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鼠神经生长因子对戊四氮致痫幼鼠海马金属硫蛋白和细胞色素C表达的影响

臧欢欢  
【摘要】:目的 初步分析戊四氮致痫幼鼠海马金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ(MTⅠ/Ⅱ)和细胞色素C(Cyt C)的表达,同时探讨鼠神经生长因子(mNGF)对慢性癫痫幼鼠海马MTⅠ/Ⅱ和Cyt C表达的影响。 方法 50只19日龄SD幼年雄性大鼠,随机分为5组:A组(阴性对照组)、B(阳性对照组)、C~E组(mNGF低、中、高剂量组),每组10只。B组每日腹腔注射戊四氮(PTZ)40mg·kg-1,共21天,C~E组注射PTZ21天后分别每日予mNGF500AU·kg-1、1000AU·kg-1、2000AU·kg-1肌肉注射, A组每日注射等剂量生理盐水。每次用药前称重幼鼠体质量,用药后观察其行为学表现1h。采用实时荧光定量PCR方法检测幼鼠海马组织MTⅠ和Cyt C的mRNA表达,免疫组织化学法检测幼鼠海马组织MTⅠ/Ⅱ和Cyt C的阳性细胞表达。 结果 1.体质量及行为表现:各戊四氮给药组给予戊四氮21天后体质量增长较阴性对照组减慢(P0.01),且饮食、活动减少;予C~E分别给予低、中、高剂量mNGF后,C~E组大鼠体质量增长加快,与A组相比,呈追赶趋势,且饮食、活动逐渐增加。 2.荧光定量PCR法检测MTⅠmRNA,结果显示:B组MTⅠmRNA表达量明显高于A组(P﹤0.01);分别低、中、高剂量mNGF干预后的C、D、E组MTⅠmRNA表达量明显少于B组(P0.0001); C、D、E组两两对比显示:E组MTⅠmRNA表达量明显少于C组(P﹤0.0001)。C组与D组、D组与E组MTⅠmRNA表达差别无统计学意义(P=0.375)。 3、荧光定量PCR法检测Cyt C mRNA,结果显示:B组Cyt C mRNA表达量明显高于A组(P﹤0.01);分别经低、中、高剂量mNGF干预后的C、D、E组Cyt C mRNA表达量明显少于B组(P0.0001)。C、D、E组两两对比显示:D、E组Cyt C mRNA表达量明显少于C组(P﹤0.001),D组与E组Cyt C mRNA表达差别无统计学意义(P=0.768)。 4、免疫组织化学法检测MTⅠ/Ⅱ阳性细胞数,结果显示:B组MTⅠ/Ⅱ阳性细胞数明显多于A组(P0.01);分别经低、中、高剂量mNGF干预后的C、D、E组MTⅠ/Ⅱ阳性细胞数明显少于B组(P0.01); C、D、E组两两对比显示:C组MTⅠ/Ⅱ阳性细胞数明显多于D、E组(P0.0001),D组与E组MTⅠ/Ⅱ阳性细胞数差别无统计学意义(P0.05)。 5、免疫组织化学法检测Cyt C阳性细胞数,结果显示:B组Cyt C阳性细胞数明显多于A组(P0.01);分别经低、中、高剂量mNGF干预后的C、D、E组Cyt C阳性细胞数明显少于B组(P0.01);且C、D、E组两两对比显示:C组Cyt C阳性细胞数明显多于D、E组(P0.0001),D组与E组Cyt C阳性细胞数差别无统计学意义(P0.05)。 结论 1、慢性癫痫后MTⅠ/Ⅱ、Cyt C表达增加。 2.外源性给予NGF对癫痫后的脑组织有保护作用,且脑保护作用的发挥与NGF的剂量有关,具有饱和性。


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