收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

辣椒遗传转化体系的构建及其在CabZip2、CaLRR、CaP等候选基因RNAi载体遗传转化中的应用

黄振  
【摘要】: 辣椒(Capsicum annuum L)是我国乃至全世界广泛栽培、十分重要的一种茄科蔬菜,其遗传改良是生产中确保产量、品质和效益的重要基础。但是,常规的辣椒育种周期长、效率低,且容易导致栽培品种或组合遗传背景日趋狭窄,难以满足需要。而现代基因工程由于其可实现跨物种的基因交流,可实现作物性状的定向遗传改良而受到人们的高度重视,基因工程与常规育种的有机结合被认为是现代育种的有效手段。遗传转化体系是实现基因工程的重要基础,同时也是植物功能基因组学研究的重要手段。但是,当前辣椒转基因体系还不完善,效率不高且存在明显的基因型依赖性。本文研究建立了辣椒离体培养再生体系和农杆菌转化体系,应用该体系进行了几个载体的遗传转化。主要结果如下: 1辣椒离体再生体系的建立:14d左右的苗龄辣椒无菌苗的子叶和茎尖是组织培养的最佳外植体;建立以辣椒子叶和茎尖为外植体的丛生芽直接诱导体系,在分化培养基中,添加BA和NAA有利于丛生芽的诱导,但NAA过高则易产生根。添加OD600值为1.1的PJ 4ml/L的有利于辣椒的分化。本研究中最适合的诱导培养基为MS+ BA 5mg/L+ NAA 0.1mg/L+ AgNO3 4mg/L+ PJ 4ml/L;不同基因型辣椒子叶和茎尖的丛生芽诱导率有显著差异;0.5mg/L GA3有利于辣椒丛生芽的伸长,高于此浓度易产生畸形芽;通过筛选确定最佳辣椒生根培养基为:1/2 MS+ NAA 0.1mg/L+ IAA 0.1mg/L; 2辣椒遗传转化体系的建立及应用:辣椒遗传转化试验表明:辣椒的卡那霉素致死浓度可以达到70mg/L;辣椒子叶遗传转化的最佳条件:辣椒子叶必须预培养2d左右,用含有AS浓度200μmol/L的OD600值约0.6的菌液浓度浸泡8min,共培养2d后进行洗菌,筛选培养;通过对比确定辣椒转化体系中生根培养基中应添加头孢霉素来抑制农杆菌生长。应用所构建的辣椒离体再生和农杆菌介导的遗传转化体系,对CabZip2、CaLRR、CaP等几个RNAi载体进行了遗传转化,其中CabZip2载体获得了8个转化克隆,CaLRR载体获得了15个转化克隆,CaP载体获得了19个克隆,转化效率分别为1.67%、3.13%、2.35%,所获得抗性再生植株的中PCR阳性转基因植株所占的比例分别为25%、33%、21.05%。 以上结果表明,所构建的辣椒离体再生和遗传转化体系的转化效率较高,可用于辣椒基因工程遗传改良或功能基因组学研究,所获得的转基因植株为进一步开展CabZip2、CaLRR、CaP等基因的功能分析奠定了重要的基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 ;湖南辣椒品种资源的初步研究[J];湖南农业科学;1979年03期
2 张丰洁;;中晚熟辣椒新秀——雷阳大辣椒[J];蔬菜;1993年01期
3 ;甘肃省三个优质辣椒品种的特征特性及栽培技术[J];农业科技与信息;2002年02期
4 王怀松;贺超兴;张志斌;;奥运蔬菜品种引进与栽培(二) 匈牙利番茄与甜辣椒品种的引种栽培[J];北京农业;2006年07期
5 马怀滨;;秦州区航天辣椒栽培技术[J];甘肃农业;2008年07期
6 王用楫;;流行性乙型脑炎组织培养中和试验方法研究[J];微生物学报;1975年01期
7 周希澄;张加宝;;棉花雌蕊组织培养出现真叶[J];河南农业科学;1980年12期
8 吴昭平;詹雪娇;卢丽芬;;香子兰组织培养繁殖初报[J];亚热带植物科学;1982年02期
9 周志坚;翟应昌;李倘弟;;马占相思的组织培养[J];植物生理学通讯;1983年03期
10 刘敏;舒金生;;景天、白兰花和雪松的组织培养[J];植物生理学通讯;1983年06期
11 马凤桐;刘玉荣;;成龄桑树冬芽的组织培养[J];植物生理学通讯;1985年01期
12 黄济民;;国际遗传会上我国有关花卉研究成果[J];中国园林;1985年01期
13 王宇清;罗翠娥;;甜菜的组织培养[J];中国甜菜糖业;1986年03期
14 徐龙珠;;甘薯组织培养初报[J];河南农业科学;1986年10期
15 周祖富;程仕品;;洒金榕茎段的组织培养[J];广西农业生物科学;1988年04期
16 赵士华;;刚果12号桉和剥粒菠萝的组织培养与快速繁殖[J];植物生理学通讯;1988年04期
17 孙志华;王玉珍;;珍珠瓜组织培养[J];植物生理学通讯;1988年05期
18 张立钦,李传道;用组织培养方法鉴别植物的抗病性[J];浙江林学院学报;1989年03期
19 罗璇;王克平;刘四军;;硷茅的组织培养初报[J];中国草地学报;1990年04期
20 梅贝坚;艾华;;花叶良姜的组织培养[J];植物生理学通讯;1990年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 尹淑萍;王平;孟凡红;;扶芳藤的组织培养和快速繁殖的研究[A];植物组织培养与脱毒快繁技术——全国植物组培、脱毒快繁及工厂化生产技术学术研讨会论文集[C];2001年
2 汤洁;;切花月季的组织培养和快速繁殖[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
3 王苏珂;李秀根;杨健;王龙;;西洋梨矮化砧木BA-29的组织培养和快速繁殖技术研究[A];梨科研与生产进展(五)[C];2011年
4 孙晓荣;孙晓伟;陈伟;;八仙花的组织培养与快速繁殖[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(上册)[C];2002年
5 张粉粉;谢古珍;曹先彬;;生物技术在香料植物中的应用和发展[A];2002年中国香料香精学术研讨会论文集[C];2002年
6 廖玮玮;伍旭东;蒋美艳;王妍;;苎麻组织培养及其倍性育种研究进展[A];2009中国草原发展论坛论文集[C];2009年
7 林治良;王长春;林翰;魏文麟;;不同激素在无籽西瓜组培中的效应[A];中国科学技术协会第二届青年学术年会园艺学论文集[C];1995年
8 王姝杰;张成武;闫淑珍;李世访;;苜蓿组织培养及遗传转化的研究进展[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第六次学术交流会论文集[C];2004年
9 廖飞雄;王碧青;;加入WTO后中国花卉组织培养产业发展的对策[A];花卉研究20年——广东省农业科学院花卉研究所建所20周年论文选集(1984-2004)[C];2004年
10 曹蕾;涂淑萍;;圆齿野鸦椿愈伤组织诱导研究[A];中国观赏园艺研究进展2008——中国园艺学会观赏园艺专业委员会2008年学术年会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邓明华;辣椒胞质雄性不育的分子生理机制及亲缘关系研究[D];中南大学;2011年
2 隋益虎;辣椒紫色性状遗传分析、相关基因克隆和种间杂种创制[D];南京农业大学;2011年
3 黄炜;辣椒核雄性不育两用系创制及其不育机理研究[D];西北农林科技大学;2012年
4 邓小梅;乐东拟单性木兰、华木莲、红叶石楠‘红罗宾’的组织培养及快繁技术研究[D];南京林业大学;2004年
5 周茂娟;地面覆盖和水分对温室辣椒生理特性及土壤环境的影响[D];西北农林科技大学;2010年
6 贾庆利;辣椒与黄瓜抗疫病相关基因克隆及分析[D];西北农林科技大学;2012年
7 陈天子;基于组织培养和授粉后浸蘸花柱的两种棉花遗传转化体系的建立[D];南京农业大学;2009年
8 张小猛;Nipradilol对视网膜神经节细胞保护作用的研究[D];吉林大学;2004年
9 张彦妮;复叶槭组织培养再生体系建立及其遗传转化初步研究[D];东北林业大学;2005年
10 詹亚光;白桦的组织培养和遗传转化研究[D];东北林业大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张晓霞;京西葛组织培养及快速繁殖体系建立的研究[D];北京林业大学;2010年
2 张元国;蝴蝶兰组织培养快繁技术的优化[D];中国农业大学;2005年
3 马兰珍;杂交松组培快繁技术研究[D];广西大学;2005年
4 程冉;文冠果的引种、快繁及优质丰产栽培技术体系研究[D];山东农业大学;2004年
5 张华通;迷迭香组织培养和扦插繁殖工厂化育苗技术研究[D];南京林业大学;2005年
6 孟庆敏;复叶槭组织培养再生体系的建立[D];东北林业大学;2006年
7 王佩香;药用植物绞股蓝Gynostemma pentaphyllum (Thunb.)Makino的GAP相关技术研究[D];陕西师范大学;2005年
8 郑柱;马蹄莲和彩色马蹄莲快繁体系的构建和优化研究[D];四川师范大学;2009年
9 袁迎燕;毛蕊铁线莲组织培养与植株再生研究[D];四川农业大学;2010年
10 谷凤;文心兰组培快繁技术的研究[D];安徽农业大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张琳琳;辣椒品种丰椒一号[N];农民日报;2003年
2 唐山市滦南县农业服务中心 韩丽敏;播种到定植,辣椒咋打理?[N];河北农民报;2010年
3 ;辣椒品种——三盛104[N];山西科技报;2004年
4 任振宇 夏继锋;淅川县将建“世界辣椒园”[N];农民日报;2011年
5 本报记者 赵勇军 实习生 曾霞;黔椒魅力凸显[N];贵州日报;2011年
6 温义昌;辣椒品种介绍[N];农民日报;2003年
7 周锋荣 涂晓斌;火辣辣的美好生活[N];中国城乡金融报;2011年
8 本报记者 刘宏奇 葛和新 王世停 本报通讯员 赵洪涛 贺新强;淮安土辣椒是怎样“红”遍全国的[N];新华日报;2011年
9 本报记者 周元元 卢彬;谢文钧的点“椒”成金术[N];南宁日报;2011年
10 郑顺 温选鹏 本报记者 盛燕芳;“丰”产的辣椒 “收”获的致富路[N];眉山日报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978