收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

脐血造血干细胞体外分化为内皮细胞的实验研究

徐建萍  
【摘要】:[目的] 内皮细胞(endothelial cell EC)是血管新生的基础,促进血管新生已经成为当前的研究热点和治疗缺血性疾病的新策略。本研究尝试建立脐血内皮前体细胞体外诱导分化的培养体系,寻找有效的诱导分化因子组合,以证实脐血中存在内皮前体细胞(endothelial cell precursor EPC),探讨人脐血干细胞(Human umbilical cord blood stem cells HCBSCs)用于治疗缺血性疾病的可行性。 [方法] 采用足月妊娠、正常分娩的新鲜脐血,收集单个核细胞(mononuclear cell MNC),应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor–basic bFGF)、胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I IGF-I)的组合,或单独应用植物血球凝集素M型(phytohaemagglutinin PHA M)作为分化诱导因子进行体外培养,在倒置显微镜下动态观察细胞生长分化的情况,应用流式细胞仪检测培养细胞的vWF表达并在电镜下观察内皮细胞特异的Weibel-Palade小体(W-P小体)。 [结果] 从脐血中分离出来的单个核细胞是圆形小细胞,应用VEGF等细胞因子组合诱导分化的实验组在培养24小时后胞体增大,形态也逐渐发生改变,开始呈贴壁生长,第5天即可出现典型的梭形细胞且数量随着培养时间的延长而增加,第14天达到高峰。应用流式细胞仪检测培养细胞的vWF表达率可达到80%以上,电镜观察发现在胞浆中有内皮细胞特异的Weibel-Palade小体。应用PHA诱导分化24小时后细胞聚集成团,培养8天后,即可见到大量典型梭形贴壁细胞生成。应用流式细胞仪检测培养细胞的vWF表达率可达到60%以上,电镜观察也可发现在胞浆中有内皮细胞特异的Weibel-Palade小体。无PHA及VEGF的对照组可见明显的细胞死亡。 [结论] ① 脐血中存在内皮前体细胞,分离得到的单个核细胞能在体外定向诱导分化形成内皮细胞。②VEGF是体外诱导内皮细胞产生的关键因子,应用bFGF和 WP=4 IGF-I不能将脐血单个核细胞诱导分化为内皮细胞,但是bFGF及IGF-I联合应用能与VEGF起协同作用。③证实PHA能诱导脐血单个核细胞分化为内皮细胞,而且能缩短体外诱导分化的时间,但是诱导效率低于细胞因子组。④脐血有望成为治疗缺血性疾病的一种有效的干细胞来源。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 田蔚然;王菲;;传递“生命的火种”:血液中心职工崔爱刚成功捐献造血干细胞[J];人人健康;2011年15期
2 王菲;;吹响今年中华骨髓库分型检测工作的号角[J];人人健康;2011年11期
3 杨便红;王兵;南虹;刘超;邹雅琴;陈煦;;护理干预在外周血造血干细胞采集中的意义[J];中国病案;2011年07期
4 王琦;;胎儿宫内发育迟缓时孕妇及胎儿心钠素的变化及意义[J];中国实用医药;2011年16期
5 黄琳;刘会荟;;造血干细胞移植后免疫重建的研究进展[J];临床和实验医学杂志;2011年14期
6 张建霞;刘文君;;脐血粒系祖细胞发育过程同源盒基因B7的表达及干预[J];实用儿科临床杂志;2011年15期
7 ;新品专区[J];中国卫生产业;2010年03期
8 李军;顾岚;宋国英;张洁;;新生儿疫苗接种前后血汞变化的分析[J];现代中西医结合杂志;2011年26期
9 全宏勋;张宇明;马素好;冯向功;邓爱民;张海林;;牛膝精对辐照小鼠造血干细胞和红系造血祖细胞的影响[J];中国辐射卫生;2011年02期
10 杨玲;许以平;姚苏杭;熊瑛;祝捷;王克敏;;不同刺激物对过敏性哮喘产妇脐血中嗜碱性粒细胞分泌IL-4的影响[J];上海交通大学学报(医学版);2011年07期
11 赵晓忱;张梅;李静;王晓宁;贺鹏程;刘心;习杰英;陈丽梅;王梦昌;;自体外周血造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的临床疗效[J];西安交通大学学报(医学版);2011年05期
12 张立军;刘艾芹;钟利若;;孕16~28周胎儿脐血β-地中海贫血基因及其血红蛋白电泳、红细胞参数变异分析[J];中国当代医药;2011年16期
13 谢爱兰;陈尚勤;林益怡;王玉环;吕杰强;;脐血IL-6、IL-8、TNF-a在早产儿脑损伤中的临床意义及预测价值[J];中国微生态学杂志;2011年06期
14 陈玉平;兰炯采;吕毅;周同彬;王布强;;造血干细胞体外红系定向培养方法的研究进展[J];中国输血杂志;2011年06期
15 黎海澜;焦伟;莫柱宁;阳子骥;;脐带血替代外周血用于新生儿血型和直接抗球蛋白试验的效果观察[J];重庆医学;2011年20期
16 刘芳;于娟;;巴利昔单抗在ABO血型不合造血干细胞移植中的应用[J];当代护士(专科版);2011年06期
17 陈蔚瑜;眭建忠;黄沛清;欧水英;陈汝芳;黄淑瑜;;1358例孕中晚期羊水及脐血染色体核型分析[J];中国妇幼保健;2011年24期
18 刘爱华;杨宪勇;高美华;;脐血和成人外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的分离及功能特征的比较[J];泰山医学院学报;2011年04期
19 韦喜娟;黄寿星;刘陶文;;新生儿脐血血红蛋白Bart定量技术筛查α地中海贫血研究现状[J];华夏医学;2011年03期
20 王琪;刘宪民;祖启明;刘松波;曹艳;项良碧;;人脐血间充质干细胞与β-磷酸三钙的生物相容性[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年29期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 时庆;侯怀水;鞠秀丽;李栋;沈柏均;;深低温冻存十六年后脐血造血干细胞活性的检测[A];山东制冷学会2008年优秀论文选集[C];2008年
2 陈焱;陈方平;彭建强;吴小兵;吴新华;傅敢;;2型重组腺相关病毒对脐血CD_(34)~+造血干细胞的转导效率研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
3 邹典斌;张秋堂;;脐血和骨髓中造血干/祖细胞免疫表型差异的研究[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
4 张戎;顾镭;王慧娟;杨晓帆;季晓辉;;SLE血清中IL-15对CD34~+造血干细胞分化发育为树突状细胞的影响[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
5 张志灵;李俊英;王琨;毛宝玲;闫平;楮莹嗥;;10例非亲缘性脐血移植患者并发症的护理[A];全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2004年
6 苗振川;王承艳;丰美福;;脐血来源的间充质细胞支持造血作用的研究[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编[C];2002年
7 陈强;邹海;徐晓红;孙水仙;陈雪黎;宋宁;姚志强;左雅琴;陈扬会;陈宪辉;米新玉;曾洁;王憬惺;;中国人群HLA-B~*15多样性[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
8 李廷玉;张萱;陈立;魏小平;瞿平;刘友学;陈洁;;出生时抗氧化维生素与重金属对2岁幼儿智力发育的交互作用[A];中国营养学会妇幼营养第七次全国学术会议论文汇编[C];2010年
9 展富琴;冯建国;计雪强;冯星;丁云芳;;关于健康新生儿脐血胆汁酸正常值的探讨[A];’96全国优生科学大会大会学术讲演与大会论文摘要汇编[C];1996年
10 杨晓凤;王红梅;林慧丽;;脐血CIK细胞治疗肿瘤性疾病的临床研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 唐华;内皮型脾脏基质细胞诱导造血干细胞分化为调节性树突状细胞[D];浙江大学;2005年
2 陈志营;系统性红斑狼疮造血干/祖细胞异常及免疫调节治疗的研究[D];吉林大学;2005年
3 宋一芳;实时监测小鼠单个造血干细胞在体外长期培养中的特性研究[D];复旦大学;2009年
4 赵书平;PSC3445细胞——人脐血中一种新的成体干细胞[D];第二军医大学;2004年
5 吴学东;不同来源造血干细胞移植治疗重型地中海贫血的临床研究[D];南方医科大学;2010年
6 黄景玲;脐血间充质干细胞修复心肌的研究和干细胞临床应用[D];兰州大学;2010年
7 沈建良;脐血树突状细胞体外诱导抗白血病细胞毒效应[D];军医进修学院;2001年
8 解纯刚;转THPO和FL膜外区基因骨髓间充质干细胞对脐血造血干/祖细胞的体外扩增研究[D];浙江大学;2006年
9 王明元;脐血CD133+造血干/祖细胞生物学特性的研究和抗CD133单克隆抗体的研制[D];苏州大学;2005年
10 李长东;人胎盘间充质干细胞的分离鉴定及其对脐血造血干/祖细胞体外扩增的支持作用[D];吉林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 费小明;脐血造血干细胞的体外扩增[D];南京医科大学;2003年
2 徐建萍;脐血造血干细胞体外分化为内皮细胞的实验研究[D];福建医科大学;2004年
3 刘铭彦;玻璃化法低温保存脐血造血干细胞的研究[D];大连理工大学;2007年
4 程瑞芳;来源于脐血与骨髓中间充质干细胞和造血干细胞的比较[D];天津医科大学;2004年
5 张永卓;人胎盘组织源造血干/祖细胞的初步研究[D];郑州大学;2005年
6 石凯;脐血CD34~+干细胞分离与体外扩增的实验研究[D];南京工业大学;2003年
7 蔡永国;F68及其联合DMSO对脐血造血细胞低温保护作用的研究[D];第三军医大学;2002年
8 鲍春雨;脐血造血干/祖细胞体外扩增及无血清培养的实验研究[D];大连医科大学;2004年
9 袁华魏;脐血单个核细胞扩增前后的骨髓基质植入能力及条件研究[D];大连医科大学;2004年
10 邹旭凤;胎盘间充质干细胞对骨髓、脐血、胎盘不同来源造血干细胞的体外扩增支持作用比较[D];郑州大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 南方日报记者 曹斯 陈枫 实习生 黄雅君 通讯员 李岩 葛峰 统筹 梅志清;私库脐血转公 可造福更多人[N];南方日报;2010年
2 本报记者 王照重;青岛大学医学院附属医院涉嫌非法采集脐血[N];中国消费者报;2010年
3 记者 白景辉 实习生 周立峰;我区300多人报名捐献造血干细胞[N];宁夏日报;2005年
4 记者 孙磊;大庆有个造血干细胞志愿者服务队[N];大庆日报;2008年
5 秦洋 侯晓俊 左彤;忻州师院1900名师生成为捐献造血干细胞志愿者[N];山西日报;2008年
6 通讯员 张质力;我州实现首例造血干细胞捐献[N];红河日报;2008年
7 记者 惠婷;六年捐出五十份造血干细胞[N];河南日报;2009年
8 记者 孙庆发 刘东龙;黑河有了造血干细胞血样采集站[N];黑河日报;2009年
9 记者 陈青 通讯员 刘蓉芳;申城共151人捐献造血干细胞[N];文汇报;2009年
10 记者孟霞;首府倡议市民志愿捐献造血干细胞[N];伊犁日报(汉);2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978