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3种食用菌活性物质的分离纯化及结构分析

吴小君  
【摘要】:本文以安络小皮伞Marasmius androsaceus)、花脸香蘑(Lepista sordida)、羊肚菌(Morehella esculenta)为材料,利用Sephadex LH-20凝胶柱层析、RP-18反相硅胶柱层析、200-300目正相硅胶柱层析对3种食用菌发酵培养的天然产物进行系统的分离纯化。 安络小皮伞固体发酵粗提物,经凝胶柱层析、反相硅胶柱层析及正相硅胶柱层析分离纯化,共分离到9个化合物。利用核磁共振、质谱等手段对这些化合物进行结构鉴定,其中化合物MA-9为新发现的吗啉二酮类化合物。小鼠镇痛活性实验表明,当MA-9浓度为1mg/ml,每只注射0.2m1时,对醋酸引起的小鼠扭体有43.94%的抑制率,显示有一定的镇痛作用。 研究表明,花脸香蘑液体摇瓶发酵液粗提物对水稻细条病病原菌、枯草芽胞杆菌、啤酒酵母、大肠杆菌皆有很强的抑制活性,对水稻细条病病原菌的最低抑制浓度为100μg/100μL.同时,该粗提物对水稻稻瘟病菌的孢子萌发有强的抑制作用,在50μg/100μL时相对抑制率达到95%以上。粗提物经凝胶柱层析和反相硅胶柱层析、正相硅胶柱层析并结合活性追踪实验,共分离到4个化合物。利用核磁共振、质谱等手段对这些化合物进行结构鉴定,其中化合物LS-5含有烯二炔结构。结果表明,LS-5对水稻细条病病原菌、枯草芽胞杆菌、啤酒酵母、大肠杆菌皆有很强的抑制活性,对水稻细条病病原菌的最低抑制浓度为50μg/100μL;LS-5在8μg/100μL时,对水稻稻瘟病菌孢子萌发的相对抑制率达到95%以上,有较强的抑制作用。采用圆形滤纸片法对每三天发酵液的粗提物进行抑制水稻细条病病原菌活性研究,同时采用高效液相色谱分析发酵液中LS-5的变化规律,分析结果表明,化合物LS-5在第12天产生并达到最大值。 羊肚菌固体发酵粗提物经凝胶柱层析和反相硅胶柱层析、正相硅胶柱层析分离纯化,共分离到5个化合物。利用核磁共振、质谱等手段对这些化合物进行结构鉴定,其中化合物ME-4为环(苯丙,甘)二肽,该化合物为首次从食用菌中分离得到。活性研究表明,化合物ME-5具有较强的抗氧化活性。


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