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磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条的研制

曹爽  
【摘要】:磺胺类药物是一种重要的广谱抑菌剂,在兽医临床上使用最广,可以预防和控制畜禽疾病,长时间使用会使其在动物体内累积,形成药物残留,对人体的健康造成危害。目前,动物源性食品中磺胺药的残留是国内外食品卫生标准检测的重点项目,主要通过色谱法检测,但操作复杂,因此,建立快速、简单的检测磺胺药物的方法具有重要的应用价值。胶体金免疫层析技术有操作简单,方便快捷,无需大型仪器,结果判断直观等优点,适用于大批量样品的初步筛选,有广阔的应用前景,因此,本实验采用胶体金免疫层析技术,对磺胺药物多残留检测试纸条进行了系统的研究,旨在建立一种快速检测磺胺药物残留的方法。实验用柠檬酸三钠作为还原剂制备胶体金,经质量鉴定后标记单克隆抗体,并将胶体金标记的抗体喷涂在玻璃纤维垫上,将人工抗原、羊抗鼠Ig G包被在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成快速检测试纸条。优化条件为:选择最大吸收峰为525 nm的胶体金,金标垫选择GL0194,样品垫选择GL-b04,硝酸纤维素膜选择SS24,抗原稀释液选择0.02 mol/L p H7.4 PBS,抗原包被浓度为0.05 mg/m L,羊抗鼠Ig G包被浓度为0.8 mg/m L,胶体金标记抗体稀释倍数为1:15。试纸条检测磺胺类药物,SMD、SM1、SM2、SMM、SD、SDM、SMP、SPD八种药物的方法检出限分别为10μg/L、10μg/L、10μg/L、10μg/L、20μg/L、20μg/L、20μg/L、20μg/L,试纸条的特异性、重复性、稳定性良好。以猪肉、鱼肉、牛奶作为实际样品(经LC-MS检测为阴性样品)进行磺胺药物标准品添加回收实验,样品前处理后,用试纸条检测,对于加标浓度超出国家限量(100μg/kg)要求的样品可以检出,样品前处理方法可行,研制的磺胺多残留试纸条具有实用价值。


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