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关节腔注射“玻璃酸马钱子总碱凝胶液”对实验性大鼠KOA影响的研究

赵俊峰  
【摘要】:目的: 通过观察“玻璃酸马钱子总碱凝胶液”对实验性大鼠膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)模型关节软骨病理形态以及膝关节关节液中基质金属蛋白酶1(MMP-1)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子a (TNF-α)的含量和软骨中基质金属蛋白酶13(MMP-13) mRNA表达的影响,初步探讨玻璃酸马钱子总碱凝胶液在防治KOA方面的疗效与机制。 方法: (1)以4%木瓜蛋白酶溶液膝关节腔内注射建立大鼠KOA模型,取无造模的大鼠为正常组,造模后的大鼠分为生理盐水组(NS)、溶媒组、玻璃酸钠组(SH)及玻璃酸马钱子总碱凝胶液高剂量组、玻璃酸马钱子总碱凝胶液常用剂量组(以下简称:马钱子总碱高剂量组、马钱子总碱常用剂量组)。除正常组外,其它各造模组分别经膝关节腔内注射生理盐水注射液、溶媒注射液、玻璃酸钠注射液、马钱子总碱高剂量注射液及马钱子总碱常用剂量注射液,每周干预1次,共5周后,取大鼠双侧膝关节进行相关观察检测; (2)通过肉眼观察关节软骨、滑膜大体形态改变,光镜下观察关节软骨经HE及AB-PAS染色后的病理形态改变; (3)分别用放免法和Elisa法检测各组膝关节关节液中MMP-1、IL-6、TNF-a的含量; (4)采用RT-PCR方法观察玻璃酸马钱子总碱凝胶液对大鼠KOA关节软骨中MMP-13mRNA表达的影响。 结果: (1)膝关节大体形态方面:正常组大鼠的膝关节软骨无退行性改变,滑膜也无炎性改变;NS组与溶媒组大鼠的关节滑膜增生严重,关节腔内积液明显,关节软骨呈灰白色,色泽晦暗,严重者软骨表面出现裂纹、缺损,深达骨质,部分软骨边缘可见骨赘;SH组和马钱子总碱高剂量组的大鼠关节滑膜中度增生,部分大鼠的关节腔内有粘稠的积液,关节软骨变薄、稍粗糙,表面明亮度不明显,可见点状凹陷;马钱子总碱常用剂量组大鼠的滑膜轻度增生,少许积液,软骨尚光滑,有散在的点状凹陷。 (2)关节软骨病理形态方面:分析各组关节软骨的组织学-组织化学分级(HHGS)评分分数,造模2周后,模型组与正常组比较有显著差异(p0.05),模型组明显高于正常组。药物干预周期结束后,马钱子总碱高剂量组、马钱子总碱常用剂量组、SH组与NS组、溶媒组比较亦有显著差异(p0.05),前三者比后两者明显降低;马钱子总碱常用剂量组与马钱子总碱高剂量组和SH组对比也有显著差异(p0.05),前者明显低于后二者;而马钱子总碱高剂量组与SH组相比无显著差异(p0.05)。 (3)膝关节关节液中MMP-1、IL-6、TNF-a含量方面:马钱子总碱高剂量组、马钱子总碱常用剂量组、SH组与NS组、溶媒组相比均有显著差异(p0.05),前三者明显低于后二者;马钱子总碱常用剂量组与马钱子总碱高剂量组、SH组对比也有明显差异(p0.05),前者明显低于后二者;马钱子总碱高剂量组与SH组相比无显著差异(p0.05)。 (4)关节软骨中MMP-13 mRNA表达方面:马钱子总碱高剂量组、马钱子总碱常用剂量组、SH组与NS组、溶媒组相比均有显著差异(p0.05),前三者明显低于后二者;马钱子总碱常用剂量组与马钱子总碱高剂量组、SH组对比也有显著差异(p0.05),前者明显低于后二者;马钱子总碱高剂量组与SH组相比无显著差异(p0.05)。 结论: (1)马钱子总碱高剂量组、马钱子总碱常用剂量组与SH组均能不同程度改善木瓜蛋白酶诱导的大鼠KOA关节软骨的病理形态,减轻关节软骨的退变、损害及关节滑膜的炎症反应,其中以马钱子总碱常用剂量组的干预效果最为显著。 (2)关节腔注射玻璃酸马钱子总碱凝胶液对木瓜蛋白酶诱导的大鼠KOA防治作用的机制可能为:①降低膝关节关节液中IL-6、TNF-a的含量,从而减轻由其介导的关节炎症与损伤;②降低膝关节关节液中MMP-1的含量,减少大鼠软骨中MMP-13 mRNA的表达量,减轻关节软骨的降解与损害,从而维持关节软骨基质的稳定。


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