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针刺长强穴对学习记忆的影响及其效应机制研究

蔡昭莲  
【摘要】:目的在系统评价针刺治疗智力障碍临床有效性的基础上探讨导师治疗智力障碍的主穴"长强"穴对学习记忆的影响,并通过静息态功能核磁共振成像技术及动物实验探讨其中枢响应及分子生物学机制。方法1.系统评价研究:计算机检索1973年1月至2016年04月万方数据库、中国知网数据库、维普数据库、MEDLINE数据库及Cochrane临床试验注册中心发表和注册的针刺结合康复训练治疗儿童智力障碍的随机对照试验文献,按照Cochrane系统评价方法进行质量评价,运用Revman5.3.5软件进行偏倚风险分析及统计分析。2.静息态功能核磁共振研究:招募8名健康志愿受试者,运用西门子3.0T磁共振在针刺长强穴前后进行静息态图像采集,以双侧海马为种子点,采用功能连接的方法分析种子点与各脑区的功能连接情况。3.动物实验:选择7日龄SD大鼠80只,采用RICE法建立HIBD模型,分为后海穴(相当于人体的长强穴)组、空白组、模型组非穴组、假手术组各16只分别进行干预,治疗4周后通过Morris水迷宫进行干预后的行为学测试,采用免疫组化法、Western-blot法检测大鼠左侧海马区CREB、ERK1/2蛋白及磷酸化蛋白表达,采用实时定量PCR检测左侧海马区microRNA-134的表达。结果1.针刺治疗智力障碍系统评价结果:共纳入10个随机对照试验,共561例受试者,统计分析结果显示:①有效率:针刺综合治疗组优于单纯训练组(RR=1.37,95%CI[1.21,1.56]),两组差异有统计学意义(Z=3.73(p0.00001));②总智商及操作商,由于各研究间存在异质性,无法进行Meta分析;③言语商:基于Gesell量表评价,在提高ID患者言语商方面针刺综合治疗组优于单纯训练组(WMD=12.85,95%CI[9.06,16.64]),两组疗效差异有统计学意义(Z=6.65,p0.00001);④社会适应性评分:针刺综合治疗组优于单纯训练组(WMD=8.45,95%CI[3.75,13.15]),两组疗效差异有统计学意义(Z=3.52,p=0.0004);⑤小儿神经心理发育商:两组疗效比较无统计学差异(Z=1.15,p=0.25)。2.静息态功能核磁共振研究结果:与针刺前比较,针刺后,受试者右侧海马与左小脑后叶(BA19)、左中央前回(BA6)、右额上回(BA6)的功能连接减弱,与右楔前叶(BA37)的功能连接增强;左侧海马与左梭状回(BA19)、右颞下回(BA37)、右额下回(BA48)、左顶下小叶(BA40)功能连接减弱,与右颞叶(BA18)功能连接增强。3.动物实验结果:(1)Morris水迷宫实验:①定位航行实验:模型组的逃避潜伏期显著长于空白组、假手术组及后海穴组(P0.05);后海穴组比非穴组的逃避潜伏期短,具有显著差异(P0.05)。②空间探索实验:空白组穿越平台有效次数显著多于模型组及非穴组(P0.05),其余各组间比较不具有显著性差异(P0.05)。(2)免疫组化检测结果:①干预后模型组左侧海马组织中CREB的阳性表达低于空白组、假手术组及后海穴组,具有显著性差异(P0.05),后海穴组与非穴组比较具有显著差异(P0.05)。②干预后模型组左侧海马组织中ERK1/2的阳性表达低于空白组、假手术组及后海穴组,具有显著性差异(P0.05),后海穴组与非穴组比较具有显著差异(P0.05)。(3)Western-blot检测结果:模型组左侧海马CREB总蛋白表达较后海穴组、空白组、假手术组显著减少(P0.05),后海穴组表达比非穴组显著增加(P0.05);模型组左侧海马组织中p-CREB蛋白表达较后海穴组、空白组、非穴组、假手术组显著减少(P0.05),后海穴组与非穴组间表达无显著差异(P0.05);模型组左侧海马ERK1/2总蛋白表达较后海穴、空白组、非穴组、假手术组显著减少(P0.05),后海穴组与非穴组间表达无显著差异(P0.05);模型组左侧海马组织中p-ERK1/2总蛋白表达较后海穴、空白组、假手术组显著减少(P0.05);后海穴组表达比非穴组显著增加(P0.05)。(4)实时定量PCR检测显示,模型组左侧海马microRNA-134的相对表达量显著高于后海穴组、空白组、假手术组(P0.05),后海穴组左侧海马的microRNA-134相对表达量低于非穴组(P0.05)。结论1.系统评价及Meta分析研究表明,针刺治疗可提高单纯康复训练对智力障碍患者的疗效、社会适应能力及言语能力。但所纳入研究的样本量偏小,建议进一步开展大样本、多中心的随机对照试验。2.针刺长强穴对多个与认知及学习记忆相关的脑区与双侧海马的功能连接有调节作用,可能是长强穴治疗智力障碍的中枢机制。3.针刺后海穴可提高HIBD大鼠学习记忆能力,其分子机制可能与CREB信号转导相关,海马区microRNA-134可能参与了 CREB信号转导过程的调节。


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