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青钱柳多糖对3T3-L1脂肪细胞CAP、ATGL、FTO和HMG-CoA表达的影响

傅凌韵  
【摘要】:在世界范围内,肥胖症已经成为一个主要的公共健康问题,它会导致糖尿病、高血压、心脏疾病以及其他健康问题。这就除了需要更多的临床降脂药物外,还需更多开发具有降脂效用的食品。而青钱柳叶被誉为“神茶”,近年来已有一些研究发现具有显著降糖降脂作用。现本文以青钱柳叶中提取纯化出的不同青钱柳多糖组分为研究对象,通过体外试验探讨青钱柳多糖降血脂作用。采用Q-PCR法检测青钱柳多糖各组分对3T3-L1脂肪细胞中的原癌基因c-Cbl相关蛋白(CAP)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)基因表达的影响。采用Western-blot法检测青钱柳多糖不同组分对3T3-L1脂肪细胞中的脂肪量和肥胖相关基因(FTO)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)蛋白表达的影响。主要试验结果如下: (1)通过对脂肪细胞内形成的脂滴进行油红O染色并测定细胞内甘油三酯的含量探讨青钱柳多糖对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化影响,结果表明,青钱柳多糖对3T3-L1前体脂肪细胞分化影响较小。 (2)基因表达的结果表明,青钱柳多糖作用四天后各组分脂肪细胞中CAPmRNA表达显著提高;青钱柳多糖组分Ⅰ、Ⅱ都能极显著提高3T3-L1前脂肪细胞ATGL mRNA表达水平,青钱柳多糖组分Ⅲ、Ⅳ在作用八天时能显著提高ATGLmRNA表达水平;青钱柳多糖组分Ⅰ能极显著降低3T3-L1前脂肪细胞HMG-CoAmRN表达水平;青钱柳多糖组分Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ在作用四天时都能显著降低3T3-L1前脂肪细胞中HMG-CoA mRN表达水平。 (3)蛋白表达的结果表明,青钱柳多糖作用四天后,青钱柳多糖组分Ⅰ作用后3T3-L1脂肪细胞中FTO蛋白表达量下降;青钱柳多糖组分Ⅰ和Ⅲ对3T3-L1脂肪细胞作用八天时,FTO蛋白的表达显著或极显著减少;青钱柳多糖各组分都能使ATGL蛋白表达量显著或极显著的提高;随着时间的增加,青钱柳多糖组分Ⅰ各实验组细胞及组分Ⅳ中浓度为30μg/ml时,HMG-CoA蛋白表达量显著下降,青钱柳多糖组分Ⅱ和Ⅲ则无统计学上差异,但与空白组相比,青钱柳多糖作用四天和八天后各青钱柳多糖组分实验细胞中HMG-CoA蛋白表达显著提高或无统计学上的差异。


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