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三氧化二砷及胸腺因子D抗乙型肝炎病毒的体外实验

李丹  
【摘要】: 目的:本课题主要是观察三氧化二砷(As_2O_3)、胸腺因子D(TFD)以及干扰素α-2b(IFN_(α-2b))在体外对乙型肝炎病毒是否具有抑制作用,并对其作用的分子机制进行初步探讨。 方法:以HepG2.2.2.15细胞株为模型,应川酶联免疫吸附法(ELISA)观察As_2O_3和TFD在不同浓度、不同作用时间对HepG2.2.2.15细胞培养上清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)水平的影响,计算药物对HBsAg和HBeAg的抑制率。采用四甲基噻唑兰(MTT)比色法测细胞毒性作用,并计算细胞的存活率利治疗指数(TI)。采用DNA斑点杂交技术检测HepG2.2.2.15细胞培养上清中的HBV DNA含量的变化,初步探讨药物作用的分子机制。同时以临床治疗乙肝首选药物IFN_(α-2b)为对照,综合评价As_2O_3和TFD的体外抗HBV效果。 结果:在As_2O_3、TFD以及IFN_(α-2b)的分别作用理,HepG2.2.2.15细胞分泌的HBsAg、HBeAg量减少,并且与药物浓度和作用时间呈正相关。DNA斑点杂交结果显示As_2O_3和IFN_(α-2b)对HBV DNA的抑制呈剂量依赖关系,TFD对HBV DNA则无明显抑制。 结论:As_2O_3、TFD以及IFN_(α-2b)在体外具有较显著的抗HBV作用,As_2O_3和IFN_(α-2b)对HBV的抑制可能是通过抑制HBV DNA的复制来实现,而TFD则可能是作用于病毒的转录、翻译和蛋白合成环节。As_2O_3对HBV的抑制作用较TFD、IFN_(α-2b)更为明显。


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