芦荟多糖对表皮细胞增殖和细胞因子分泌的影响

【摘要】： 目的：观察芦荟多糖对体外培养人表皮细胞增殖和细胞因子分泌的影响，探讨其在创面愈合过程新生上皮重建中的作用。 方法：1、体外培养表皮细胞随机分为芦荟多糖组(25，50，100，200，400mg／L)和对照组。通过MTT法、细胞计数法和细胞融合时间以及[~3H]-TdR渗入量观察细胞增殖状况，流式细胞技术检测细胞周期，荧光标记法检测细胞内钙离子浓度，LDH漏出率反映细胞损伤程度，光镜和电镜观察细胞形态和超微结构。 2、ELISA和RIA法测定表皮细胞分泌生长因子(TGF-α、EGF和TGF-β_1)和炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-8和TNF)水平，Green法测定表皮细胞分泌NO水平。 结果：1、倒置相差显微镜观察到，各组表皮细胞形态基本相似，透射电镜下观察芦荟多糖组细胞增殖活跃，核内以常染色质为主，对照组以异染色质为主；与对照组比较，芦荟多糖组细胞增殖达峰值的时间较对照组提前1～2 d，细胞倍增指数显著上升，细胞融合时间明显缩短28～58 h，[~3H]-TdR渗入量显著升高(P＜0.05)，并呈剂量依赖性。 2、与对照组比较，芦荟多糖作用后表皮细胞[Ca~(2+)]i水平略有升高(P＜0.05)，G0／G1期细胞比例下降，G2／M期和S期细胞比例明显增高(P＜0.05)，LDH漏出率均有不同程度地下降(P＜0.05)。 3、与对照组比较，芦荟多糖作用后表皮细胞分泌TGF-α、EGF、TGF-β1和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF水平有不同程度升高(P＜0.05)，而NO水平则呈显著地下降(P＜0.01)，且呈剂量依赖性。 结论：芦荟多糖可能通过促进人表皮细胞增殖和促进生长因子TGF-α、TGF-β1和EGF及炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF的分泌，调节NO的产生，在创面愈合过程的新生上皮重建中发挥重要作用。