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虫生真菌优良菌株筛选及对油茶象甲的防治研究

练涛  
【摘要】:油茶Camellia oleifera是我国特有木本油料植物,与油棕、油橄榄、椰子并称为世界四大木本油料树种,由于其具有极高的经济价值和较强的市场竞争潜力,在我国南方各地被广泛种植。目前油茶病虫害日趋严重,其绿色防控研究工作愈来受到重视。油茶象甲Curculio chinensis是为害油茶果实最为严重的一种害虫,也是林业危险性有害生物之一,极大地影响油茶的产量和品质。为减少在林间防治油茶象甲过程中有毒化学农药的使用,提高生物防治在油茶生产中的利用,本研究将筛选对自然环境抗逆性强、对油茶象甲致病力高的绿僵菌Metarhizium spp.和球孢白僵菌Beauveria bassiana菌株,将筛选出来的菌株对油茶象甲进行时间-剂量-死亡率模型分析,并测试其在林间对油茶象甲成虫和5龄幼虫的防治效果。主要研究结果如下:1.在15℃、20℃、25℃、30℃和35℃共五个温度梯度下,6个菌株的生长速率、产孢量、孢子萌发率等生物学特性存在显著差异(P0.05)。Ma09在30℃和25℃时,生长速率最快;Bb01、Ma05、Ma25、Mac985在30℃时,生长速率最快;Bb02在25℃时,生长速率最快。6个菌株在温度为25℃时,产孢量和萌发率最高,在温度为15℃时,产孢量和萌发率最低。表明温度对各菌株的生物学特性有重要影响。在同一温度梯度下,6个菌株之间在生长速率、产孢量、孢子萌发率等生物学特性方面也存在显著差异(P0.05)。其中Bb01和Ma09的生长速率、产孢量、孢子萌发率在五个温度梯度中相对较优。不同菌株对油茶象甲成虫和5龄幼虫致病力差异显著(P0.05),其中Bb01和Ma09对油茶象甲成虫和5龄幼虫均具有较强的致病力:对成虫的LT_(50)分别为4.64d和4.93d,15d累计校正死亡率均达到100%,僵虫率分别为76.00%和78.67%;对5龄幼虫的LT_(50)分别为2.15d和3.49d,10d累计校正死亡率均达到100%,僵虫率分别为81.00%和86.31%。Bb01和Ma09具有在较宽的温度范围内生长快、产孢量大、孢子萌发率高的特点,而且对油茶象甲成虫和5龄幼虫的致病力强,因此在油茶象甲的生物防治中具有重要的应用价值。2.将筛选出的抗逆性强和致病力高的菌株Ma09和Bb01对油茶象甲成虫和5龄幼虫的毒力进行生测,并运用时间-剂量-死亡率模型对生物测定数据进行拟合。结果表明,随着接种天数的增加,油茶象甲各虫态的LD_(50)和LD_(90)相应降低,生防菌的剂量效应逐渐增强。油茶象甲5龄幼虫和成虫接种Ma09后第10d的LD_(50)对数剂量估计值分别为3.62和5.55,LD_(90)对数剂量估计值分别为5.75和8.11。油茶象甲5龄幼虫和成虫接种Bb01后第10d的LD_(50)对数剂量估计值分别为3.78和5.66,LD_(90)对数剂量估计值分别为5.77和7.77。Ma09和Bb01的致死时间随剂量的增大而缩短。Ma09菌株1.0×10~5~1.0×10~8孢子·m L~(-1)处理下5龄幼虫的LT_(50)由6.63d降至1.81d,成虫的LT_(50)由7.56d降至3.15d。Bb01菌株1.0×10~5~1.0×10~8孢子·mL~(-1)处理下5龄幼虫的LT_(50)由6.89d降至1.09d,成虫的LT_(50)由8.23d降至2.78d。3.Bb01和Ma09对油茶象甲成虫林间防治试验结果显示,喷菌前(4月),各处理区域虫口密度差异不显著(P0.05),4月中旬喷菌后,5~9月各处理区域之间虫口密度存在一定差异,其中除了5月和9月各处理区域虫口密度差异不显著外(P0.05),6~8月Ma09和Bb01处理区域的虫口密度显著低于对照区域虫口密度(P0.05)。5~9月Ma09对油茶象甲林间相对防效分别为34.32%、71.24%、53.14%、60.54%、13.61%;Bb01对油茶象甲林间相对防效分别为38.29%、61.98%、58.87%、72.65%、23.83%。Bb01和Ma09对油茶象甲5龄幼虫林间防治试验结果显示,林间喷菌后,油茶象甲5龄幼虫死亡率随时间推移而逐渐升高,喷菌后引入试虫的防效优于喷菌前引入试虫。喷菌后30d,各处理组死亡率均显著高于对照(P0.05),在Ma09各处理组中,除引入试虫5天后喷菌处理组死亡率为44.67%外,其它处理组死亡率均在70%以上;Bb01各处理组死亡率均在50%以上。喷菌后60天,两个菌株各处理组死亡率均显著高于对照(P0.05),除引入试虫5天后喷菌处理组死亡率在50%左右外,其余各处理组均在80%左右。喷菌后90天,Ma09和Bb01各处理组中,处理组死亡率均显著高于对照(P0.05),均以喷菌后当天引入试虫和喷菌后5天引入试虫的死亡率最高,均超过90%;喷菌后20天引入试虫的死亡率在80%左右;引入试虫5天后喷菌处理的死亡率在60%左右。以上研究结果表明,在林间喷施Ma09和Bb01菌液可达到长期持续控制油茶象甲成虫和5龄幼虫的效果。结论:相对于其它菌株,Ma09和Bb01不仅在相对较宽的温度范围内生长速率快、产孢量和孢子萌发率高,而且对油茶象甲成虫及5龄幼虫的致病力相对较强。在林间防治应用中能够有效减少油茶象甲成虫和5龄幼虫的虫口密度。因此,Ma09和Bb01对于昼夜温差较大山区中油茶象甲的防治具有重要应用价值。


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