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5-氮杂-2’-脱氧胞苷联合SAHA对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其机制

李辉  
【摘要】:目的: 探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)对耐顺铂(DDP)人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其可能的机制。 方法: 以人肺腺癌敏感株A549、耐药株A549/DDP细胞为研究对象,(1)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选出5-Aza-CdR和SAHA对A549/DDP细胞的无毒浓度(即对细胞抑制率10%的药物浓度),并检测出顺铂与无毒浓度5-Aza-CdR或(和)SAHA联合对耐药细胞株的半数抑制浓度(IC50)和耐药指数;(2)采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况;(3)采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测48h后各组细胞耐药相关基因MDRl、LRP mRNA的表达。 结果: 5-Aza-CdR和SAHA对A549/DDP细胞的无毒浓度为分别为5μmol/L和1μmol/L,无毒浓度的两者均可使A549/DDP细胞对顺铂的IC50值下降,单独或联合应用时逆转倍数分别为1.6、1.8和4.6倍;经5-Aza-CdR和SAHA处理48h后各组细胞MDRl、LRP mRNA表达均明显减弱,凋亡明显增强,且两者联合具有协同作用(均P0.05)。 结论: 5-Aza-CdR和SAHA可以逆转A549/DDP细胞的DDP耐药,且两者联合具有协同作用,其作用机制可能是通过下调耐药相关基因MDR1、LRPmRNA的表达来实现的。


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