收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

不同种属动物肝微粒体CYP450酶对钩吻代谢的影响

杨樱  
【摘要】:目的中药钩吻是世界著名的有毒植物,历代本草著作对其都有收载,其使用历史源远流长,具有祛风攻毒、散结、止痛的功效。现代研究表明钩吻的根、茎、叶均有剧毒,为了更有效和安全的利用钩吻总生物碱,我们开展了半数致死量的研究。钩吻素子作为钩吻植株中含量最高的生物碱,选择其做为研究对象,进行猪、羊和小鼠肝脏微粒体对其代谢表征的比较研究,可以初步揭示其肝脏解毒的部分机制所在。由于发现猪羊与小鼠对钩吻的代谢存在不同之处,故运用细胞色素P450酶活性的异同来初步揭示三者之间的机制的异同。方法本课题首先将闽产钩吻根粉碎后用95%乙醇提取,减压下回收乙醇,加2%盐酸溶解后用氯仿萃取,浓氨水碱化水层,再用氯仿萃取,得到钩吻根总生物碱。根据预试验结果将40只小鼠分成4组,每组10只,按照5.5mg/kg、4.4mg/kg、3.52mg/kg、2.82mg/kg的剂量一次性灌服小鼠后观察24h内的情况。通过记录小鼠临床症状及死亡情况,观察闽产钩吻根总生物碱的急性毒性并用孙氏改良寇氏法计算LD50及其95%的可信区间。同时本课题采用Bradford法蛋白质定量测定试剂盒方法和Omura法对小鼠、猪以及羊肝微粒体的蛋白质及CYP450含量进行了测定,并运用高效液相色谱法,色谱柱:依利特色谱柱,150mm×4.6mm,i.d.5.0μm;流动相:乙腈:0.1%三乙胺,体积比为20:80;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;紫外检测波长:254nm;进样体积:20μL,来检测猪、羊和小鼠肝脏微粒体对其代谢表征的不同,我们运用探针法考察猪、羊、小鼠以及经过钩吻诱导后细胞色素P450酶活性的异同从而来初步揭示三者之间的机制的异同。结果经过实验研究发现闽产钩吻根总碱经口服给药对小鼠的LD50为4.12mg/kg,其95%的可信区间为3.764.52mg/kg。检测出所制备的小鼠、猪、羊肝微粒体的蛋白含量为6.973mg/mL、24.805mg/mL、28.200mg/mL,CYP450的含量分别为0.379nmol/mg、0.798nmol/mg、0.847nmol/mg。通过高效液相色谱法发现猪羊对钩吻素子均有代谢而小鼠未有明显代谢,同时我们对猪羊肝微粒体对钩吻素子代谢的最优条件进行了考察,研究发现钩吻素子在猪肝微粒体中代谢的最优体外反应体系条件是:孵育时间为90min、肝微粒体蛋白浓度为2.5mg/mL、钩吻素子的浓度500μg/mL;钩吻素子在羊肝微粒体中代谢的最优体外反应体系条件是:孵育时间为70min、肝微粒体蛋自浓度为3.0mg/mL、钩吻素子的浓度500μg/mL。通过探针药物法,最终通过实验推测CYP2A6酶与钩吻总碱的代谢(降解、包裹等)具有较大相关性。结论运用探针法考察猪、羊、小鼠以及经过钩吻诱导后细胞色素P450酶活性的异同从而来初步揭示三者之间的机制的异同,最终通过实验推测CYP2A6酶与钩吻总碱的代谢(降解、包裹等)具有较大相关性。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 叶正君,宋瑞琨,刘毓谷;不同结构的有机磷农药对肝微粒体酶活力的影响[J];卫生毒理学杂志;1987年01期
2 崔盘根;维甲酸和特比萘芬对人体肝微粒体环孢素代谢的影响[J];国外医学.皮肤性病学分册;1994年05期
3 邓多;陈倩超;刘韬;潘莹;毕惠嫦;黄红兵;;二喹啉甲酸检测法测定Sprague-Dawley大鼠肝微粒体蛋白浓度[J];今日药学;2010年09期
4 杜德林;;放射防护剂对肝微粒体羟基化系统的生化效应:体外研究[J];国际放射医学核医学杂志;1979年04期
5 海春旭;Trover F Slater;;十二烷基硫酸钠对肝微粒体系统的抗氧化作用[J];中国公共卫生学报;1993年03期
6 赵梁立,黄婉芸,全钰珠;吡喹酮在大环内酯类抗生素和糖皮质激素诱导的大鼠肝微粒体中的代谢[J];中国药学(英文版);1995年02期
7 李富君,孙贵范,李革新,陆春伟,刘淑兰,吕秀强;砷对大鼠肝微粒体脂质过氧化模型的影响[J];中国公共卫生学报;1998年04期
8 李珠明;长期过量铁负荷对小鼠肝微粒体丙二醛-蛋白加合物形成的影响[J];国外医学.卫生学分册;2000年01期
9 刘惠敏;骆子生;魏素珍;姜玲玲;;大鼠肝微粒体中的脂肪酸分析[J];医学研究杂志;2001年08期
10 柴士伟;潘桂湘;;药物代谢研究方法简述[J];天津中医药;2006年01期
11 韦炳华;王明军;邝翠仪;;复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响[J];中药材;2006年12期
12 王学敏,楼雅卿;抗痫灵对大鼠肝微粒体P450酶系的影响[J];北京大学学报(医学版);1990年05期
13 倪奕昌,王鸣杰,徐月琴,胡铃;抗疟药伯喹的肝微粒体体外代谢的研究[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1992年04期
14 赵莉,楼雅卿;大鼠肝微粒体体外代谢奥美拉唑的研究[J];药学学报;1995年04期
15 王海学,李端,许长江,刘骁;氟他胺在大鼠肝微粒体经细胞色素P450 1A2代谢的性别差异[J];药学学报;2002年08期
16 茅海琼;曾苏;;大鼠肝微粒体中芬氟拉明对映体氧化代谢的立体选择性研究[J];中国现代应用药学;2005年06期
17 刘艳;黄丽军;王珍;张一飞;朱大岭;;尼扎替丁对大鼠CYP1A2亚型的影响[J];中国药理学通报;2006年07期
18 王国利;刘金华;薛书霞;李景武;;奥美拉唑在大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学研究[J];中国药房;2006年12期
19 崔升淼;赵春顺;高坤;毛晶晶;何仲贵;;大鼠肝微粒体中葛根素的液相色谱-质谱测定法及药物代谢动力学[J];沈阳药科大学学报;2007年01期
20 欧扬;姜佳希;周文;;对乙酰氨基酚合用琥乙红霉素对大鼠肝微粒体CYP450的影响[J];中国医院药学杂志;2009年13期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郑姣;陈斌;曾玲;谭志荣;周宏灏;;葛根素对人肝微粒体中细胞色素P450酶和人体内CYP1A2及CYP2D6活性影响的研究[A];第八次全国药物与化学异物代谢学术会议论文摘要[C];2006年
2 周婷;段晶晶;徐峰;;抑郁心境影响大鼠肝微粒体P450酶含量及活性[A];2010年广东省药师周大会论文集[C];2011年
3 田硕;高梅;孙加琳;王夙博;杜冠华;;口服黄芩素对大鼠CYP450亚型活性的影响[A];第十三届中国科协年会生物医药博士论坛论文集[C];2011年
4 蔡凝芳;刘智;程泽能;;氟非尼酮对CYP450活性的影响研究[A];第九届全国药物和化学异物代谢学术会议论文集[C];2009年
5 李晓宇;刘皋林;周佳纯;钱刚;高君伟;孙博;郭彦琨;;三七总皂苷注射液对大鼠肝CYP450酶影响研究[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年
6 王连生;周宏灏;;人体肝微粒体中安定的代谢研究[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集(第二部分)[C];2002年
7 王连生;周宏灏;;人体肝微粒体中安定的代谢研究[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年
8 李晓宇;刘皋林;周佳纯;钱刚;高君伟;孙博;郭彦坤;;三七总皂苷注射液对大鼠肝CYP450酶影响研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
9 吴东方;彭仁秀;叶丽萍;于萍;;水飞蓟素对小鼠四氯化碳肝损伤时肝微粒体及线粒体膜流动性的影响[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年
10 吴东方;彭仁秀;叶丽萍;于萍;;水飞蓟素对小鼠四氯化碳肝损伤时肝微粒体及线粒体膜流动性的影响[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集(第二部分)[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 翁小刚;戊己丸提取物不同配伍组方对大鼠CYP450酶的影响研究[D];中国中医科学院;2010年
2 曹军;姜黄素生物学作用的细胞与分子机制研究[D];大连医科大学;2006年
3 刘明远;去甲基文拉法辛前体药物和比索洛尔的药物动力学研究[D];吉林大学;2007年
4 李建喜;“喹胺醇”药代动力学及非临床毒理学研究[D];中国农业科学院;2006年
5 吴宇群;光活黄皮酰胺类化合物对肝P-450及谷胱甘肽的影响及其潜在的生物学意义[D];中国协和医科大学;1997年
6 胡红芳;恩诺沙星对鸡细胞色素P450酶系的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年
7 徐海燕;艾瑞昔布在大鼠肝微粒体内的代谢研究[D];沈阳药科大学;2006年
8 胡会青;盐酸双苯氟嗪的药代动力学和毒代动力学研究[D];河北医科大学;2009年
9 张文江;药物代谢研究[D];中国协和医科大学;1997年
10 梁高林;植物雌激素kobophenol A 的体内代谢产物及其机理研究[D];复旦大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨樱;不同种属动物肝微粒体CYP450酶对钩吻代谢的影响[D];福建中医药大学;2013年
2 姜敏;甲基莲心碱在大鼠肝微粒体内的代谢与CYP450关系的研究[D];江西医学院;2003年
3 张华海;喹噁啉类在大鼠和猪肝微粒体中脱氧速率与肝细胞中毒性的研究[D];华中农业大学;2010年
4 胡芳;醋制对五味子成分及CYP450酶效应研究[D];南京中医药大学;2011年
5 周常;中药对异育银鲫CYP450的诱导与抑制及对恩诺沙星代谢的影响[D];上海海洋大学;2011年
6 狄军艳;丁香酚对LPS处理大鼠肝微粒体细胞色素P450和b_5含量的影响[D];中国医科大学;2002年
7 单文雅;黄芪有效成分和冬凌草甲素的体外肝微粒体代谢研究[D];浙江大学;2012年
8 许雷;CYP450体外代谢系统对三种酚酸冰片酯类化合物的代谢研究[D];西北大学;2012年
9 于玮洁;海洋硫酸多糖916对大鼠CYP450不同亚型代谢酶的影响及性别差异的研究[D];中国海洋大学;2009年
10 王静;Columbin对实验性2型糖尿病大鼠肝脏药物代谢酶CYP450的影响[D];华中科技大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;中药研究专辑(27)[N];中国中医药报;2003年
2 陆志城;相互作用——药物合用的绊脚石[N];医药经济报;2002年
3 王满元;药物代谢研究的意义与进展[N];中国中医药报;2003年
4 陆志城;碳酸镧咀嚼片[N];医药经济报;2005年
5 吴伯镛;细胞色素P450酶与用药选择[N];中国医药报;2004年
6 解放军总医院药材处 周筱青 陈宜鸿;TDM在临床药学中的作用[N];中国高新技术产业导报;2001年
7 本报特约撰稿人 陆志城;向FDA的管理政策提出挑战[N];医药经济报;2003年
8 孙迎基;个性化治疗:未来医学的航标[N];医药经济报;2002年
9 本报特约撰稿人 陆志城;2003年美国FDA批准上市的新分子实体药物[N];医药经济报;2004年
10 张骁束梅英;偏头痛逢新对手[N];中国医药报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978