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藏红花酸对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜神经上皮的保护作用

赵永吉  
【摘要】:目的:研究藏红花酸对链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜神经上皮的保护作用及可能相关机制。材料与方法:雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,随机分为正常对照组(CON)10只,糖尿病大鼠(DM)制模组(30只)。随机选取30只大鼠腹腔注入STZ(60 mg/kg)诱导糖尿病大鼠产生,建模成功后将大鼠随机分为3组:糖尿病对照(DM)组、藏红花酸低剂量(DM+CRO(L))组(50mg/kg/d,p.o.)、藏红花酸高剂量(DM+CRO(H))组(100mg/kg/d,p.o.),藏红花酸用含0.5%羧甲基纤维素(Carboxymethyl Cellulose,CMC)蒸馏水溶解,正常对照组10只大鼠腹腔注入等量生理盐水。低剂量组和藏红花酸高剂量组每天分别给予相对应量的藏红花酸,空白对照组及糖尿病组每天给予3ml0.5%CMC蒸馏水。第8周末记录各组大鼠血糖情况,后将所有大鼠处死,取大鼠眼球分别行免疫组化检测视网膜神经上皮视神经节细胞及内核层细胞凋亡蛋白caspase3的表达、HE染色检测视网膜组织视神经节细胞、内从状层及内核层细胞厚度、蛋白质印记检测视网膜神经上皮蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)表达量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测大鼠视网膜神经上皮Bcl-2、TNF-a、Bax、PKC-βmRNA表达水平。结果:1、DM+CRO(H)与DM+CRO(L)组较DM组大鼠血糖均下降。2、DM组大鼠视网膜神经上皮厚度较CON组更薄,外核层、内核层与神经节细胞层更加紊乱,DM+CRO(H)与DM+CRO(L)组较DM组情况有所改善。3、免疫组化结果显示,DM组对照组较CON组大鼠视网膜内核层及神经节细胞层Caspase3的表达明显升高,DM+CRO(H)组较DM组Caspase3明显下降,DM+CRO(L)组较DM组Caspase3亦有明显下降。4、蛋白质印记法结果显示,DM+CRO(H)组与DM+CRO(L)较DM组大鼠视网膜神经上皮PKC表达降低,DM组较CON组PKC明显升高。5、qRT-PCR检测显示TNF-a、PKC-β及Bax mRNA表达量DM+CRO组较DM组明显降低,DM组较CON组明显升高,Bcl-2 mRNA表达量DM+CRO处理组较DM组明显升高。结论:藏红花酸对STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜神经上皮具有保护作用,其机制是通过抑制视网膜中凋亡基因TNF-a、Bax表达,提高凋亡抑制基因Bcl-2的表达,并且藏红花酸减少视网膜神经上皮PKC的表达从而抑制糖尿病大鼠视网膜中VEGF促新生血管作用,其主要的作用机制与降低PKC-β基因表达相关。


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