收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

抗伏马菌素B_1单链抗体的制备

刘晓雷  
【摘要】: 伏马菌素是由串珠镰刀菌产生的一类能广泛污染粮食及其制品的真菌毒素,具有多种毒性,对人和动物健康产生严重威胁。本研究旨在为建立一种基于基因工程单链抗体的检测伏马菌素B1的方法提供前期基础,以便最终快速有效地检测粮食和饲料中FB1的含量。 本研究以购买的伏马菌素B1纯品为基础,由于FB1是小分子半抗原,所以需要将其与大分子载体蛋白交联才能成为完全抗原。分别利用戊二醛一步法和二步法将伏马菌素B1与BSA和KLH两种载体蛋白偶联起来,制备得到FB1-BSA和FB1-KLH两种人工抗原,FB1-BSA作为免疫抗原,FB1-KLH作为检测抗原。抗血清效价测定结果证明这两种抗原均制备成功。 用FB1-BSA免疫Balb/c小鼠,加强免疫后测定免疫小鼠抗血清效价,ELISA测定结果显示效价达到要求。处死并解剖小鼠后,取脾脏提取总RNA,反转录获得cDNA第一链,以其为模板进行PCR扩增得到抗体重链可变区和轻链可变区基因(VH, VL),然后进行组装和扩增得到单链抗体基因。将scFv基因克隆到噬菌体载体pCANTAB 5E上后,构建噬菌体抗体库,然后经过噬菌体表面展示技术进行淘选得到了一株可产生较高亲和力scFv的噬菌体单链抗体株,并进行了scFv的可溶性表达和鉴定。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 尹惠琼;单链抗体的研究进展[J];动物医学进展;2003年02期
2 马亚敏;;Genex公司宣布一种新的抗体设计[J];生物技术通报;1987年06期
3 任锐;王艳伟;吕雪峰;;单链抗体在兽医上的应用前景[J];兽医导刊;2010年12期
4 李研东;宫彬彬;柳增善;韩雪;李菲;;单链抗体的制备及其应用[J];中国饲料;2009年13期
5 刘志刚,俞炜源,林建波;人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体的体外分子进化[J];遗传学报;2002年01期
6 付建芳,黄威权,夏永娟,杨安钢;抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体单链抗体ScFv的构建和表达[J];中国免疫学杂志;2005年10期
7 张晓华;戴玲芬;戴和平;;抗对虾白斑综合症病毒的单链抗体A1的表达和生物化学特性[J];水生生物学报;2006年02期
8 孟辉;温凯;沈建忠;王战辉;张素霞;;抗庆大霉素噬菌体抗体库的构建和筛选[J];中国畜牧兽医;2011年01期
9 代鹏;周广青;马军武;;单链抗体的表达[J];生物技术通报;2011年10期
10 尹继刚,张西臣,朱平,张国利,李建华,何宏轩,田宗成,杨举;抗隐孢子虫子孢子表膜单链抗体基因的克隆和核苷酸序列分析[J];中国兽医学报;2003年02期
11 李月红,张国力,岳玉环,邱叶峰,李树民,吴广谋,朱平;抗ICAM-1单链抗体基因的克隆及序列分析[J];中国兽医学报;2004年06期
12 潘科;王弘;张宏斌;王捷;雷红涛;杨金易;孙远明;;抗克伦特罗噬菌体单链抗体库的构建、筛选及鉴定[J];华南理工大学学报(自然科学版);2005年11期
13 庄振宏;李兰;孙宪连;张新艳;单超;汪世华;王宗华;;抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选[J];热带作物学报;2009年01期
14 张颖;侯化鹏;王海瑞;白莉雅;杨利国;;生长抑素噬菌体展示鼠源单链抗体库的构建与鉴定[J];农业生物技术学报;2009年03期
15 周玄;吴聪明;沈建忠;张素霞;张艳蓉;;抗己烯雌酚噬菌体单链抗体库的构建[J];中国兽医科学;2009年07期
16 郑志明;金社胜;肖希龙;候晓林;;抗诺氟沙星噬菌体单链抗体库的构建与筛选[J];动物医学进展;2010年S1期
17 周艳红;祭芳;丁衬衬;史建荣;;抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇噬菌体单链抗体库的构建与鉴定[J];江苏农业学报;2010年05期
18 李铁军;李德全;;抗速灭威噬菌体单链抗体库的构建、筛选及鉴定[J];湖北农业科学;2011年09期
19 于颖;王刚;宋腾飞;孔宁;马晓春;姚永红;肖一红;周恩民;;PRRSV GP5蛋白抗独特型单链抗体的构建表达及鉴定[J];中国预防兽医学报;2011年06期
20 赵俊;童德文;李立;刘文明;邢明辉;;单链抗体及其在肿瘤诊断和治疗中应用研究进展[J];动物医学进展;2006年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王长军;唐家琪;李先富;潘秀珍;操敏;;抗人红细胞血型抗原噬菌体单链抗体的研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
2 王洪利;舒建昌;;单链抗体在肝脏疾病中应用的研究进展[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
3 孙娜娜;王欲晓;周丽君;王刚;;人源性抗大疱性类天疱疮抗原BP180-NC16A单链抗体的构建及表达[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年
4 张惠中;;细胞内生成的抗整合酶单链抗体阻断HIV-1复制的实验研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
5 王欲晓;乔媛媛;周丽君;;人源性抗蓖麻单链抗体的分离纯化和活性鉴定[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
6 汪世华;胡开辉;杨燕凌;邱君志;;基因工程单链抗体研究[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年
7 林志伟;汪世华;王宗华;;抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单链抗体(DON-ScFv)在枯草芽孢杆菌中高效表达与分泌[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
8 杨燕凌;;酶(蛋白)融合技术研究[A];华东地区农学会学术年会暨福建省科协第七届学术年会农业分会场论文集[C];2007年
9 陈立;宋今丹;;抗人大肠癌重组单链抗体的研制[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
10 汤永民;宁铂涛;曹江;沈红强;钱柏芹;张海忠;张怡;郭莉;;抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体真核表达载体的构建、表达及鉴定[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨炼;抗黄曲霉毒素B_1的单链抗体的筛选、表达和改造[D];江南大学;2010年
2 胡学军;抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)单链抗体基因克隆及其在大肠杆菌和烟草中的表达[D];大连理工大学;2002年
3 田媛;前列腺癌细胞结合单链抗体的筛选、表达纯 化及其功能初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
4 李月红;抗ICAM-1单克隆抗体与单链抗体的制备及其生物学特性研究[D];吉林大学;2005年
5 陈德宇;前列腺素D合成酶在男性生殖中的基础及应用研究[D];南京师范大学;2005年
6 熊盛;重组人源抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中的表达、纯化与性质鉴定[D];华南理工大学;2002年
7 邵长利;抗人红细胞单链抗体融合HIV-1gp41抗原肽双功能分子的制备与鉴定[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
8 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年
9 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
10 付建芳;溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗的研究[D];第四军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘晓雷;抗伏马菌素B_1单链抗体的制备[D];福建农林大学;2010年
2 徐飞虎;抗肺癌单链抗体偶联绿色荧光蛋白基因的构建及表达研究[D];浙江大学;2003年
3 赵蕾;抗鸡传染性支气管炎病毒单链抗体原核表达质粒的构建及其间接ELISA筛选方法的建立[D];上海交通大学;2011年
4 张薇;抗T-2毒素单链抗体的制备及该毒素对细胞毒性影响的初步研究[D];福建农林大学;2010年
5 王溪桥;大容量人源肝癌核糖体展示单链抗体库的构建[D];兰州大学;2010年
6 江淼;抗活化血小板表面受体全套单链抗体噬菌体展示文库的构建和筛选[D];苏州大学;2003年
7 纪秋野;抗蓖麻毒素单链抗体的构建、表达、纯化及功能测定[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
8 张庆丽;抗EGFRvⅢ特异性单链抗体的构建及其靶向性研究[D];南华大学;2011年
9 于颖;PRRSV GP5蛋白抗独特型单链抗体的构建表达与鉴定[D];山东农业大学;2011年
10 刘海荣;丁香假单胞菌极毛蛋白HrpA的克隆表达与单链抗体的制备[D];福建农林大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前8条
1 北京市医疗器械检验所 康娟 刘毅;临床检测仪器新面孔[N];健康报;2010年
2 本报记者 李建荣;雏鹰展翅向蓝天[N];大众科技报;2011年
3 曹勇;方兴未艾的药物释放领域[N];中国医药报;2002年
4 ;虽是配角,也唱得红红火火[N];医药经济报;2000年
5 姜卯生;四军医大颌骨肿瘤研究获成果[N];中国医药报;2002年
6 蔡忠仁;我国海洋生物毒素检测技术获突破[N];中国海洋报;2010年
7 中国医学科学院医药生物技术研究所研究员 邵荣光;高效小型化唱主角[N];健康报;2010年
8 记者 李天舒;抗狂犬病毒人源抗体制备成功[N];健康报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978