临床蛋白质组学在糖尿病肾病研究中的应用
【摘要】:【目的】糖尿病肾病发病机制至今未完全阐明,有助于早期诊断糖尿病肾病的生物学指标仍然缺乏,如何预测糖尿病肾病的进展也是难题。本研究尝试应用血清蛋白质组学技术,探索糖尿病肾病致病因子,寻找用于早期诊断糖尿病肾病和预测糖尿病肾病病情进展的指标。【方法】入选年龄、性别匹配研究对象分为4组,每组8个人,组A为正常对照组,组B、C、D分别为2型糖尿病尿白蛋白肌酐比(ACR)﹤30mg/g肌酐组、30mg/g肌酐≤ACR﹤300mg/g肌酐组、ACR≥300mg/g肌酐组。收集空腹血清,蛋白定量后每组形成一血清池。去除白蛋白和去盐后,每组以等量蛋白质上样。利用双向电泳进行蛋白质分离后,银染,扫描成像。实验重复3次。应用Image Master 2D Platinum分析软件(GE公司)分析四组之间差异表达的蛋白质点。挖取表达差异蛋白质点,酶解后进行基质辅助激光解附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析,并与Swiss Prot数据库进行匹配鉴定蛋白质。【结果】四组血清经过双向电泳分离、染色、分析后,匹配蛋白点共有2119个。挖取11个差异表达蛋白质点进行质谱分析,成功鉴定其中4个蛋白质点。甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)在组C表达明显增高;前凝血酶原在组D表达明显增高;血红蛋白α亚单位、Igα1链C区段在组D表达明显增高。【结论】临床蛋白质组学可作为糖尿病肾病有效的研究手段。甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2可能参与2型糖尿病肾病的发病或进展。凝血系统异常活化可能参与2型糖尿病肾病的发展。血红蛋白α亚单位、Igα1链C区段对于糖尿病肾病进展至终末期可能有预示作用。
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