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银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾小管上皮—间充质细胞转分化的影响与机制研究

郑欣  
【摘要】:目的:探讨银杏叶提取物通过抑制氧化应激反应,保护糖尿病大鼠肾小管上皮细胞免受氧化应激的损伤,从而抑制肾小管上皮-间充质细胞转分化,减少细胞外基质的沉积,延缓和逆转肾间质纤维化的可能机制。 方法:腹腔一次性注射STZ造糖尿病大鼠模型,给予不同剂量的GBE腹腔注射干预,每天给药一次。8周后,处死大鼠,测定空腹血糖、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24h尿蛋白量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD)、丙二醛(malondialdehyde ,MDA)的含量。HE、PAS及MASSON染色切片观察肾组织病理变化,免疫组化观察肾组织α-SMA(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达,Western Blot检测I型胶原(typeⅠcollagen ,Col I)蛋白表达水平。 结果:(1)与对照组相比,模型组的空腹血糖、血肌酐、尿素氮和24h尿蛋白量明显升高,且都有显著性差异(P0.01),表明造模成功。与模型组相比,GBE低剂量治疗组血肌酐、尿素氮与24h尿蛋白量有差异(P0.05),空腹血糖下降不明显,GBE中、高剂量治疗组空腹血糖、血肌酐、尿素氮和24h尿蛋白则显著降低(P0.01)。(2)与对照组相比,模型组大鼠肾组织SOD活力显著性降低(P0.05),MDA含量显著性提高(P0.05)。GBE低剂量组的SOD活性与模型组有显著性提高(P0.05),GBE中、高剂量组SOD活力得到进一步提高(P0.01), GBE低、中剂量组的MDA含量与模型组相比有显著降低(P0.05),GBE高剂量组MDA含量得到进一步降低(P0.01)。(3)模型组大鼠肾组织炎症细胞浸润、小管扩张、间质纤维化,与对照组相比,肾小管-间质损伤指数明显升高(P0.01),肾小管间质胶原相对面积显著增大(P0.01)。GBE中、高剂量组肾小管间质损伤明显减轻,肾小管间质胶原相对面积明显减少(P0.01)。(4)模型组大鼠肾组织的α-SMA表达显著上调(P0.01),与模型组比较,GBE低剂量组α-SMA的表达也有所降低(P0.05),GBE中、高剂量组大鼠肾组织a-SMA的表达明显减少(P0.01)(,5)模型组大鼠Col I蛋白表达水平明显升高(P0.01)。与模型组相比,GBE低剂量治疗组Col I蛋白的表达水平明显降低(P0.05),GBE中、高剂量治疗组Col I蛋白的表达量则进一步降低(P0.01)。 结论: 1. GBE可降低糖尿病大鼠的血糖水平、血肌酐、尿素氮和24h尿蛋白,改善大鼠肾功能。 2.糖尿病大鼠存在氧化应激,GBE可降低糖尿病大鼠肾组织中MDA含量,提高SOD活力,抑制氧化应激反应。 3. GBE可减少成肌纤维细胞的标志性蛋白—α-SMA的表达,减少细胞外基质成分的沉积,抑制EMT的发生,延缓和改善肾间质纤维化。


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