白细胞介素10对重症急性胰腺炎大鼠甲状旁腺激素受体1表达的影响和低钙血症的相关研究

【摘要】： 目的观察白细胞介素10(IL-10)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠细胞因子、血钙水平和肾脏、骨组织甲状旁腺激素受体1(PTHR1)表达的影响,探讨SAP低钙血症的发生机制及IL-10的应用价值。 方法将SD大鼠54只随机分为3组,假手术组(SO)、SAP组、SAP IL-10治疗组(IL-10),每组又分12、24h两个亚组,12h组每组8只,24h组每组10只。以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立SAP模型,自股静脉置管给药。观察各组血清钙、淀粉酶、腹水量和胰腺病理改变;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清IL-6、TNF-α水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析肾脏、骨组织细胞间粘附分子1(ICAM-1)和PTHR1的mRNA表达水平,Western-blot法检测肾脏、骨组织PTHR1的蛋白表达水平。 结果 ⑴SAP制模后血清淀粉酶升高,腹腔可见大量腹水,胰腺组织出血坏死明显;IL-10组腹水量减少,胰腺病理学改变减轻,大鼠存活率提高;SO组无腹水,胰腺未见组织学改变。 ⑵在SAP组血清TNF-α、IL-6水平升高,肾脏、骨组织ICAM-1 mRNA表达上调,血清总钙和离子钙浓度均显著降低。 ⑶IL-10治疗组与SAP组比较血清TNF-α水平12h [(23.2±13.7)pg/ml vs. (30.5±8.6)pg/ml ; t=1.240 , P=0.239]有所降低,但无统计学意义, 24h [(13.2±6.1)pg/ml vs. (24.5±11.8)pg/ml; t=2.379,P=0.033]则明显下降;IL-6水平12h [(30.8±17.7)pg/ml vs. (121.4±39.1)pg/ml; t=5.651,P=0.000]和24 h [(15.9±6.6)pg/ml vs. (51.5±14.7)pg/ml; t=5.909,P=0.000]均显著下降;肾脏、骨组织ICAM-1 mRNA表达下调;血清总钙12h [(2.17±0.07)mmol/L vs (2.02±0.06)mmol/L,P=0.002]和24h [(2.21±0.10)mmol/L vs (2.11±0.08)mmol/L, P=0.032]以及离子钙12h [(1.11±0.05)mmol/L vs (1.01±0.06)mmol/L, P=0.001]和24h [(1.17±0.06)mmol/L vs (1.09±0.08)mmol/L, P=0.014]均得以改善;TNF-α、IL-6水平分别与血清总钙和离子钙浓度分别呈负相关。 ⑷肾脏、骨组织PTHR1 mRNA和蛋白表达在诱发SAP后显著下调(P0.01); IL-10组与SAP组比较肾脏、骨组织PTHR1 mRNA和蛋白表达明显上调(P0.01);血清Il-6水平分别与肾脏(r=-0.613,P=000)和骨组织(r=-0.564,P=001) PTHR1蛋白表达呈负相关;血清TNF-α水平也分别与肾脏(r=-0.610,P=000)和骨组织(r=-0.659,P=000)PTHR1蛋白表达呈负相关。 结论 ⑴逆行胰胆管注射法辅以股静脉置管制作的SAP大鼠模型,是适合于多次重复静脉给药的理想的SAP模型。 ⑵肾脏、骨组织PTHR1表达下调是SAP低钙血症的重要原因之一。 ⑶细胞因子介导的炎症反应使PTHR1处于低表达状态,是SAP时甲状旁腺激素抵抗和低钙血症的基础。 ⑷IL-10对细胞因子的干预能降低体循环以及肾脏和骨组织局部炎症介质的表达水平,上调PTHR1的表达,改善SAP低钙血症。