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补阳还五汤联合骨髓间质干细胞移植治疗脊髓外伤性截瘫的实验研究

张国福  
【摘要】:目的 观察中药补阳还五汤联合骨髓间质干细胞(MSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经结构修复和神经功能恢复的治疗作用,以及移植的MSCs在宿主体内迁移、成活及分化的情况,并探讨其作用机制。方法 试验采用SD大鼠160只,运用改良Allen法打击大鼠胸10段脊髓制备成脊髓损伤模型,并随机分为中药高剂量(50g/kg/d)+MSCs组20只、中药中剂量(25g/kg/d)+MSCs组20只、中药低剂量(12.5g/kg/d)+MSCs组20只、MSCs组20只、假手术组10只、中药高剂量组20只、中药中剂量组20只、中药低剂量组20只、空白对照组10只。其中中药高剂量+MSCs组、中药中剂量+MSCs组、中药低剂量+MSCs组、MSCs组、假手术组行大鼠尾静脉移植带Brdu标记的MSCs。各组大鼠于术后1、3、5W采用改良Tarlov评分和斜板试验观察神经功能恢复,光学显微镜及透射电镜观察组织形态学情况,应用免疫组化检测带标记的MSCs在体内迁移、成活以及微管相关蛋白(MAP_2)、神经丝蛋白(NF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达情况。结果与空白对照组相比,各治疗组改良Tarlov评分和斜板试验在术后1、3、5W时均明显高于对照组(P0.01)。术后5W光学显微镜观察微囊计数,各治疗组较对照组低(P0.05),透射电镜检查显示治疗组大鼠脊髓损伤的程度较对照组轻。免疫组化检测显示,在术后1W各移植组的脊髓组织内可见Brdu标记阳性细胞(除外假手术组),3W~5W后可见有部分Brdu标记阳性细胞表达MAP_2、NF、NSE。术后5周中药(高、中、低剂量)+MSCs组Brdu阳性细胞计数较MSCs组均有显著性差异(P0.05),但中药+MSCs组各治疗组间比较无显著性差异(P0.05)。结论静脉注射移植的MSCs通过血液循环,在宿主体内能够迁移到达脊髓损伤组织;且能在宿主体内较长时间内存活;静脉注射移植的MSCs,在宿主体内可以向神经元方向分化,并促进神经结构的修复及神经功能的恢复;补阳还五汤能促进移植的MSCs在宿主体内迁移及成活,同时可明显减轻脊髓损伤的病理变化,有利于脊髓功能的恢复。


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