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环孢霉素A对大鼠脊髓损伤早期Cox-2与TNF-α表达的影响

陈勇忠  
【摘要】: 目的:探讨环孢霉素A(CsA)对大鼠脊髓损伤(SCI)早期的保护作用与机制。 方法:建立大鼠SCI实验动物模型。180只大鼠随机分成对照组、损伤组和损伤后CsA治疗组,每组各60只。分别进行造模,不同时间点麻醉处死、插管灌注、损伤节段脊髓取材、固定过夜、包埋、切片。标本分别行HE染色、免疫组织化学EnVision法检测TNF-a表达、免疫组织化学SP法检测Cox-2表达。利用HPIAS-2000高清晰度彩色病理图文报告管理系统对TNF-a和Cox-2的表达进行定量分析。 结果:1、HE染色后光镜下观察:正常大鼠脊髓可见白质、灰质和灰质中的前角与后角。损伤组及损伤后CsA治疗组伤后6h以内脊髓已出血,尚无坏死。随着时间延长,损伤组脊髓出现广泛灶性出血及出血后形成的囊腔,神经元变性坏死、溶解,有大量小胶质细胞增生和中性粒细胞浸润。随着时间延长,损伤后CsA治疗组脊髓有灶性出血,神经元细胞肿胀,部分神经细胞变性坏死,但出血、小胶质细胞增生和炎细胞浸润均较损伤组轻。2、Cox-2在正常组大鼠脊髓呈可疑阳性表达,损伤组大鼠脊髓呈强阳性表达,损伤后CsA治疗组大鼠脊髓呈弱阳性表达。损伤后2h损伤组和损伤后CsA治疗组即有Cox-2表达;损伤后6h Cox-2表达达高峰,但峰值持续时间短暂;损伤后48h Cox-2表达则降至接近基线水平,72h降至基线水平。三组各时间点的图像分析结果经单因素方差分析,差别有统计学意义(2h:F=179.670,P<0.001;6h:F=337.489,P<0.001;12h:F=393.312,P<0.001;24h:F=197.541,P<0.001;48h:F=35.174,P<0.001;72h:F=3.995,P=0.030)。3、TNF-a在正常组大鼠脊髓呈可疑阳性或弱阳性表达,损伤组大鼠脊髓呈强阳性表达,损伤后CsA治疗组大鼠脊髓呈中等强度阳性表达。损伤后2h损伤组和损伤后CsA治疗组即有TNF-a表达;损伤后12h TNF-a表达达高峰,但峰值持续时间短暂;损伤后72h TNF-a表达则降至基线水平。三组各时间点的图像分析结果经单因素方差分析,组间有显著性差异(2h:F=300.328,P<0.001;6h:F=1856.199,P<0.001;12h:F=3710.988,P<0.001;24h:F=2516.988,P<0.001;48h:F=647.982,P<0.001;72h:F=3.454,P=0.046)。 结论:CsA能显著降低SCI后脊髓组织中Cox-2和TNF-a的表达,CsA能够减轻脊髓继发性损伤,对继发性SCI有治疗作用。


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