蛋白质表达差异,寻找与毒力相关的蛋白质。将071030株和福州株接种正常Marc-145细胞于37℃、5%CO2的环境中培养72 h,从细胞中获得蛋白。第一向电泳用pH3-10非线性IPG胶条进行等电聚焦,第二向电泳用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白,经过银染,图像扫描后,利用软件分析处理图像。在正常Marc-145细胞、接种071030株和福州株的细胞的蛋白质图谱中分别检测出188、252、286个蛋白质点,它们的蛋白质分子质量分布基本相似;在所检测到的差异蛋白质点中,其中有12个蛋白质点共存在于正常细胞和接种福州株细胞中,有2个蛋白质点共存在于正常细胞和接种071030株细胞中,有1个蛋白质点只存在于接种福州株细胞中,有3个蛋白质点只存在接种071030株细胞中,而接种071030株和福州株的细胞共有9个蛋白质点,这些蛋白质点表达量都相差达2倍以上。这为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机理提供了蛋白质组学方面的信息。


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