青钱柳多糖对3T3-L1脂肪细胞CAP、ATGL、FTO和HMG-CoA表达的影响

【摘要】：在世界范围内，肥胖症已经成为一个主要的公共健康问题，它会导致糖尿病、高血压、心脏疾病以及其他健康问题。这就除了需要更多的临床降脂药物外，还需更多开发具有降脂效用的食品。而青钱柳叶被誉为“神茶”，近年来已有一些研究发现具有显著降糖降脂作用。现本文以青钱柳叶中提取纯化出的不同青钱柳多糖组分为研究对象，通过体外试验探讨青钱柳多糖降血脂作用。采用Q-PCR法检测青钱柳多糖各组分对3T3-L1脂肪细胞中的原癌基因c-Cbl相关蛋白(CAP)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-CoA）基因表达的影响。采用Western-blot法检测青钱柳多糖不同组分对3T3-L1脂肪细胞中的脂肪量和肥胖相关基因（FTO）、甘油三酯脂肪酶(ATGL)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-CoA）蛋白表达的影响。主要试验结果如下： （1）通过对脂肪细胞内形成的脂滴进行油红O染色并测定细胞内甘油三酯的含量探讨青钱柳多糖对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化影响，结果表明，青钱柳多糖对3T3-L1前体脂肪细胞分化影响较小。 （2）基因表达的结果表明，青钱柳多糖作用四天后各组分脂肪细胞中CAPmRNA表达显著提高；青钱柳多糖组分Ⅰ、Ⅱ都能极显著提高3T3-L1前脂肪细胞ATGL mRNA表达水平，青钱柳多糖组分Ⅲ、Ⅳ在作用八天时能显著提高ATGLmRNA表达水平；青钱柳多糖组分Ⅰ能极显著降低3T3-L1前脂肪细胞HMG-CoAmRN表达水平；青钱柳多糖组分Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ在作用四天时都能显著降低3T3-L1前脂肪细胞中HMG-CoA mRN表达水平。 （3）蛋白表达的结果表明，青钱柳多糖作用四天后，青钱柳多糖组分Ⅰ作用后3T3-L1脂肪细胞中FTO蛋白表达量下降；青钱柳多糖组分Ⅰ和Ⅲ对3T3-L1脂肪细胞作用八天时，FTO蛋白的表达显著或极显著减少；青钱柳多糖各组分都能使ATGL蛋白表达量显著或极显著的提高；随着时间的增加，青钱柳多糖组分Ⅰ各实验组细胞及组分Ⅳ中浓度为30μg/ml时，HMG-CoA蛋白表达量显著下降，青钱柳多糖组分Ⅱ和Ⅲ则无统计学上差异，但与空白组相比，青钱柳多糖作用四天和八天后各青钱柳多糖组分实验细胞中HMG-CoA蛋白表达显著提高或无统计学上的差异。