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脂肪间充质干细胞对野百合碱诱发的大鼠肺动脉重构的影响

谢镇国  
【摘要】:目的: 探讨脂肪间充质干细胞(ADMSC)移植治疗对野百合碱诱发的大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响。 方法: 取SD大鼠腹股沟皮下脂肪,胶原酶消化法分离培养ADMSC,移植前用带GFP的腺病毒转染标记。雄性Sprague-Dawley大鼠90只,随机均分为三组,每组30只:正常对照组(Ctr)、肺动脉高压组(PAH)、脂肪间充质干细胞治疗组(ADMSC)。PAH组和ADMSC组一次性腹腔注射MCT40mg/Kg,Ctr组经腹腔注射相同体积的生理盐水,两周后ADMSC组经左颈外静脉一次性给予ADMSC 10~6/1ml,Ctr组和PAH组经左颈外静脉一次性给予1ml的生理盐水。分别于ADMSC移植后1W、2W、3W,右心导管法测定大鼠的肺动脉平均压(MPAP)、右心室肥厚指数[RVHI%=右心室游离壁(RV)重量/左心室+室间隔(LV+S)重量]、并运用ipp6.0图像分析软件分析肺组织切片,测定直径在100-200μm范围的肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT%)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%)。荧光显微镜观察带GFP标记的ADMSC在肺内的定植。 结果: (1)ADMSC治疗后1W,2W,3W,三个时间点,每一个时间点,PAH组大鼠与正常组相比,大鼠的MPAP和RVHI%均高于Ctr组[MPAP(mmHg): (24.53±2.90) VS (14.81±1.95),(33.18±2.30)VS(15.08±2.35),(36.38±3.28)VS(15.65±2.27);RVHI%:(41.01±1.29)VS(28.25±2.15),(48.75±2.13)VS(28.71±2.08),(50.52±1.49)VS(28.54±2.19);P均0.05]。而经ADMSC治疗后,MPAP和RVHI%较PAH组下降[MPAP(mmHg): (18.63±2.15) VS(24.53±2.90),(23.07±2.84)VS(33.18±2.30),(22.98±2.34)VS(36.38±3.28);RVHI%:(36.21±4.27)VS(41.01±1.29),(39.47±4.02)VS(48.75±2.13), (41.02±0.93)VS(50.52±1.49);P均0.05]。 (2)ADMSC治疗后1W,2W,3W,三个时间点,每一个时间点,PAH组大鼠与正常组相比,大鼠的WA%和WT%均明显高于Ctr组[WA%: (68.70±3.43) VS(50.27±4.92),(80.48±6.19)VS(51.61±3.29),(84.01±2.76)VS(52.02±5.87);WT%:(46.09±4.70)VS(32.46±5.19),(57.26±4.32)VS(32.52±3.19),(64.64±3.86)VS(31.42±4.53);P均0.05]。而经ADMSC治疗后,WA%和WT%均较PAH组下降[WA%:(58.23±4.08) VS(68.70±3.43),(62.97±6.58)VS(80.48±6.19),(65.27±5.45)VS(84.01±2.76);WT%:(38.06±4.15)VS(46.09±4.70),(40.91±5.24)VS(57.26±4.32), (41.91±5.16)VS(64.64±3.86);P均0.05]。 (3)与ADMSC治疗后1W比,ADMSC治疗后2W、3W,治疗组大鼠的MPAP、RVHI%、WA %和WT %均高[MPAP ( mmHg ):( 23.07±2.84 )、( 22.98±2.34 ) VS (18.63±2.15);RVHI%:(39.47±4.02)、(41.02±0.93)VS(36.21±4.27);WA%:(62.97±6.58)、(65.27±5.45)VS (58.23±4.08) ;WT%:(40.91±5.24)、(41.91±5.16)VS(38.06±4.15);P均0.05]。ADMSC治疗后2W与ADMSC治疗后3W相比,治疗组大鼠的MPAP、RVHI%、WA%和WT%没有统计学意义[MPAP(mmHg):(23.07±2.84)VS(22.98±2.34);RVHI%:(39.47±4.02)VS(41.02±0.93);WA%:(62.97±6.58)VS(65.27±5.45);WT%:(40.91±5.24)VS(41.91±5.16);P均0.05]。 (4)荧光显微镜观察到GFP标记的ADMSC在肺内的定植。 结论:ADMSC可以有效地降低野百合碱诱发的肺动脉高压大鼠的肺动脉压力,减轻右心室肥厚,改善肺小动脉的重构;ADMSC治疗1W时,仅是延缓MCT诱导的肺动脉高压的进展,而ADMSC治疗2W后,其治疗作用达到稳定的水平。


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