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丹皮酚逆转人白血病耐药细胞系K562/ADM细胞多药耐药的作用研究

董会月  
【摘要】: 目的:以人白血病多药耐药细胞株K562/ADM细胞为研究模型,研究丹皮酚(Paeonol,Pae)对K562/ADM细胞的逆转作用,并探讨其逆转多药耐药的可能机制。 方法:采用MTT法检测Pae对体外培养的K562.K562/ADM细胞的增殖抑制作用,测定非细胞毒性剂量和低细胞毒性剂量的Pae作用后ADM IC50变化;通过RT-PCR方法检测Pae作用后K562、K562/ADM细胞耐药相关基因mdr-1、MRP、LRP表达情况;免疫细胞化学染色的方法检测Pae作用后细胞膜P-gP的表达及凋亡相关基因P53、bcl-2蛋白的表达;western blot检测Pae作用后MAPK信号通路中P38激酶表达;TUNEL法检测Pae作用后细胞凋亡情况。 结果:Pae在5—100μgmml-1浓度范围内对K562、K562/ADM细胞的增殖均有抑制作用,在非细胞毒性剂量5μgml-1和低细胞毒性剂量12.5μgml-1下能明显降低ADM对K562、K562/ADM细胞的IC50;上述两种浓度Pae以及其与ADM作用48h后,RT-PCR结果显示mdr-1、MRP、LRP基因表达均不同程度降低;免疫细胞化学染色显示P-gp、P53、bcl-2表达降低;MAPK信号通路的P38激酶表达下降;与ADM联用组细胞凋亡指数明显增加。 结论:Pae能下调mdr-1、MRP、LRP基因的表达和P-gp的表达;Pae能下调P53、bcl-2蛋白的表达,促进细胞凋亡;Pae还降低MAPK信号通路中的P38激酶表达,因此Pae可能通过下调耐药相关基因及蛋白的表达,促进细胞凋亡而逆转耐药;另方面下调MAPK信号通路中的P38激酶表达可能是其逆转耐药的又一机制。


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